圣湘生物PCR新技术简介迪安培训PPT课件

.高精度PCR检测肝病毒的现状和进展湖南圣湘生物技术有限公司唐国政、HBV慢性携带者(3.5亿慢性携带者)(分布)百分比，8%高度分布区，乙型肝炎病毒感染全球分布，我国是乙型肝炎“大国”，乙型肝炎是威胁我国健康的严重问题每年， 在35万人死于乙型肝炎病毒的肝脏疾病中，有18万人死于乙型肝炎病毒的肝癌，1亿2千万乙型肝炎病毒携带者，3000万慢性乙型肝炎患者，十一五重大传染病专业计划病毒性肝炎的重大研究专业开始，2009年， 我国病毒性肝炎领域最重要的进展是国家“十一五”重大传染病专项规划“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项启动(见表1 )。 这是“十一五”期间与“载人航天和月球探测项目、大型飞机”等并行的16个重大特别项目之一。表1、国家中长期科技发展规划纲要(20062020年)确定的重大科技专家、HBV复制周期(ReplicationcycleofHBV )、慢性乙型肝炎的本质是病毒免疫清除对肝细胞的损伤， 肝病毒PCR检测的临床需求和现状介绍高精度肝病毒PCR检测技术，血清HBVDNA水平为临床评价HBV复制情况的“金标准”，LokAS，etal.Hepatology.2009； 503336361-662liawofYF，LiverInternational，2009，29 (S1 ) :100-1-7，慢性乙型肝炎病毒感染的自然史，急性HBV感染，慢性携带者，康复，3050年，慢性乙型肝炎，稳定，进展，肝硬化，代偿性肝硬化代偿性肝硬化(死亡)、HBVDNA高承载量是肝硬化发生的重要相关因素，n=3，774； pvalueforlog-rank测试，0.001，ChenCJetalJAMA2006； 295336065 iloejeuetalgastroenterology 2006，1303360678-686，全球权威指南一致认为，治疗乙型肝炎的根本目的是长期抑制病毒复制，阻止疾病的发展。 “持续抑制病毒复制，减轻肝炎、坏死，推迟和阻断肝硬化和肝癌的发生”，为什么长期需要抗病毒治疗？ 病毒“根cccDNA，抗病毒治疗只能抑制病毒复制，停药后病毒“复活”，导致病情反复发展，需要长期抗病毒治疗，长期抗病毒治疗的好处，抑制乙型肝炎病毒复制，延缓病情发展，生活延长生存时间，调节乙型肝炎患者的精神状况，减轻心理压力，减轻家庭经济负担和家庭负担，减轻现在常用的抗病毒药物：干扰素的一般干扰素聚乙二醇干扰素-2a(PEG-IFN-2a )核苷干扰素是通过调节机体免疫力达到治疗目的的优点：疗程固定缺点：由于注射制剂，病毒能力未降低的副作用较多，禁忌证的耐药率较低，eastlclincalpracticeguidelinesjournalofhepatology 50 (20 ) 核苷类药物直接抑制病毒复制的优点：降低病毒，制成口服制剂，使用方便，副作用少的缺点：耐药疗程不确定，eastlclincalpracticeguidelinesjournalofhepatology 50 (2009 ) 227 现有抗病毒药物-干扰素拉米夫定阿德福韦酯、聚乙二醇干扰素等，80年代、90年代后期、2005年后，乙型肝炎病毒载量基准：乙型肝炎病毒DNA检查、HBVDNA型肝炎病毒脱氧核糖核酸、直接体内病毒载量2012:hbddvddnadetectionandhbddnannaleventlmeasurementareessentialforthediagnosis decisiontottreatandsubsequentmonitoringeofpap . follow-upusingrealtimerectionassaystronglyrecommendedbecauseofheirsensitivity specificity， accracyandbroaddynamicrage 3841 (a1 ) 2009:recently hbvdnaassayasthatutilizereal-timerschentectrontechnologywithprovedsenitivity andwiderdynamiccrage (upto8-9log 10 iu/ml ) havebecomeavailable乙型肝炎治疗指南：美国和欧洲，Hepatology，2009JHepatol，2012，HBVDNA载重量PCR检测的国际指南HBsAg阳性患者和HBsAg阴性高危人群携带者、慢性乙型肝炎患者、肝硬化和肝癌患者何时需要检查：未治疗患者、治疗前、治疗中、治疗结束后需要检查在HBVDNA载重量测定的治疗优化路线图中的作用， HBVDNA载量测定的治疗优化路线图中的作用正确测定抗病毒治疗前的病毒基线：选择合适的抗病毒治疗患者，确定抗病毒治疗方案，预测抗病毒疗效和比较后续疗效比较抗病毒治疗过程中的疗效评价和方案优化， 抗药性突变的检测和治疗终点的确认抗病毒优化治疗中止后的随访和复发再治疗的判断隐性病毒性肝炎的诊断高精度核酸定量检查是保证乙型肝炎患者抗病毒优化治疗之路的导航系统， HBVDNA定量PCR检测的国际准则要求超敏感(Hypersensitivity)HBV最低检出限10-15IU/ml的宽线性范围(widerdynamiccrage )-101109 iu/ml的高特异性(Highspecificity ) 可重复性好(Repeatability)(操作简单或可自动化)发展HBVDNA检测的临床应用，比较进口HBVDNAPCR试剂的性能，我国RT-PCR型肝炎试剂盒的灵敏度和线性范围现状，国产HBVDNAPCR试剂的性能现状目前国产试剂的检测灵敏度、线性范围、 在重现性等方面不能满足临床上增加的HBVDNA定量准确性和灵敏度要求，影响了定量准确性，在中华检验医学杂志2012、(无天、无地、无标、不可能)、HBVDNA定量中使用了低精度试剂，结果影响了临床实践中临床疗效的正确评价， 病人疗效参差不齐的临床研究减弱了抗病毒效应，介绍了主题、肝病毒PCR检测的临床需求和目前的超敏感肝病毒PCR检测技术，珠法在样品中加入超顺纳米珠，丰富微量病毒核酸分子，进一步扩增动画演示、 乙型肝炎病毒核酸提取技术的比较，珠子法的性能之一灵敏度为10IU/ML的低浓度样品(10IU/ML )的灵敏度测定结果图(重复90次，检测率为100% )，线性范围宽： 20IU/ml2.00E 09IU/ml，磁珠法的性能二，再现性好，精度高浓度值对数值变异系数(CV )桑湘： 14份，两种试剂定量检测结果散点图，两种试剂检测结果适应度情况(相关分析)、(回归分析)常数项和系数检测结果，检测结果均为阳性样品，桑湘磁珠法试剂和罗氏试剂定量检测结果呈线性相关，相关系数R=0.966； 回归方程是y=0.134 1.005x。磁珠法HBVDNA检测试剂与罗氏试剂的比较研究结果表明，桑湘磁珠法与其他磁珠法病毒核酸提取不同，桑湘生物磁珠法肝病毒套件的性能、 国内市场北京祐安医院北京首钢医院郑州大学第一附属医院河南省传染病医院石家庄传染病医院蚌埠医学院附属医院院长征医院上海长海医院陕西省人民医院山西省人民医院、祐安医院、郑大一附属医院、陕西省人民医院、国内市场武汉协和医院湘雅一、二、 三附属医院广东省第二人民医院湖南省人民医院邹州市第一人民医院福建医科大学第一附属医院重庆大坪医院300多家三级医院、湘雅医院、武汉协和医院、广州金域医学检测中心、社会价值，2012年6月25日人民日报头版报道：“杂交水稻之父”袁隆平发表了“高性能碳/以碳复合材料”获得6年国家技术发明一等奖的黄伯云，以及获得美国“国家科学技术奖”并拥有16项自主创新专利的戴立忠出现在湖南，后来秀集于湖南。核心技术领导人戴立忠博士，2010年，中组部长李源潮关注公司的发展，发生了变化，从现在开始解读基因，增强健康，标本类型、血清(2-3ML )应用EDTA抗凝血标本，抗凝血后6 h内分离血浆。 使用血清标本时，应尽快(2h以内)分离血清，不得使用肝素、柠檬酸钠、草酸钾等抗凝剂，标本应运输，早：标本采集后，