2016-核移植技术.ppt

二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,1.回忆克隆羊“多莉”的培育过程,核移植,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,克隆就是无性繁殖，具体地说，是指一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。,a.分子水平上：,b.细胞水平上：,c.个体水平上：,1.什么是克隆？,一般指DNA克隆。,指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。,指基因型完全相同的两个或一个群体。,2、克隆动物能否用类似植物组织培养的方法获得？为什么？,目前不能。,因为动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制。目前，用动物体细胞克隆的动物，实际上是通过核移植来实现的。,动物核移植,是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。（克隆动物）,动物核移植,胚胎细胞核移植,体细胞核移植,原理：动物细胞的细胞核具有全能性,取供体细胞传代培养10代以内的细胞.为什么？,用的是去核的卵母细胞为什么？,激活方法：激活目的：,促融方法：电刺激,胚胎移植至代孕受体内,妊娠、分娩,5.核移植流程,供体：优质高产奶牛,受体：普通奶牛（卵母细胞的采集与培养）,1.体积大，易操作。2.含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。,有人说它三个母亲，对吗？,取供体细胞,取卵母细胞,供体细胞培养,培养到M中期,卵母细胞去核,供体细胞注入去核的卵母细胞,重组细胞,重组胚胎,代孕母牛,生出与供体遗传物质基本相同的个体,过程：,细胞融合,胚胎移植,、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？,为使核移植动物的核遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。,、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？,10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型，未发生突变。,讨论：,3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？,克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞。,不是,动物细胞培养与动物体细胞核移植,(四)体细胞核移植技术的应用前景：,1、畜牧业加速家畜遗传改良的进程,2、保护濒危物种增加存活数量,3、医药卫生生产医用蛋白质及组织器官的移植,4、研究了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病,（四）体细胞核移植技术存在的问题,1、成功率低,2、克隆动物存在健康问题,3、克隆动物食品的安全性问题,课堂小结,动物体细胞核移植技术和克隆动物,1.动物核移植的概念,2.动物核移植的分类,3.动物核移植的原理,4.过程,5.应用前景,6.存在的问题,3.1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达（Lucinda）的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛，年平均产奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均水平仅为34t。（1）能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗？请说明理由。,提示：可以。卢辛达的产奶量很高，有高产奶的遗传基础，利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上全部来自该奶牛，其克隆牛具有高产的遗传基础，如果精心培育和饲养，有可能在世界范围内推广，克隆牛再与高产的公牛自然繁殖，可得到很多高产的后代，从而加快奶牛改良进程。,该克隆牛不能无限制地推广，在小范围内不能无限的繁殖，以避免奶牛群出现近亲繁殖而引起种质衰退。,思考与探究,（2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你，你将如何对它进行克隆？,从卢辛达耳朵（也可用别的组织、器官，耳朵在活体上容易取）上剪取一小块组织，在体外培养获得该组织（如软骨组织）的细胞。从屠宰场取废弃的牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养成熟。用显微针去除卵母细胞的核，再将耳细胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细胞，再