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生物素、亲和性标记技术,广州医学院第一附属医院检查和莉亚,第一,生物素及其理化性质1概念2亚结构特性溶解特性等电点其他特性,1概念:生物素是移动、植物内广泛分布的小分子生长因子,也称为辅酶r或维生素h。分子:c 10 h 16 O2 N2 s分子量:244.31,结构特征:已多唑仑环/四氢噻吩环结合亲子侧链羧基结合蛋白溶解特性:不溶于水的二甲基甲酰胺(DMF),等电点:PH=3.5其他特性:羧基生物素衍生物的种类和特性:1生物素羟基丁酰亚胺酯(BNHS): DMF制备:生物素N-羟基琥珀酰己酰亚胺标记特性:BNHS的羧基和蛋白质的赖氨酸氨基结合是标记Ab、酶、中性或偏碱性Ag、DNA、 肠臂激活生物素(BC NHS): DMF 6-氨基己酸制备:生物素N-羟琥珀酰亚胺(BNHS中的b和羧基之间插入2分子的6-氨基己酸)标记特性3360(与BNHS相同)BC NHS中的羧基亲子及其理化性质1概念二分法结构特性溶解特性等淀粉其他特性,1概念:亲子性(avidin):包含从动物微生物中提取的10%碳水化合物的碱性糖蛋白。 从链球菌细菌培养液中提取的蛋白质分子质量:a :6.7 kdsa 333636 6.5 KD,3结构特征:每个分子溶于水,C=5mg/ml等电点:A:PH 生物素标记和亲子标记的制造:1生物素标记的制造:B Ab/Ag/E交际B-Ab/Ag/E亲子激素标记的制造:A/SA Ab/Ag/E交际A/SA-Ab/Ag/E BAB方法:aBAg-ABBA-Abe ag-abb-a-be特性:使用自由A分
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