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文档简介

第五课内容:缺氧与耐缺氧时数:4h讲座时间:2016年10月地点:Xi交通大学医学部功能实验中心,课程信息:缺氧与耐缺氧,3。实验目的:复制缺氧动物模型,掌握缺氧的分类和特点;观察缺氧时循环系统和呼吸系统的变化。了解中枢神经系统功能状态和环境温度对耐缺氧能力的影响。4.携带、携带、运输、使用和实验原理。定义:当组织和细胞不能获得足够的氧气或不能充分利用氧气时,组织和细胞的代谢、功能和形态结构发生异常变化的病理过程称为缺氧。5,实验原理,6,缺氧:PO2减少血液缺氧:Hb质量/数量变化(贫血,一氧化碳中毒,亚硝酸盐中毒)循环缺氧:血容量减少(组织缺血/充血)组织缺氧:氧利用障碍(氰化钾,叠氮化钠中毒),实验原理,实验材料,动物:小鼠,雄性和雌性,体重18g-22g。药品和试剂:1%苯甲酸钠咖啡因注射液、0.1%复方冬眠灵注射液(每毫升含1毫克冬眠灵和1毫克菲)、苦味酸、甲酸、浓硫酸、5%氢氧化钠、5%亚硝酸钠、1%亚甲蓝和0.05%叠氮化钠。8、实验方法1、缺氧小鼠1: 0.1 ml/10 g剂量腹腔注射冬眠灵,放入缺氧瓶中(瓶内预先放入2片生石灰),10分钟后,关闭瓶塞,放入0-4冷水中,开始计时。小鼠腹腔注射咖啡因,剂量为2: 0.1毫升/10克,置于缺氧瓶中,5分钟后关闭瓶塞,置于38-40热水中开始计时。9,实验方法,2,一氧化碳中毒小鼠3:一氧化碳发生器,甲酸(下,3-4毫升)浓硫酸(上,2-3毫升),将小鼠放入广口瓶,从浓硫酸开始滴注的时间开始计数,直至小鼠死亡,心脏采血小鼠4:正常小鼠用颈椎脱臼法处死,心脏采血用等量的氢氧化钠滴两滴血观察颜色变化,10,材料和方法, 3、亚硝酸盐中毒小鼠5:腹腔注射5%亚硝酸钠0.1毫升/10 g,随后腹腔注射1%亚甲蓝0.2毫升/10g。小鼠6:腹腔注射5%亚硝酸钠0.1毫升/10g静脉注射,小鼠7:腹腔注射叠氮化钠0.05%叠氮化钠溶液(0.4毫升/10g)。 采用实验方法观察注射药物后小鼠的呼吸和运动情况。记录各组小鼠的存活时间。小鼠口腔唇和耳廓的颜色。从尸体解剖中抽取血液,并比较血液的颜色。对小鼠进行腹腔注射时,应将针头从左下腹部插入,以避免对肝脏造成损伤,并注意不要将药液注入肠腔。2.注意强调两个缺氧瓶的“体积”是相等的,即瓶的大小和瓶塞的大小应该一致。3.缺氧瓶必须密封。在瓶塞紧闭之前,应该放入一小袋石灰钠(约5克),以吸收老鼠呼出的二氧化碳。4.当复制一氧化碳中毒模型时,一氧化碳的浓度不应过高。应注意控制浓硫酸的滴速,防止小鼠迅速死亡而影响观察。5.死后立即从老鼠的心脏取血。氢氧化钠的加入量与血液的量相似。6.氰化物毒性很大。使用后洗手。一氧化碳是一种有毒气体。实验中通风较好,应注意安全。实验结束后,应该对死去的动物进行适当的治疗。(1)给小鼠注射冬眠灵,抑制体温调节中枢,使体温随外界温度的变化而变化。此外,寒冷的环境降低了单位时间内的新陈代谢率和耗氧量,因此相同数量的氧气可以使用更长的时间。(2)给小鼠注射咖啡因会刺激中枢神经系统(小剂量作用于大脑皮层,大剂量刺激延髓的呼吸中枢和心血管运动中枢),再加上高温环境,代谢率增加,单位时间耗氧量增加,因此在较短的时间内使用相同量的氧气(3)一氧化碳和碱性液体等中毒小鼠。能异常增加血红蛋白与O2之间的亲和力,并通过自氧化产生高铁血红蛋白(铁是三价衍生物,呈红棕色)血红蛋白b-Fe2hb-Fe3OH。一氧化碳和血红蛋白结合形成的碳氧血红蛋白(hbCO)比正常血红蛋白具有更稳定的性质和更强的耐碱性,因此自氧化过程缓慢且不会在短时间内变色。讨论,(4)小鼠被亚硝酸盐亚甲蓝、Hb-Fe2 Hb-Fe3 OH正常血红蛋白高铁血红蛋白(MHb)、亚硝酸盐亚甲蓝中毒,即高铁血红蛋白三价铁牢固地结合到羟基上并失去携氧能力。二。没有被高铁血红蛋白氧化的Fe2与氧的亲和力增加,导致氧解离曲线向左移动,氧释放减少。讨论,(5)细胞色素氧化酶细胞色素氧化酶(Cytaa3Fe3)是由叠氮化钠注射入小鼠

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