食品微生物检验及2010国标

食品卫生微生物学检验及国标GB4789-2010,内容提要,1.食品微生物检验的意义,有害微生物对人类和生产的影响：引起食品变质引起食物中毒导致人体患病,1.食品微生物检验的意义,是衡量食品卫生质量的重要指标,也是判定被检食品能否食用的科学依据可以判断食品加工环境及食品卫生的情况,为卫生管理工作提供科学依据可以有效地防止或减少食物中毒和人畜共患病的发生保证产品的质量,避免不必要的损失,生产环境的检验,原辅料的检验,食品加工、储藏、销售储环节的检验,食品的检验,2.食品微生物检验的范围,3.食品卫生标准中的微生物指标,指示菌概念:在常规安全卫生监测中，用以指示检样卫生状况及安全性的指示性微生物类型：一般性、特定性（如粪便污染）、其他项目：菌落总数、大肠菌群、耐热大肠菌群、总大肠菌群食源性致病菌及其毒素沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌及其肠毒素、溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌、阪崎肠杆菌、空肠弯曲菌、致病性大肠埃希氏菌等霉菌酵母菌及其毒素黄曲霉毒素B1、B2等其他项目抗生素残留、beta-内酰胺酶、商业无菌等,4.常用仪器设备,4.0光学显微镜4.1培养箱4.2水浴箱,4.常用仪器设备,4.3超净工作台：侧流式、直流式和外流式4.4干燥箱4.5高压蒸汽灭菌器,4.常用仪器设备,4.6离心机4.7滤菌器4.8均质器（匀浆器）4.9冰箱,4.常用仪器设备,玻璃器材及其他试管三角烧瓶烧杯玻璃棒培养皿接种环涂布棒酒精灯移液管移液器剪刀、镊子试管架,内容提要,菌落总数的意义,反映食品被细菌污染的程度预测食品耐放程度和时间估测食品腐败状况实际上是把检样中得致病菌、非致病菌、酵母菌、霉菌都计算在内的微生物杂菌总数由于倾注平板法的局限，会有一部分细菌在该实验条件下不生长，故计数结果要比实际值低,GB/T4789.2-2010菌落总数操作流程图,提示：若样品中可能含有表面蔓延生长的菌落时，可在培基凝固后再覆盖一薄层培基水产品置于301培养72h3h。,菌落总数的几个概念,菌落总数：AerobicPlateCount，食品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培基、温度、时间、pH、需氧性质等）所得1mL（g）检样中形成菌落的总数。只包括一群在平板技术琼脂上生长发育的嗜中温需氧或兼性厌氧菌的菌落总数。菌落总数不等于细菌总数。菌落：Colony，单个微生物在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度；形成肉眼可见有一定形态细菌群落。CFU:ColonyFormingUnits，菌落形成单位,菌落计数方法,有较大片状菌落生长者不宜采用，若片状小于平板一半时且余部均匀分布，则以半个平板菌落数2倍报告无明显界限链状菌落每条单链视为一个菌落,选取菌落数在30300cfu之间，无蔓延生长的平板计数低于30的记录具体菌落数，大于300的可记录为多不可计，每个稀释度采用两个平行的均数,计数结果的表述,若只有一个稀释度平板在30300CFU，则计算两平行平板的均数，再乘以稀释倍数报告之若有连续两个稀释度符合计数要求则按下公式,例1：10-2=232，24410-3=33，35例2：10-1=232，24410-2=33，29,菌落总数,所有符合计数要求的平板菌落数之和,较低稀释度有效平板数,较高稀释度有效平板数,较低稀释度的稀释倍数,N=(232+244+33+35)(2+20.1）10-1,新计数公式的统计学依据,平板菌落数越多，结果越具有代表性（不考虑稀释倍数和培养基的营养状况等）取样量越大，结果越具有代表性（同等取样条件、排除其他方面的干扰因素）不同的取样量赋予不同的权重，而不是简单的取平均值。新旧方法计算同一结果会有所不同,结果表述,报告方式,菌落数在100cfu内时按四舍五入修约，采用两位有效数字报告大于或等于100时，第三位数四舍五入修约，取前两位数字，例：20504321000or2.1105所有平板均为蔓延菌落而无法计数者报告菌落蔓延若空白对照有菌落则此次检测结果无效固体样品以cfu/g，液体以cfu/mL为单位,GB/T4789.15-2010霉菌酵母菌计数,基本过程类似菌落总数所用培养基为孟加拉红、马铃薯-葡萄糖琼脂培养基（PDA）稀释液为无菌蒸馏水培养温度为2528度，时间为5天计数方法：选择10150cfu的平板报告之，余规则同菌落总数,霉菌和酵母菌的食品卫生学意义,霉菌酵母菌可使食品和粮食发生霉变，常在低pH、低湿度、高盐、高糖含量食品中出现低温贮存的或含抗生素的食品亦可出现霉菌酵母菌能合成有毒代谢物引起各种急慢性中毒，特别某些霉菌毒素强烈致癌作为评价食品卫生质量的指示菌，判定食品被其污染程度，便于对检样进行卫生学评价,典型霉菌酵母菌菌落形态观赏,酵母菌菌落多类似细菌菌落，但大而厚，湿润、粘稠、易挑起，某些菌种长时间培养而呈皱缩状。颜色多为乳白、少数红色。,霉菌菌丝粗长，其菌落疏松，呈绒毛状、棉絮状或蛛网状。有的菌落呈圆形，有的无定形。由于其形成的孢子不同故其菌落常呈现肉眼可见的不同结构和色泽特征。,商业无菌,概念：罐头食品经过适度的杀菌后，不含有致病性微生物，也不含有在通常温度下能在其中繁殖的非致病性微生物。这种状态叫做商业无菌。保温：低酸性罐头食品36，10天酸性罐头食品301，10天预定输往热带地区的低酸性食品551，57天每日检查是否胖听、泄露开罐留样pH测定感官检查涂片染色接种,内容提要,GB4789.3-2010大肠菌群测定,定义：Coliforms，一群在36培养48h可发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏染色阴性无芽孢杆菌。该菌主要来源自人畜粪便，作为粪便污染指标评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能。,大肠菌群的食品卫生学意义,作为粪便污染食品的指标菌，MPN值愈低则说明食品受粪便污染程度及对人体健康危害程度愈低作为肠道致病菌污染食品的指针，大肠菌群数量越多则肠道致病菌存在的可能性就越高，但两者之间并不总是呈平行关系要求食品中大肠菌群完全不存在是不可能的，重要的是其污染程度即菌量,产气克雷白氏菌,大肠杆菌是人和温血动物肠道内普遍存在的细菌，是粪便中的主要菌种。一般生活在人大肠中并不致病，但它侵入人体一些部位时，可引起感染。,大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。一般认为可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。,总大肠菌群系指一群在37培养24小时能发酵乳酸、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。,耐热大肠菌群即粪大肠菌群，作为一种卫生指标菌，耐热大肠菌群中很可能含有粪源微生物，因此耐热大肠菌群的存在表明可能受到了粪便污染，可能存在大肠杆菌。但是，耐热大肠菌群的存在并不代表对人有什么直接的危害。,致病性大肠杆菌能引起食物中毒。致病性菌株能侵入肠粘膜上皮细胞，具有痢疾杆菌样致病力。肠致病性大肠杆菌（EPEC）、肠毒素性大肠杆菌（ETEC）和肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）等。,O157:H7（EHEC)肠出血性大肠杆菌，感染性腹泻是近年来新发现的危害严重的肠道传染病，已逐渐成为威胁人群健康的重要公共卫生问题。,大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的从属关系,第一法MPN法,初发酵：月桂基硫酸盐蛋白胨肉汤（LST）替代了乳糖胆盐发酵培基确证实验：煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）替代了乳糖复发酵培养基，取消了革兰氏染色实验培养时间：由24h延长至48h单位：由MPN/100g变为MPN/g取样量：由3.33g0.333g,大肠菌群计数检验流程,0,将产气的试管内样品接种到BGLB肉汤,LST不产气（-）小导管里无气泡,LST产气（+）,如何报告结果？,根据经确证后的对应浓度阳性管数查MPN表MPN：最可能数，基于泊松分布的一种间接计数方法,理想与现实的差距,新的方法更加严谨、合理、科学，与世界接轨然而老的卫生标准仍然沿用MPN/100g（mL）0.3MPN/g=30MPN/100g？如何换算？30MPN/100g0.3MPN/g加样量相应扩大10倍1g，0.1g，0.01g符合原方法的取样量查表，结果相应缩小10倍统计学上并不一定成立，只是过度临时采用仍然报告为0.3MPN/g，但要通知相关人员原因,第二法VRBA平板计数法,选择15150平板计数典型和可疑菌落,36118h24h,挑选10个菌落接种到BGLB,典型菌落为紫红色周围有红色胆盐沉淀环，0.5mm,内容提要,致病菌的食品卫生学意义,食品卫生标准规定任何食品中不得检出致病菌致病菌对人体健康的威胁是直接的和肯定的根据不同食品被污染的特点重点检验某些细菌如蛋禽肉主检沙门氏菌，罐头检肉毒梭菌等微生物毒素也是重点，如金葡的肠毒素、黄曲霉毒素等,微生物与食物中毒,概念：指摄入了含有生物性、化学性有害物质的食品或把有毒有害物质当作食品摄入后出现得非传染性的急性、亚急性疾病。特点：潜伏期短，来势急剧，短时多人同时发病；临床表现大致相同；与吃某种有毒食品有关；发病率高，人与人之间并不传染。分类：微生物性（细菌性、真菌性），化学性，动、植物性，以细菌性最常见。,细菌性食物中毒,概念：由于食入被病原菌或其毒素污染的食物后所引起的以急性肠胃炎为主的疾病。分类：感染型、毒素型、不定型,沙门氏菌食物中毒,引起食物中毒最常见的沙门氏菌：鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌易引起沙门氏菌中毒的食品：肉、蛋、乳类食品中毒原因：1、食用病畜禽的肉制品食品2、病畜禽、带菌人和动物使食品受污染3、用不洁净水外理食品,美国两种花生酱含沙门氏菌,沙门氏菌的从属与分类,归于肠杆菌科沙门氏菌属下设6个亚属：I、II、IV、V、VI及III（原亚利桑那菌属）常见的种：鸡沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌形态与染色：革兰氏染色阴性，无荚膜，无芽胞，多数有鞭毛，有动力，短小杆菌。培养特性：需氧或兼性厌氧，最适温度37，PH7.27.4。营养要求：不高，普通培养基生长良好。,常用选择性培养基比较,主要杂菌为大肠埃希氏菌，而两者区别在于是否发酵乳糖，故加入乳糖、酸碱指示剂两个指针来判断可疑菌落加入硫化氢是因为第III属产硫化氢而缓慢发酵乳糖BS选择性最强，可延长时间以免沙门菌生长亦被抑制多采用BS搭配DHL/SS/HE/WS，互补防漏检,克氏三糖铁（TSI）反应原理,三糖铁（TSI）反应模式及意义,若分解硫化氢则产生黑色FeS沉淀，若分解糖类产气则可见气泡或裂缝只有斜面和底层均产酸，且赖氨酸脱羧酶阴性者才可排除为沙门菌的可能性其余情况既可能是也可能不是沙门氏菌属的细菌,生化实验原理-硫化氢实验,目的：检测细菌对含硫化合物的分解能力原理：细菌分解含硫氨基酸生成硫化氢与培养基中的铁或者铅离子生成黑色化合物。方法：接种三糖铁琼脂或悬挂醋酸铅试纸。结果：培养基出现黑色为阳性,生化实验原理-动力试验,原理：在半固体上穿刺接种后，细菌因具有鞭毛扩散生长结果：阳性扩散生长阴性沿穿刺线生长注意：培养基温度；剧烈运动可能出现假阳性结果,生化实验原理-糖苷醇类发酵试验,不同细菌含发酵各种糖类的酶不同，分解糖类（糖醇类）的能力亦不同，根据分解不同糖类后产物的差异，来鉴定细菌。结果：若细菌分解糖类产酸，使培养基中的指示剂显酸性反应，颜色发生变化，若产气可使培养基中的导管或者琼脂出现气泡，无变化则说明阴性。说明：指示剂：酚红（黄红）、溴甲酚紫（黄紫）、溴麝香草酚蓝（黄蓝）注部分糖类灭菌需防止高温破坏。,目的：通过不同细菌对氨基酸之羧基的分解能力来鉴别细菌。原理：细菌产生的脱羧酶可脱掉氨基酸之羧基，生成胺和CO2，使培养基PH升高，指示剂显色。常用氨基酸有三种：赖氨酸：经赖氨酸脱羧酶生成尸胺和CO2。鸟氨酸：经鸟氨酸脱羧酶生成腐胺和CO2。精氨酸：经精氨酸脱羧酶生成精胺和CO2。结果：检测培养基由黄色变紫色为阳性，黄色为阴性，对照（无氨基酸）为黄色。,生化实验原理-赖氨酸脱羧酶试验,生化实验原理-尿素酶试验,目的：通过检测尿素酶来进行肠杆菌科细菌的鉴定原理：细菌产生的尿素酶分解尿素产生大量的氨，使培养基PH值升高，用酚红指示剂测出。结果：培养基变红为阳性，不变为阴性。,生化实验原理-氧化酶实验,原理：细胞色素C对苯二胺+萘酚吲哚酚蓝试纸片法操作：1、白金环取菌苔到试纸上2、加滴生理盐水到试纸结果：阳性0秒内变蓝,阴性不变色注意：避免含铁物质；空气易氧化,生化实验原理-靛基质实验(靛基质试验),目的：用于肠杆菌科细菌的鉴定。原理：细菌分解蛋白胨中色氨酸生成的吲哚与试剂中的二甲氨基苯甲醛作用生成红色的玫瑰吲哚。方法：纯培养物接种蛋白胨水后35培养24-48h沿管壁徐徐加入Kovac氏试剂或欧氏试剂0.5ml观察。结果：两层液体交界处出现红色为阳性，无色为阴性。,生化实验原理-氰化钾实验,原理:氰化钾是细菌呼吸酶系统的抑制剂,可与呼吸酶作用使酶失去活性,抑制细菌的生长,但有的细菌在一定浓度的氰化钾存在时仍能生长,以此鉴别细菌.试验方法:取培养2024h的营养肉汤培养液或菌落1环，接种至对照培养基及氰化钾培养基内，立即以橡胶塞塞紧，361培养2448h，观察结果。结果记录:对照管有菌生长，试验管有菌生长为阳性。对照管有菌生长，试验管无菌生长为阴性。,生化实验原理-半乳糖苷酶试验(ONPG实验),目的：迅速及迟缓分解乳糖的细菌阳性，而不发酵乳糖的沙门氏菌为阴性。原理：细菌迅速分解乳糖是有-半乳糖苷渗透酶和-半乳糖苷酶，但ONPG分子与乳糖相似且分子较小，故不需-半乳糖苷渗透酶也可分解乳糖。结果：呈现黄色为阳性反应，通常20-30min内显色注意：为提高阳性反应速度，需大量接种培养物。过酸出现假阴性，过碱则出现假阳性。,血清学实验原理,什么是血清学反应？血清学反应是指相应的抗原与抗体在体外一定条件下作用，可出现肉眼可见的沉淀、凝集现象。在微生物检验中，常用血清学反应来鉴定分离到的细菌，以最终确认检测结果。什么是抗原？是指能刺激机体免疫系统产生免疫应答而生成抗体和致敏淋巴细胞等免疫应答产物，并能与之发生特异性结合的物质。产生的相应抗体与抗原结合，形成抗原抗体复合物，产生免疫反应，从而保护机体不受抗原侵害而造成破坏。一般抗原都是外来物体，如细菌、病毒、寄生虫等。,血清学实验原理,什么是抗体？机体受外来抗原物质刺激后，产生的一种与该抗原发生特异性结合的免疫球蛋白(Ig)被分为G，A，M,E,D等,几类.最典型的抗体是IgG,有Y型三维结构,包含两套重链和轻链。,抗体攻击抗原（居中者）,血清学实验原理,何谓凝集反应？颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体结合，在电解质参与下所形成的肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应（Agglutinationreaction）。其中的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。何谓直接凝集反应？颗粒性抗原如细菌和细胞与相应抗体直接结合所出现的反应,玻片凝集法原理,何谓玻片凝集法？是一种常规的定性试验方法。用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。如将含有白叶枯病菌抗体的血清与待检菌液各一滴，在玻片上混匀，数分种后若出现肉眼可见的凝集块，即为阳性反应，证明该菌是痢疾杆菌。此法快速、简便，但不能进行定量测定。,玻片凝集法原理,单价血清：含单一抗体的血清多价血清：含多种抗体的血清如AF多价步骤：先多价后单价，先常见的后不常见的，先O后H，根据结果查表得到鉴定菌种抗原准备：多采用15g/L琼脂斜面培养物若O血清不凝集可转种至高含量（2.53%）琼脂培基上，干燥利于O-Ag发育,沙门氏菌的抗原类型,O抗原（菌体）：O1O67共58种，一种菌可能含1种或多种O-Ag，含相同O-Ag的归为一个血清群。有A、B、Z、O5763，O6567，多为AF群，故先要用此多价血清初筛H抗原（鞭毛）：特异相（az，z1z55），非特异性相（1，2l，w），多为双相菌，可发生相位变异Vi抗原（表面）：可阻止O与抗体反应，加热可消除,H抗原,菌体抗原（O抗原）,表面抗原（Vi抗原）,玻片凝集法操作,先应在玻片上滴加1滴生理盐水，加入菌苔做阴性对照并观察是否自凝，若有则说明该菌株发生S-R变异失去了O抗原成为粗糙型，故不能进行血清学分型。,菌体抗原（O抗原）的检测,AF群常见菌型鞭毛抗原（H抗原）表,血清学实验原理,不常见的菌型，先用163种沙门菌血清中的8种多价血清排查，若其中任一种或两种凝集则再用其所包含的各种H因子逐一检查H多价1：a,b,c,d,IH多价2：eh,enx,enz15,fg,gms,gpu,gq,mt,gz51,H多价3：k,r,y,z,z10,lv,lv,lz13,lz28,lz40H多价4：1，2；1，5；1，6；1，7；z6H多价5：z4z23,z4z24,z4z32,z29,z35,z36,z38H多价6：z39,z41,z42,z44H多价7：z52,z53,z54,z55H多价8：z56,z57,z60,z61,z62,志贺氏菌简介,志贺氏菌属为埃希氏杆菌，包括痢疾志贺氏菌、福氏志贺氏菌、鲍氏志贺氏菌和宋内氏志贺氏菌四群，是引起人类细菌性痢疾的病原菌。它们主要通过食品加工、集体食堂和饮食行业的从业人员中痢疾患者或带菌者污染食物，从而导致痢疾的发生，是一种较常见的、危害较大的致病菌。志贺氏菌的鉴定主要根据血清学反应，再以生化反应证实。,志贺氏菌检验流程,志贺氏菌属生化特性试验挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和半固体琼脂各一管。志贺氏菌在三糖铁琼脂内的反应结果为底层产酸而不产气(福氏志贺氏菌6型可微产气)，斜面产碱，不产生硫化氢，无动力，在半固体管内沿穿剌线生长。然后再做V-P/苯丙氨酸脱氨酶、赖氨酸脱羧酶、西蒙氏柠檬酸盐和葡萄糖铵试验，结果均应阴性反应。,葡萄糖半固体（无动力）,生化试验-西蒙氏柠檬酸盐试验,目的：用于肠杆菌科细菌的鉴定。原理：细菌能利用柠檬酸盐作为唯一的碳源，能在除柠檬酸盐外不含其他碳源的培养基上生长，分解柠檬酸盐生成碳酸钠，使培养基变碱性。结果：培养基由淡绿色变为深蓝色为阳性，不变色为阴性。,生化试验-V-P（Voges-Proskauer）试验,目的：常与甲基红试验同时使用，前者阳性的细菌后者常为阴性，反之亦然。可用于大肠杆菌和产气杆菌的区别。原理：一些细菌代谢产生的丙酮酸脱羧后生成的乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被空气氧化生成丁二酮，与蛋白胨的精氨酸的胍基反应生成红色化合物。结果：出现红色为阳性，不出现红色为阴性。,福氏志贺氏菌各型和亚型的型抗原和群抗原,挑取三糖铁琼脂上的培养物，做玻片凝集试验。煮沸菌液可消除K抗原对O抗原凝集的阻碍。,四种多价血清不凝集者用鲍氏（C群）多价1，2，3分别检查，并用115各型因子检查。若鲍氏多价不凝集则用痢疾志贺氏菌312型多价血清及各型因子血清检查。,GB/T4789.10/382010金黄色葡萄球菌检验,致病性：金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，因而食品受其污染的机会很多。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。可通过以下途径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。,检测流程,计数及血浆凝固酶实验,接种BHI肉汤及营养琼脂斜面,血浆凝固酶实验,目的：常用于鉴别葡萄球菌。原理：金黄色葡萄球菌可产生凝固酶，使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白附着于细菌表面产生凝固。分为与细胞壁结合的凝固酶（玻片法）与菌体生成后释放在培养基中的游离凝固酶（试管法）。试管法：三只含1：4血浆0.5ml的试管各接种待检菌、阳性菌株和肉汤阴性菌株，待检菌出现凝固且阴性对照不凝固为阳性。,细菌的溶血现象,根据细菌对红细胞的溶解能力可分为以下三种溶血类型及现象：（甲型）溶血:产生溶血素，不完全性溶血，在血琼脂平皿上菌落周围有12mm，较窄半透明的草绿色溶血环。（乙型）溶血:呈完全性溶血，在血平皿上菌落周围有24mm宽、界限分明、无色透明的溶血环。（丙型）溶血:不产生溶血素，在血琼脂平皿上的菌落周围无溶血环。,内容提要,溶血性链球菌,形态与染色：球形或椭圆形链状排列，无芽胞无鞭毛，革兰阳性培养特征：营养要求较高，普通培基生长不良。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、细小菌落。致病性：分布较广存在，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。常通过以下途径污染食品：食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手、面部有化脓性炎症时造成食品的污染；食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓时，其奶和肉尸某些部位污染；熟食制品因包装不善而使食品受到污染。可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。,蜡样芽孢杆菌,蜡样芽孢杆菌是一种地方性，土壤生活的，革兰氏阳性溶血性的杆状细菌，它会引起食物中毒，例如“炒饭综合症”，会产生防御性的内芽孢。由于错误地烹调方法造成孢子残留在食物上，更严重的是不当冷冻而让孢子发芽。细菌繁殖产生肠毒素，人食用后会产生呕吐、腹泻等不良症状。潜伏期816h。吃了冷藏不当而变质的剩饭是造成呕吐病症的最主要的原因。食用变质食物后15小时就会引起恶心、呕吐。这种病症与其他的变质引起的短期病症（如金黄色葡萄球菌所造成的）较难辨别。,副溶血性弧菌检验,弧菌科细菌的特点：1.革兰氏阴性杆菌或弯曲状的杆菌。2.端鞭毛，能运动。3.不形成内生孢子或小孢囊。4.有机化营养与兼性厌氧菌。5.无脱氮作用。6.大部分菌株为氧化酶阳性。7.