分子生物学期末考试重点

1.重组DNA技术定义根据人类的设计方向，将不同的DNA片段连接起来，然后在特定受体细胞中与载体同时复制和表达，产生影响受体细胞的新遗传性状。说出分子生物学的主要研究内容。1.DNA重组技术2。基因表达研究调节3。生物大分子的结构功能研究4。基因组、功能基因组和生物信息学研究DNA的一、二、三级结构简述第一阶段：四种核苷酸的连接和排列顺序显示其DNA分子的化学成分二次：两个多核苷酸连续逆平行线圈形成的双螺旋结构第3级：DNA双螺旋进一步扭曲线圈形成的特定空间结构原核DNA的特征是什么？DNA双螺旋缠绕在两个相互平行的脱氧核苷酸长链上，多核苷酸的方向由核苷酸间磷酸根结合的方向决定。一个是5-3，另一个是3 - 5DNA双螺旋中脱氧核糖和磷酸交替连接在一起，在外部形成基本骨架，碱基行从内部组合成碱基对5.DNA双螺旋结构模型是谁制造的？华生和克里克6.DNA是怎样复制的？它如何保证DNA复制的准确性？线性DNA的双链复制：将线性复制因子转换成环或多边形分子，在DNA末端形成针发行式结构，分子没有自由端，在某些蛋白质的介入下，在实际端开始复制。环DNA复制：类型，滚动环类型，d类型以亲代DNA分子为主题的半保存克隆也严格遵循克隆时的碱基对原则DNA聚合酶I非主要聚合酶保证了DNA合成的准确性DNA恢复系统：不匹配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统原核DNA复制的特征简述只有一个复制起点，可以在复制起点连续开始新的DNA复制。只有一个复制单元，但可以有多个复制叉8.真核生物DNA的复制控制在什么级别？调节细胞生命周期水平；染色体水平调节；复制器级别调节9.细胞通过什么样的修复系统修复DNA损伤？不一致恢复，不一致恢复；突变碱和核苷酸片段的切除和修复；重组修复，复制后修复；DNA直接修复，嘧啶二聚体修复；SOS系统，DNA的修复导致变异10.什么是转座子？分为什么种类？是染色体DNA中存在的可以自主复制和移动的基本单位。可以分为插入序列和复合转座子11.什么是编码链？什么是模板链？与mRNA序列相同的DNA链称为编码链，另一种原碱互补配对原理将MRNA合成DNA链称为模型链简述RNA的种类和生物学作用MRNA:一个或多个多肽链序列已编码。TRNA:用多肽的氨基酸信息替换mRNA的遗传信息。RRNA:核糖体的主要成分。HnRNA: DNA转录生成的原始转录产物。SnRNA:核小体RNA，前体mRNA加工中参与内含子去除。SnoRNA:核糖体RNA主要参与rRNA和其他RNA的修改、加工、成熟过程。ScRNA:细胞质小RNA在蛋白质合成过程中起作用。13.RNA的结构是什么？含有核糖和嘧啶，一般是单链线性分子。主要以单链形式存在于细胞中。默认设置主要为a、g、c、u。可以自我折叠形成局部双螺旋。主要是A-U、G-C对，有时是G-U对。RNA双螺旋的大小沟几乎没有差异，不适合与蛋白质的序列特异性相互作用。可折叠形成复杂的三次结构。RNA主链上未配对的区域可以自由旋转，也可以创建不规则碱基对。14.什么是Pribnow box？其报酬顺序是什么？Pribnow box也称为-10区域，因为原核中的中心位于转录起点的上游10bp处。报酬序列是Tata at原核生物与真核mRNA的差异简述原核mRNA经常以多纯半体的形式存在。真核生物mRNA一般以单个半半自动的形式存在原核生物mRNA的转录和翻译一般是结合。真核生物转录的mRNA前体在转录后加工，成熟的mRNA和蛋白质结合成为信息体后才能工作。原核生物mRNA半寿命很短，但一般需要几分钟，长几小时，真核生物mRNA的半数会很长。结构上的特征也不同。原核生物mRNA的5 端没有帽子，3 端只有较短的poly A结构真核和原核基因转录的区别是什么？原核基因转录中只涉及一种RNA聚合酶，真核生物有3种以上的RNA聚合酶，负责不同种类的基因转录，细胞核内没有位置变化的RNA合成转录产物有差异。原核生物的第一转录产物大部分是与蛋白质的氨基酸序列具有线性关系的编码序列。真核生物的一次转录产物很大，包含内含子序列，成熟的mRNA只是一次转录产物的一小部分原核生物的一次转录产物几乎不需要接合处理，就可以直接用成熟的mRNA进一步行使翻译模板的功能；真核生物转录产物是成熟mRNA在原核细胞中转录和翻译的结合、修饰等转录加工需要成熟过程，不仅发生在同一细胞空间，而且这两个过程几乎同时发生，蛋白质合成在mRNA首次转录时经常发生，真核生物mRNA的合成和蛋白质的合成在不同的空间和时间范围内发生大肠杆菌的终结者有哪两大类？请分别介绍他们的结构特征不依赖于p系数，而是依赖于p系数的两类。不依赖p因子终止的特征：终止子站点上通常有富含GC碱基的双对称区域。终结器部位的前面有4-8个a组成的序列，因此转录产物的3 端是寡妇。p因子依赖特征：终止部位的DNA序列没有共同点，不能形成强的发夹结构，因此不能诱导战士的自发终止RNA编辑是什么？其生物学意义是什么？特定RNA，特别是mRNA前体，是指经过某些核苷酸残基的插入、删除或替换等操作，DNA编码的基因信息的变化导致RNA编辑的mRNA序列与模板DNA不同。生物学意义：在基因突变的过程中恢复丢失的遗传信息，调节翻译，开始构建或去除密码子，结束密码子，扩大基因信息，通过基因或新的结构核功能帮助生物进化19.利宝剂有什么结构特征？根据催化功能，两大类别是什么？生物意义是什么？具有磁剪切能力的RNA，大部分形成由3个茎组成的锤子头结构，茎区的局部双链结构环绕着由11-13个保守核苷酸构成的催化中心。核糖酶分为剪切型和连接型两种。意义：继逆转录病毒后，对中心定律的重要修正，表明RNA既是基因组，又是酶；为生命起源的研究提供了新的思路20.什么是复制载体？什么是表达载体？复制向量：专为扩增插入的外源DNA序列而设计的载体表达载体：专门设计的载体，用于将插入的外源DNA序列转录成多肽链(表达向量和复制向量的区别：1.复制向量：通常只包含一个松弛复制因子、一个多重复制网站和一个筛选标记，因此复制和选定的DNA序列可以大量繁殖。2.而且，表达向量除上述因素外，还需要强有力的启动子、核糖体结合部位、转录开始信号、转录结束信号、翻译开始密码子、翻译结束密码子等一系列调节序列。)，以获取详细信息21.PCR放大的原理和步骤原则：DNA在高温下引起变星链解决方案，温度降低时可以双股折叠。通过温度变化控制DNA的变性和复性，将引物设计为启动子，添加DNA酶，dNTP，就可以完成特定基因的体外受精阶段。1.变性，双股开口2。退火，底漆和模板的结合3。链的延伸，DNA合成简述代谢产物调控基因表达的两种方法转录水平调节转录后水平调节(mRNA加工成熟水平调节，翻译水平调节)什么是操纵器学说？关于原核基因结构及其表达调控的学说由法国Jacob和Monod提出，其核心是将基因从抑制表达状态中解放出来是从消极调节的角度考虑了基因表达调节方式乳糖操纵器的调节模型简述a，乳糖操纵子的组成：含有z，y，a三种基因结构，各有半乳糖苷酶、透明酶、半乳糖乙酰转移酶编码，此外还有操作序列o，启动子p，调控基因IB.抑制蛋白的负调节：没有乳糖的时候，抑制蛋白位于o，乳糖操作员处于不能合成分解乳糖的三种酶的抑制状态。有乳糖时，不能与诱导抑制蛋白变形，使乳糖操作者打开分解乳糖的三种酶的操作序列结合C.CAP的积极调整D.调节调节调节：抑制蛋白对乳糖操纵者I基因代码的负调节和CAP的正调节两种机制相互调节和相互约束什么是葡萄糖效应？有葡萄糖的时候，即使有他的糖，相应的操作者也不会启动，不产生调节这种糖的酶的现象称为葡萄糖效应什么是弱化效应？当培养基中色氨酸浓度低的时候：装载色氨酸的tRNA也较少，通过2个相邻色氨酸的翻译速度慢，4个区域转录时，核糖体进行到1个区域，这时核糖体结构没有形成3-4对终止结构，因此转录可以继续，直到Trp操作者的结构基因全部转录，培养基中色氨酸浓度高的时候：核糖体是两个相邻的贴图终止，Trp操纵器关闭。27.anti-terminator监管机制简述RNA聚合酶与RNA聚合酶相结合，直到到达终止符。因为终结者上游有抗终结者信号序列，只有与抗终结者因子结合的RNA聚合酶才能成功通过具有茎环结构的终结者，战士才能进行反义RNA调控机制简述RNA调控是原核基因表达转录后调控的另一重要机制。环境压力改变时，就会产生一个小的、未加密的RNA分子，把mRNA的特定序列配对，改变它的结构，使翻译过程打开或关闭，等等。转录后原核基因调控方法简述MRNA自结构元素翻译调整；MRNA稳定性对转录水平的影响；蛋白质调节效果调节；反义RNA调节效果；稀有密码子对翻译的影响；重叠基因对翻译的影响；翻译的抑制；魔法斑点核苷酸水平对翻译的影响基因家族的分类及其主要表达调控模型单纯多基因家族：真核生物先经过特定甲基化，通过RNA酶切割，产生成熟的rRNA分子。原核生物还必须经过核糖核酸分解才能生成成熟的rRNA分子复杂的多基因群：一般由多个相关基因群组成，基因群之间间隔分离，作为独立的转录单元，可能有不同特异性的组蛋白子类和发育调控机制。具有发育调控机制的复杂多基因群：在每个基因群中，基因排列顺序就是它们在发育阶段的表达顺序。什么是埃克森、内含子和结构特征及可变调节？大部分真核基因由蛋白质编码序列和非白质编码序列组成，编码序列叫埃克森，非编码序列叫内含子。结构特征：一个器官基因编码特定蛋白质不同区域的每个外显子不连续，被不同长度的内含子隔离，形成镶嵌排列中断的方式。可变调控：很多真核基因的原始转录产物可以通过多种结合方法生成mRNA，并翻译成不同的蛋白质。另外，一些核基因是战士选择了不同的启动子，或战士产物中选择了不同的波尔雅部位，转录产物形成了不同的二次结构，影响了接合过程，最终产生了不同的波尔雅分子。32.DNA甲基化对基因表达的调控机制很多研究结果表明，DNA甲基化会关闭特定基因表达的活性，去甲基化会诱导基因的康复和表达。3种调节机制： DNA甲基化影响蛋白质和DNA的相互作用，抑制转录因子和启动部位DNA的结合效率。促进抑制蛋白的抑制效果。 DNA甲基化还增加了该部位突变的频率真核生物转录因子的组成和分类简述启动子、转录模板、RNA聚合酶基本转录所需的蛋白质因子、RNA聚合酶、增强剂、反作用因子34.加强板作用机理简述强化者是指能与之连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。有三种作用机制影响stencils附近的DNA双螺旋结构，通过DNA双螺旋弯曲或反作用因子的参与，将蛋白质之间的相互作用加强为媒介，形成启动子之间的“环”连接，激活基因转录。将模版连接在细胞核内的特定位置等模版固定在细胞核内的特定位置，有助于DNA topoisomerase改变DNA双螺旋结构的张力，促进RNA聚合酶 DNA链中的结合和滑动。可以进入增强因子或RNA聚合酶染色质结构的“入口”35.反应因子的结构特征及其对基因表达的调控反作用因子是在各种净作用成分的核心序列中直接或间接识别或结合，调节目标基因转录效率的蛋白质。这些元素做两个独立的活动。与RNA结合部位特别结合，然后激活转录。两种活性可以分别指定给蛋白质不同区域的特定蛋白质域，称为DNA结合域和激活域。36.举例说明蛋白质磷酸化如何影响基因表达蛋白质磷酸化主要影响细胞信号传递，影响基因表达。例如：在糖原代谢过程中，激素及其受体与肌细胞的外表相结合，诱导细胞质cAMP的合成，激活a激酶，将活化磷酸组传递给非活性磷酸化酶激酶，激活糖原磷酸化酶，最终通过糖原磷酸化进入糖分解途径提供ATP。(营中介导的蛋白质磷酸化过程)组蛋白乙酰化和脱乙酰化影响基因转录的机制简述组蛋白乙酰转移酶和脱乙酰酶通过组蛋白乙酰化和脱乙酰化影响基因表达。组蛋白n末端尾部赖氨酸残基的乙酰化，中和尾部正电荷，减少与组蛋白的亲和性，有利于细胞核结构结合转录蛋白和染色质的变化，提高基因转录活性。核心组蛋白H2A、H2B、H3、H4通过组蛋白尾部选择性乙酰化影响细胞核的浓度和邻近性。乙酰化组蛋白抑制核糖体的富集，因此转录因子更容易接触基因组的这一部分，增加基因的转录活动。什么是癌基因，什么