片剂微生物限度检测方法验证试验报告

微生物限度检测方法验证试验报告一、 目的：确认供试品的抑菌活性及测定方法的可靠性。 二、 内容：细菌、霉菌及酵母菌数测定（即：对五株阳性对照实菌株的回收逐一进行验证）。三、 菌种：枯草芽孢杆菌【CMCC（B）63501】、金黄色葡萄球菌【CMCC（B）26003】、大肠埃希菌【CMCC（F）44102】、白色念珠菌【CMCC（F）98001】、黑曲霉菌【CMCC（F）98003】。四、 方法： 常规法（ ）；培养基稀释法（ ）；薄膜法（ ）；综合法（ ）。依据中国药典2005年版二部微生物限度检查方法验证实验。 五、 方法验证：细菌、霉菌及酵母菌数测定，进行三次独立实验 ，每次平行实验回收率为70%以上。六、 实 验： （1）菌 液 组 测定所加的试验菌数。（2）供试品对照组 取1m供试液注入平皿中，立即倾入营养琼脂培 养基，做两个平板，按平板菌落计数方法测定其菌落数。（3）试 验 组 平皿法计数，取供试品10g（ml），加入PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml（1：10），作为供试液。取1ml供试液、1ml试验菌液（50100cfu/ml） 分别注入平皿中，立即倾入营养琼脂培养基，每株菌做两个平板，按平板菌落计数方法测定其菌落数。（4）稀释剂对照组 试验时，可用相应的稀释剂替代供试品，加入1ml试验菌（50100cfu/ml），立即倾入营养琼脂培养基，每株菌做两个平板，按平板菌落计数方法测定其菌落数。七 、结 论： 通过方法学验证实验证明， 采用常规法（）；培养基稀释法（）；薄膜法（）；综合法（），对5株阳性代表菌株回收率均为70%以上。该方法适用于 微生物限度检查复核人： 试验人：试验记录（1）批号： 验证日期：试验组及接种量 （1） 菌 液 组（菌液1ml / 皿）（2）供试品（稀释剂）对照组 （1ml / 皿）（3） 试 验 组 【供试液（稀释剂）1ml菌液1ml / 皿】验证菌及稀释倍数大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-细 菌 霉 菌 大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-培养时间及温度小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时菌落数A、试验组回收率：【（3）（2）】（1）100%B、稀释剂对照组回收率：（3）（1）100%ABABABABAB试 验 记 录 （1） 批号： 验证日期： 年 月 日 试验组及接种量 （1） 菌 液 组（菌液1ml / 皿）（2）供试品（稀释剂）对照组 （1ml / 皿）（3） 试 验 组 【供试液（稀释剂）1ml菌液1ml / 皿】验证菌及稀释倍数大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-细 菌 霉 菌 大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-培养时间及温度小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时菌落数A、试验组回收率：【（3）（2）】（1）100%B、稀释剂对照组回收率：（3）（1）100%ABABABABAB 实 试验组及接种量 （1） 菌 液 组（菌液1ml / 皿）（2）供试品（稀释剂）对照组 （1ml / 皿）（3） 试 验 组 【供试液（稀释剂）1ml菌液1ml / 皿】验证菌及稀释倍数大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-细 菌 霉 菌 大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-培养时间及温度小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时菌落数（供）（稀）（供）（稀）A、试验组回收率：【（3）（2）】（1）100%B、稀释剂对照组回收率：（3）（1）100%ABABABABAB试 验 记 录 （2）试 实批号： 验证日期： 年 月 日 试验组及接种量 （1） 菌 液 组（菌液1ml / 皿）（2）供试品（稀释剂）对照组 （1ml / 皿）（3） 试 验 组 【供试液（稀释剂）1ml菌液1ml / 皿】验证菌及稀释倍数大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-细 菌 霉 菌 大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-培养时间及温度小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时菌落数A、试验组回收率：【（3）（2）】（1）100%B、稀释剂对照组回收率：（3）（1）100%ABABABABAB 试验组及接种量 （1） 菌 液 组（菌液1ml / 皿）（2）供试品（稀释剂）对照组 （1ml / 皿）（3） 试 验 组 【供试液（稀释剂）1ml菌液1ml / 皿】验证菌及稀释倍数大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-细 菌 霉 菌 大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-培养时间及温度小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时菌落数（供）（稀）（供）（稀）A、试验组回收率：【（3）（2）】（1）100%B、稀释剂对照组回收率：（3）（1）100%ABABABABAB 实 验 记 录 （3） 批号： 验证日期： 年 月 日试验组及接种量 （1） 菌 液 组（菌液1ml / 皿）（2）供试品（稀释剂）对照组 （1ml / 皿）（3） 试 验 组 【供试液（稀释剂）1ml菌液1ml / 皿】验证菌及稀释倍数大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草芽孢杆菌10-白色念珠菌10-黑曲霉菌10-细 菌 霉 菌 大肠埃希菌10-金黄色葡萄球菌10-枯草