微生物的遗传变异与菌种选育.ppt

,第5章微生物的遗传变异与菌种选育,8.1微生物遗传变异的物质基础,1.遗传和变异的物质基础2.DNA的结构与复制3.遗传物质的存在形式,遗传：,亲代与子代相似,变异：,亲代与子代、子代间不同个体不完全相同,遗传（inheritance）和变异（variation）是生命的最本质特性之一,遗传型：,表型（表现型）：,生物的全部遗传因子及基因,具有一定遗传型的个体，在特定环境条件下通过生长发育所表现出来的形态等生物学特征的总和。,表型是由遗传型所决定，但也和环境有关。,表型饰变：,表型的差异只与环境有关特点：暂时性、不可遗传性、表现为全部个体的行为,橘生淮南则为橘，生于淮北则为枳。,遗传型变异（基因变异、基因突变）：,遗传物质改变，导致表型改变特点：遗传性、群体中极少数个体的行为（自发突变频率通常为10-6-10-9）,微生物是遗传学研究中的明星：,微生物细胞结构简单，营养体一般为单倍体，方便建立纯系。,很多常见微生物都易于人工培养，快速、大量生长繁殖。,对环境因素的作用敏感，易于获得各类突变株，操作性强。,微生物的独特生物学特性：,（1）个体的体制极其简单；（2）营养体一般都是单倍体；（3）易于在成分简单的组合培养基上大量生长繁殖；（4）繁殖速度快；（5）易于积累不同的中间代谢产物或终产物；（6）菌落形态特征的可见性和多样性；（7）环境条件对微生物群体中各个个体作用的直接性和均一性；（8）易于形成营养缺陷型；（9）各种微生物一般都有相应的病毒；（10)存在多种处于进化过程中的原始有性生殖方式；,1.微生物遗传变异的物质基础1.1.遗传和变异的物质基础,遗传变异的物质基础是核酸(DNA)。,三个经典的实验:,肺炎双球菌的转化实验噬菌体的感染实验烟草花叶病毒的拆开与重建实验,1.1.1.肺炎双球菌的转化实验转化(transformation)是指受体细胞直接摄取供体细胞的遗传物质（DNA片段），将其同源部分进行碱基配对，组合到自己的基因中，从而获得供体细胞的某些遗传性状，这种变异现象，称为转化。,F.Griffith，研究对象：Streptococcuspneumoniae（肺炎双球菌）,SIII型菌株：有荚膜，菌落表面光滑，有致病性RII型菌株：无荚膜，菌落表面粗糙，无致病性,（1）动物实验对小鼠注射活RII菌或死SIII菌小鼠存活对小鼠注射活SIII菌小鼠死亡对小鼠注射活RII菌和热死SIII菌小鼠死亡抽取心血分离活的SIII菌,1928年，Griffith进行了以下几组实验：,Griffith转化试验示意,混合培养,RII型活菌,SIII型活菌,SIII型热死菌,RII型活菌,SIII型活菌,健康,健康,健康,健康,健康,健康,健康,病死,病死,病死,（2）细菌培养实验,（3）S型菌的无细胞抽提液试验,以上实验说明：加热杀死的SIII型细菌细胞内可能存在一种转化物质，它能通过某种方式进入RII型细胞并使RII型细胞获得稳定的遗传性状，转变为SIII型细胞。,热死SIII菌不生长活RII菌长出RII菌热死SIII菌长出大量RII菌和10-6SIII菌,活R菌+S菌无细胞抽提液长出大量R菌和少量S菌,+活RII菌,平皿培养,1944年O.T.Avery、C.M.MacLeod和M.McCarty从热死S型S.pneumoniae中提纯了可能作为转化因子的各种成分，并在离体条件下进行了转化试验：,只有S型细菌的DNA才能将S.pneumoniae的R型转化为S型。且DNA纯度越高，转化效率也越高。说明S型菌株转移给R型菌株的，是遗传因子。,（1）含32P-DNA的一组：放射性85%在沉淀中,上清液中含15%放射性,沉淀中含85%放射性,1.1.2噬菌体感染实验,A.D.Hershey和M.Chase，1952年,沉淀中含25%放射性,上清液中含75%放射性,以35S标记蛋白质外壳做噬菌体感染实验,（2）含35S-蛋白质的一组：放射性75%在上清液中,1.1.3烟草花叶病毒的拆开与重建实验,为了证明核酸是遗传物质，H.FraenkelConrat（1956）用含RNA的烟草花叶病毒（TMV）进行了著名的植物病毒重建实验。将TMV在一定浓度的苯酚溶液中振荡，就能将其蛋白质外壳与RNA核心相分离。分离后的RNA在没有蛋白质包裹的情况下，也能感染烟草并使其患典型症状，而且在病斑中还能分离出正常病毒粒子。,选用TMV和霍氏车前花叶病毒（HRV），分别拆分取得各自的RNA和蛋白质，将两种RNA分别与对方的蛋白质外壳重建形成两种杂合病毒：,（1）RNA（TMV）蛋白质（HRV）（2）RNA（HRV）蛋白质（TMV）用两种杂合病毒感染寄主：（1）表现TMV的典型症状病分离到正常TMV粒子（2）表现HRV的典型症状病分离到正常HRV粒子。上述结果说明，在RNA病毒中，遗传的物质基础也是核酸。,MTVHRV,HRVMTV,1.2DNA的结构与复制,1.2.1DNA的结构,四种碱基：A(腺嘌呤adenine)、T(胸腺嘧啶thymine)、C(胞嘧啶cytosine)、G(鸟嘌呤guanine)一个DNA分子可含几十万或几百万碱基对，分子量最小的2.3104，最大的达11010，右手螺旋，每个螺旋10对碱基,DNA双螺旋,蛋白质,染色质的一部分,放大,再放大,DNA,放大为平面模式图,B-DNA活性最高，Z-DNA活性最低。,基因是一切生物体内储存遗传信息的、有自我复制能力的遗传功能单位。它是DNA分子上一个具有特定碱基顺序，即核苷酸顺序的片断。按功能可分三种：第一种是结构基因，编码蛋白质或酶的结构，控制某种蛋白质或酶的合成。但tRNA和rRNA基因不编码蛋白质。第二种是操纵区，它的功能像“开关”，操纵结构基因的表达。第三种是调节基因，它控制结构基因。例如：大肠杆菌三种有关利用乳糖的酶是由三个结构基因决定的。先由调节基因决定一种阻抑蛋白封闭操纵区的作用，使三个结构基因都不能表达，阻抑了酶的合成。当培养基中有乳糖时阻抑蛋白失活，不能封闭操纵区，因而结构基因得以表达，合成能利用乳糖的酶。一个基因的相对分子质量大约为6l05，约有1000个碱基对，每个细菌约具有5000至10000个基因。基因控制遗传性状，但不等于遗传性状。任何一个遗传性状的表现都是在基因控制下的个体发育的结果。从基因型到表现型必须通过酶催化的代谢活动来实现。基因直接控制酶的合成，即控制一个生化步骤，控制新陈代谢，从而决定了遗传性状的表现。,1.2.2DNA的复制,半保留、半不连续复制，复制过程都存在引发、延长和终止3个阶段,在原核生物中，复制起始点通常为一个，而在真核生物中则为多个。,DNA复制的不同方式,1.3.遗传物质的存在形式,基因组（genome）：一个物种的单倍体的所有染色体及其所包含的遗传信息的总称,原核生物（如细菌），多为单倍体（在一般情况下只有一条染色体）真核微生物，多条染色体，例如啤酒酵母有16条染色体。有时为双倍体,质粒（plasmid）：一种独立于染色体外，能进行自主复制的细胞质遗传因子，主要存在于各种微生物细胞中。,转座因子（transposableelement）：位于染色体或质粒上的一段能改变自身位置的DNA序列，广泛分布于原核和真核细胞中。,质粒和转座因子是细胞中除染色体以外的另外二类遗传因子,几种代表性质粒：,1.F-因子（fertilityfactor）致育因子/性因子，62106Dalton，94.5kb，相当于核染色体DNA2%的环状双链DNA，足以编码94个中等大小多肽，其中1/3基因（tra区）与接合作用有关。存在于肠细菌属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏球菌、链球菌等细菌中，决定性别。2.巨大质粒（mega质粒）为近年来在Rhizobium（根瘤菌属）中发现的一种质粒，分子量为200300106Dalton，比一般质粒大几十倍到几百倍，故称巨大质粒，其上有一系列固氮基因。,3.Ti（毒性）质粒（tumoeinducingplasmid）即诱癌质粒。长200kb，是一种大型质粒。存在于根癌土壤杆菌（Agrobacteriumtumefaciens）中。赋予宿主引起许多双子叶植物的根癌的特性。Ti质粒已成为植物遗传工程研究中的重要载体。一些具有重要形状的外源基因可借DNA重组技术设法插入到Ti质粒中，并进一步使之整合到植物染色体上，以改变该植物的遗传性，达到培育植物优良品种的目的。,4.Col因子（colicinogenicfactor）产大肠杆菌素因子。大肠杆菌素是一种由E.coli的某些菌株所分泌的细菌蛋白，具有通过抑制复制、转录、转译或能量代谢等而专一地杀死不含Col因子的近缘的其它肠道细菌。凡带Col因子的菌株，由于质粒本身编码一种免疫蛋白，从而对大肠杆菌素有免疫作用，不受其伤害。有些G+细菌也产生细菌素，如用于食品保藏的NisinColE1研究得很多，并被广泛地用于重组DNA的研究和用于体外复制系统上。,5.R（抗生素抗性和重金属抗性）因子（resistencefactor）最初发现于痢疾志贺氏菌（Shigelladysenteriae），后来发现还存在于Salmonella、Vibrio、Bacillus、Pseudomonas和Staphylococcus中。R因子由相连的两个DNA片段组成，即抗性转移因子（resistencetransforfactor，RTF）和抗性决定因子（r-determinant），RTF控制质粒copy数及复制，抗性决定因子带有抗生素或重金属的抗性基因。R-因子在细胞内的copy数可从12个到几十个，分为严紧型和松弛型两种，经氯霉素处理后，松弛型质粒可达20003000个/细胞。,6.降解性（代谢）质粒如假单胞菌属中发现。它们的降解性质粒可为一系列能降解复杂物质的酶编码，从而能利用一般细菌所难以分解的物质做碳源。这些质粒以其所分解的底物命名，例如有分解CAM（樟脑）质粒，XYL（二甲苯）质粒，SAL（水杨酸）质粒，MDL（扁桃酸）质粒，NAP（奈）质粒和TOL（甲苯）质粒等。,7.隐秘质粒不显示任何表型效应，只能通过物理的方法检测的质粒。如酵母菌的2um质粒。,转座因子,插入（IS）序列转座子(Tn)特殊病毒（Mu噬菌体）,定义：可在DNA链上改变自身位置的一段DNA序列。,原核生物中的转座子类型,转座的遗传效应,插入序列（IS，insertionsequence),分子量最小（仅0.71.4kb），只有引起转座的转座酶基因而不含其它基因，具有反向末端重复序列。已在染色体、F因子等质粒上发现IS序列。E.coli的F因子和核染色体组上有一些相同的IS，通过这些同源序列间的重组，就可使F因子插入到E.coli的核染色体组上，形成Hfr菌株。因IS在染色体组上插入的位置和方向的不同，其引起的突变效应也不同。IS被切离时引起的突变可以回复，如果因切离部位有误而带走IS以外的一部分DNA序列，就会在插入部位造成缺失，从而发生新的突变。,转座子（Tn，transposon),转座子又称转位子或易位子分子量居中（一般为225kb）。除了与转座作用有关的基因外，还含有抗性基因（对抗生素、某些毒物）、乳糖发酵基因等几个至十几个基因。从结构来看，Tn有两种类型，即末端为反向或顺向重复的IS，或末端为反向重复的序列。Tn虽能插到受体DNA分子的许多位点上，但并不完全是随机的，某些区域更易插入。,Mu噬菌体（即mutatorphage）,Mu噬菌体即诱变噬菌体是E.coli的一种温和噬菌体。含有噬菌体生长繁殖和转座所必需的基因，其分子量最大（39kb），含有20多个基因，但并没有固定的整合位置。Mu噬菌体引起的转座可以引起插入突变，其中约有2%是营养缺陷型突变。,转座的遗传效应,插入突变基因的移动和重排极性效应,2.微生物的基因突变,类型、特点、机制,一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变。,基因突变：,基因突变是重要的生物学现象，它是一切生物变化的根源，连同基因转移、重组一起提供了推动生物进化的遗传多变性。,突变,自发突变,诱变,环境因素的影响，DNA复制过程的偶然错误等而导致，一般频率较低，通常为10-6-10-9。,某些物理、化学因素对生物体的DNA进行直接作用，突变以较高的频率产生。,既包括现象，也包括过程。,2.1.突变的类型,2.1.1.从突变涉及范围，可以把突变分为基因突变和染色体畸变。,基因突变（genemutation），又称点突变。是发生于一个基因座位内部的遗传物质结构变异。往往只涉及一对碱基或少数几个碱基对。这两种碱基的替代突变改变了遗传密码的结构和该密码所编码的氨基酸。碱基对的增减则造成增减变异点以后全部密码及其编码的氨基酸，所以称为移码突变。,染色体畸变（chromosomeaberration）染色体畸变是一些不发生染色体数目变化而在染色体上有较大范围结构改变的变异，是由DNA(RNA)的片段缺失、重复或重排而造成染色体异常的突变。常导致生物死亡。,2.1.2.从突变所带来的表型的改变来讲，突变的类型可以分为以下几类：,形态突变型（morphologicalmutant）致死突变型(deathmutant)条件致死突变型（conditionallethalmutant）营养缺陷突变型（auxotrophmutant）抗性突变型（resistantmutant）,1）形态突变型（morphologicalmutant）指细胞形态结构发生变化或引起菌落形态改变的那些突变类型。,特点：,非选择性突变突变株和野生型菌株均可生长，但可从形态特征上进行区分。,如：,鞭毛有无，荚膜变化,菌落大小、颜色变化,形成芽孢缺陷菌株,细胞水平上的形态突变，突变株的检出更加困难。,噬菌斑大小、清晰度等,2)致死突变型指由于基因突变而造成个体死亡的突变类型，造成个体生活力下降的突变型称为半致死突变型。一个隐性的致死突变基因可以在二倍体生物中以杂合状态保存下来，可是不能在单倍体生物中保存下来，所以致死突变在微生物中研究得不多。,3）条件致死突变型（conditionallethalmutant）,常用的条件致死突变是温度敏感突变，用ts（temperaturesensitive）表示，这类突变在高温下（如42）是致死的，但可以在低温（如25-30）下得到这种突变。,特点：,负选择标记,这类突变型常被用来分离生长繁殖必需的突变基因,这类突变型的个体只是在特定条件，即限定条件下表达突变性状或致死效应，而在许可条件下的表型是正常的。,营养缺陷型的表示方法：,4）营养缺陷型（auxotroph）,基因型：,所需营养物的前三个英文小写斜体字母表示：hisC（组氨酸缺陷型，其中的大写字母C表示同一表型中不同基因的突变）,表型：,同上，但第一个字母大写，且不用斜体：HisC,在具体使用时多用hisC-和hisC+，分别表示缺陷型和野生型。,指某种微生物经基因突变而引起微生物代谢过程中某些酶合成能力丧失的突变型，它们必须在原有培养基中添加相应的营养成分才能正常生长繁殖。,特点：,在选择培养基（一般为基本培养基）上不生长,负选择标记,突变株不能通过选择平板直接获得,营养缺陷型是微生物遗传学研究中重要的选择标记和育种的重要手段,表型判断的标准：,在基本培养基上能否生长,5）抗性突变型（resistantmutant）,特点：,正选择标记（突变株可直接从抗性平板上获得-在加有相应抗生素的平板上，只有抗性突变能生长。所以很容易分离得到。）,表示方法：,所抗药物的前三个小写斜体英文字母加上“r”表示strr和strs分别表示对链霉素的抗性和敏感性,指一类能抵抗有害理化因素的突变型，细胞或个体能在某种抑制生长的因素(如抗生素或代谢活性物质的结构类似物)存在时继续生长与繁殖。根据其抵抗的对象分抗药性、抗紫外线、抗噬菌体等突变类型。,6)抗原突变型是指细胞成分，特别是细胞表面成分如细胞壁、荚膜、鞭毛的细致变异而引起抗原性变化的突变型。,其它突变型如毒力、糖发酵能力、代谢产物的种类和数量以及对某种药物的依赖性等的突变型。,毒力、生产某种代谢产物的发酵能力的变化等在实际应用中具有重要意义.突变类型一般都不具有很明显或可直接检测到的表型。其突变株的获得往往需要较大的工作量。,2.1.3.按突变的条件和原因划分突变可以分为自发突变和诱发突变。,自发突变是指某种微生物在自然条件下，没有人工参与而发生的基因突变。,细菌在一个增殖世代中，每个基因的突变率平均为10-7。考虑到自发突变中的大多数是检测不出来的沉默突变，可检突变自发突变率为10-8左右。,诱发突变是利用物理的或化学的因素处理微生物群体，促使少数个体细胞的DNA分子结构发生改变，基因内部碱基配对发生错误，引起微生物的遗传性状发生突变。凡能显著提高突变率的因素都称诱发因素或诱变剂。,（1)物理诱变利用物理因素引起基因突变的称物理诱变。紫外线、X-射线、-射线、快中子、-射线、激光等。（2)化学诱变利用化学物质对微生物进行诱变，引起基因突变或真核生物染色体的畸变称为化学诱变。如烷化剂、吖啶类化合物等。（3)复合处理及其协同效应同一种诱变剂的重复使用，两种或多种诱变剂先后使用，两种或多种诱变剂同时使用。增强诱变效果，（4)定向培育和驯化定向培育是人为用某一特定环境条件长期处理某一微生物群体，同时不断将他们进行移种传代，以达到累积和选择合适的自发突变体的一种古老的育种方法。由于自发突变的变异频率较低，变异程度较轻，故变异过程均比诱变育种和杂交育种慢得多。,2.2.基因突变的特点自发性各种遗传性状的改变可以自发地产生。稀有性一般在10-910-6之间。诱变性通过各种物理、化学诱发因素的作用，可以提高突变率，一般可提高10106倍。不对应性即突变表型与突变原因无直接对应关系。例如抗紫外线突变体不是由紫外线而引起，抗青霉素突变体并也不是由于接触青霉素所引起。独立性在一个群体中，各种性状都可能发生突变，但彼此之间独立进行。稳定性突变基因也可以一代一代地传下去。可逆性突变型基因也可以恢复到原来的野生型基因，称回复突变。实验证明任何突变既有可能正向突变，也可发生回复突变，二者发生的频率基本相同。,2.3.基因突变的机制,2.3.1.自发突变机制,多因素低剂量的诱变效应不少自发突变实质上是由于一些原因不详的低剂量诱变因素长期作用的综合结果。,1)微生物自身代谢产物的诱变效应已经发现在一些微生物中具有诱变作用的物质，例如咖啡碱、硫氰化合物、二硫化二丙烯、重氮丝氨酸等。,2)互变异构效应由于DNA分子中的A、T、G、C四种碱基的第六位碳原子上的酮基(T、G)和氨基(A、C)，胸腺嘧啶（T）和鸟嘌呤（G）不是酮式就是烯醇式，胞嘧啶（C）和腺嘌呤（A）不是氨基式就是亚氨基式。,正常为酮式和氨基式，当异构为烯醇式和亚氨基式时发生错配。酮式烯醇式互变或氨基亚氨基互变可引起转换。由正式反式（嘌呤与嘌呤）互变可引起颠换。,环状突变效应或简称环突效应。,由于模板链某处碱基环突，导致颠换。,2.3.2.诱发突变的机制,烷化剂是诱变育种极其重要的一类诱变剂，它们的化学结构都带有一个或多个活性烷基，并能转移到其它分子中电子密度极高的位置上去。这种活性烷基的数目表示它具有单功能、双功能或多功能。常见的烷化剂有硫酸二乙酯(DES)、甲基磺酸乙酯(EMS)、N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(NG)、N-亚硝基-N-甲基-氨基甲酸乙酯(NMU)、乙烯亚氨(EI)、环氧乙酸(EO)、氮芥(NM)等,1）碱基对置换（转换或颠换）,亚硝酸、羟胺、碱基类似物等也可引起突变。,2)移码突变这是由于DNA分子中一对或少数几对核苷酸的增加或缺失而造成的基因突变。,吖啶类染料及其化合物是有效的移码突变诱变剂，例如吖啶、吖啶黄、吖啶橙，5-氨基吖啶。,3)染色体畸变是指引起DNA分子较大损伤的诱变，包括染色体结构上的易位、倒位、缺失、重复等。紫外线、x射线、射线等射线、亚硝酸及烷化剂等均是引起染色体畸变的有效的诱变剂。,光复活作用经紫外线照射后的微生物暴露于可见光下时，可明显的降低其死亡率的现象称为光复活作用。,由于微生物中一般都存在着光复活作用，因此用紫外线照射菌液时，要在红灯下进行操作处理，然后再于暗室中或用黑布包起来培养。,切除修复作用也称暗修复作用，这种修复作用与光无关，整个修复过程是在四种酶的协同作用下进行,重组修复作用又称为复制后修复，必须在DNA进行复制的情况下进行。,紧急呼救(SOS)修复系统这是细胞经诱导产生的一种修复系统。它的修复功能依赖于某些蛋白质的诱导合成，而且这些蛋白质是不稳定的。,3.微生物的基因重组,基因重组又称为遗传传递，是指遗传物质从一个微生物细胞向另一个微生物细胞传递而达到基因的改变，形成新遗传型个体的过程。,3.1.原核生物的基因重组原核生物的遗传物质传递的方式有：有转化、转导、接合和溶原性转变等四种方式。,Conjugation接合,Transformation转化,Transduction转导,转化子,转化因子,感受态,转导子,转导颗粒,3.1.1.转化(transformation)转化是指一个种或品系的生物（受体菌）吸收来自另一个种或品系生物（供体菌）的遗传物质（DNA片段），通过交换组合把它整和到自己的基因组中去，从而获得了后者某些遗传性状的现象。,转化子（Transformedcell）,转化因子,3.1.2.转导(transduction)转导是以噬菌体为媒介，把一个菌株的遗传物质导入另一个菌株，并使这个菌株获得另一个菌株遗传性状。转导又分为普遍性转导和特异性转导。普遍性转导(generalizedtransduction)是指转导型噬菌体能传递供体菌株任何基因。如大肠杆菌P1噬菌体、枯草杆菌PBS1噬菌体,特异性转导(specializedtransduction)是指噬菌体只能转导供体染色体上某些特定的基因。大肠杆菌K12的温和型噬菌体，只能转导大肠杆菌染色体上半乳糖发酵基因(ga1)和生物素基因（bio）。,普遍性转导模式图,普遍性转导的三种后果：,进入受体的外源DNA通过与细胞染色体的重组交换而形成稳定的转导子,流产转导（abortivetransduction）（单线传递）,转导DNA不能进行重组和复制，但其携带的基因可经过转录而得到表达。,特点：在选择培养基平板上形成微小菌落,外源DNA被降解，转导失败。,SpecializedTransduction,温和噬菌体感染,整合到细菌染色体的特定位点上宿主细胞发生溶源化,溶源菌因诱导而发生裂解时，在前噬菌体二侧的少数宿主基因因偶尔发生的不正常切割而连在噬菌体DNA上,部分缺陷的温和噬菌体,把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中,3.1.3.接合(conjugation)接合是通过供体菌和受体菌的直接接触传递遗传物质。接合有时也称杂交,接合作用是由一种被称为F因子的质粒介导,F因子的分子量通常为5107，上面有编码细菌产生性菌毛（sexpili）及控制接合过程进行的20多个基因。,含有F因子的细胞：“雄性”菌株（F+），其细胞表面有性菌毛,不含F因子的细胞：“雌性”菌株（F-），细胞表面没有性菌毛,F因子为附加体质粒既可以脱离染色体在细胞内独立存在，也可插入（整合）到染色体上,F因子的四种细胞形式,a）F-菌株，不含F因子，没有性菌毛，但可以通过接合作用接收F因子而变成雄性菌株（F+）；,b）F+菌株，F因子独立存在，细胞表面有性菌毛。,c）Hfr菌株，F因子插入到染色体DNA上，细胞表面有性菌毛。,d）F菌株，Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时，形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，特称为F因子。细胞表面同样有性菌毛。,1）F+F-杂交,杂交的结果：给体细胞和受体细胞均成为F+细胞,理化因子的处理可将F因子消除而使F+菌株变成F-菌株,F+菌株的F因子向F-细胞转移，但含F因子的宿主细胞的染色体D