细胞计数PPT参考幻灯片

计数板构造及血细胞计数,武威市人民医院姚立腾,1,一、细胞计数,细胞计数是检验工作者最基本、最常用的技术。【原理】当待测细胞悬液中细胞分布均匀时，通过测定一定体积悬液中细胞的数目，即可换算成每升（或毫升）细胞悬液中的细胞数。【解析】细胞悬液：按一定比例稀释的血细胞；一定体积：WBC、RBC、PLT计数域不同；换算：一定体积悬液内细胞数1ul内细胞数所需单位体积内细胞数。,2,二、计数板构造,3,二、计数板构造,4,二、计数板构造,1mm,1mm,0.1mm缝隙,0.2mm,0.2mm,5,二、计数板构造,6,三、白细胞计数,【原理】用冰醋酸稀释液将血液稀释，同时将稀释的血液混匀，而后取稀释的血液充入血细胞计数板的计数池，在显微镜下计数一定容积中的白细胞数，经换算求得每升血液中的白细胞总数（*109/L）【器材与试剂】器材：Neubauor计数板，HGB吸管，试管，0.5ml吸管，血盖玻片，手揿计数器，显微镜。试剂：白细胞稀释液，可用2的冰醋酸液，内加1结晶紫液（或美蓝）1滴，以便与红细胞稀释液区别。,7,三、白细胞计数,【操作方法】用0.5ml吸管吸取2的冰醋酸液0.38ml置于小试管中。用HGB吸管吸取被检血至20l处。擦去管外粘附的血液，吹入小试管中，反复吸吹数次，以洗净管内所粘附的血细胞，轻轻振荡混合，放置510min使红细胞充分破坏。用毛细吸管吸取被稀释的血液，充入已盖好盖玻片的计数室内，静置23min后，待白细胞下沉。用低倍镜计数四角的四个大格内的白细胞数。计数规则为：计左不计右（压左线取，压右线舍），计上不计下（压上线取，压下线舍）。,8,三、白细胞计数,【计算】白细胞数/L=四个大格内的白细胞数41020106【报告格式】X.XX109/L【解析】4为每个大格内白细胞平均数；10将一个大格容积0.1l换算为1.0l20血液稀释倍数；106将1l换算为1L。,9,三、白细胞计数,【注意事项】采血及装血用具、尤其计数板要干净，且干燥；吸血动作要快，尤其是未加抗凝剂的血样；充计数池时，计数板要平稳，充池液体要适中，且注意不要形成气泡；加入白细胞稀释液后，一定要等红细胞充分破坏后再计数，防止其影响计数；各大方格内白细胞数若相差10%以上，需重新计数。切忌把尘埃异物及红细胞碎片与白细胞混淆，可用高倍镜观察，白细胞有细胞核的结构，而尘挨异物及红细胞碎片的形状不规则，无细胞核结构。,10,三、白细胞计数,【注意事项】有核红细胞的影响：某些情况下，外周血可出现大量有核红细胞，它不能被白细胞稀释液破坏，计数时与白细胞一同被计入，导致白细胞计数结果偏高。因此，当血液中出现较多有核红细胞时，必须将其校正扣除。校正公式：校正后WBC数/LX100/100+YX：校正前WBC数Y：在WBC分类时，计数100个WBC的同时计数到的NRBC,11,三、红细胞计数,【原理】红细胞计数是将一定量的血液经过稀释后，充入特制的细胞计数板的计数池内，在显微镜下计数规定区域内的红细胞数，而后换算出每升血液中的红细胞数（*1012个/L）【器材与试剂】器材：5ml吸管，其余器材同WBC计数。试剂：红细胞稀释液：0.85%的氯化钠溶液或赫母（Hayem）氏液（取氯化钠1.0g、结晶硫酸钠5.0g、氯化高汞0.5g，以200.0ml蒸馏水溶解，加数滴碳酸品红）。,12,三、红细胞计数,【操作方法】用5ml吸管吸取血小板稀释液3.98置于小试管中。用HGB吸管吸取被检血至20l处。擦去管外粘附的血液，吹入小试管中，反复吸吹数次，以洗净管内所粘附的血细胞，轻轻振荡混合，放置510min使红细胞充分破坏。用毛细吸管吸取被稀释的血液，充入已盖好盖玻片的计数室内，静置23min后，待白细胞下沉。将计数板装在显微镜上，在10倍镜下找到计数的中央大方格，选择5个中方格（四角与中央的中方格或对角线的5个中方格,见图2和图3），转至40倍镜下计数。计数规则为：与WBC、RBC计数相同。,13,三、红细胞计数,【计算】红细胞数/L=五个中方格内的红细胞数52510200106【报告格式】X.XX1012/L【解析】5为每个中格内红细胞平均数；25将一个中格容积0.004l换算为一个大格0.1l；10将一个大格容积0.1l换算为1.0l；200血液稀释倍数；106将1l换算为1L。,14,三、红细胞计数,【注意事项】注意采血和稀释血液时切忌出现溶血；其它同WBC计数。,15,四、血小板计数,【原理】用稀释液将血液稀释并破坏RBC，取稀释的PLT悬液充入血细胞计数板的计数池，在显微镜下计数一定容积中的PLT数，经换算求得每升血液中的白细胞总数（*109/L）【器材与试剂】器材：同WBC计数。试剂：草酸铵稀释液（10g/L）。,16,四、血小板计数,【操作方法】用0.5ml吸管吸取红细胞稀释液0.38ml，置于试管内。用三用吸管吸取全血至20ul处，擦去管外血液，将管内血液慢慢吹入上述试管底部，吸取上层稀释液反复清洗吸管内壁，轻轻混匀。用HGB吸管吸取混匀的血液稀释液，充入已盖有血盖片的计数板的计数池内，1015分钟后即可计数。将计数板装在显微镜上，在低倍镜下找到计数的中央大方格，选择5个中方格（四角与中央的中方格或对角线的5个中方格,见图），转至40倍镜下计数。计数规则：与WBC、RBC计数相同。,17,三、血小板计数,【计算】红细胞数/L=五个中方格内的红细胞数5251020106【报告格式】X.XX109/L【解析】5为每个中格内红细胞平均数；25将一个中格容积0.004l换算为一个大格0.1l；10将一个大格容积0.1l换算为1.0l；20血液稀释倍数；106将1l换算为1L。,18,四、血小板计数,【注意事项】末稍采血针刺深度达3mm；各中方格的红细胞数相差10%以上，应重新取样计数；计数显微镜光线不宜太强；充池后1015min再计数；注意与灰尘颗粒区别；其它同WBC、RBC计数。,19,五、测试题,试题1：3.99ml生理盐水中加入10ul静脉血液，计数中央大方格内的四角和对角连线5个中格内RBC数为415个，问此RBC计数结果是多少？,20,五、测试题,试题2：0