上皮组织实验.ppt

,一、实验目的：二、主要仪器设备及材料：三、实验原理及步骤：四、结果分析（绘图及标注）：五、思考题：,实验一上皮组织和结缔组织的微细结构观察,一、实验目的：,通过观察切片，进一步加深对上皮组织和结缔组织结构特征的认识，熟悉其分类及特征；掌握血涂片的制作方法。,二、主要仪器设备及材料：,1.玻片标本：甲状腺滤泡壁、肠横切、气管横切、食道横切、输尿管横切、疏松结缔组织/蜂窝组织、肌腱纵切/鼠尾腱纵切、血涂片；2.显微镜，解剖工具，滴管，载玻片，鱼或虾、蟹等鲜活标本,三、实验原理及步骤：,观察切片时，应在低倍镜下观察整体结构，然后转换高倍镜观察局部微细结构。,1.单层立方上皮/腺上皮：甲状腺滤泡壁低倍镜观察：甲状腺主要是由许多圆形或卵圆形的囊状滤泡构成，滤泡之间有丰富的毛细血管网。挑选一个滤泡换高倍镜观察：滤泡壁由单层立方细胞构成，核呈圆形，位于细胞中央或略偏基部。腺腔内有染成粉红色的胶状物质-甲状腺激素。,2.单层柱状上皮：肠横切管腔面由单层柱状细胞组成，核卵圆形，位于细胞的基底部。细胞的基底端有一层极薄的膜，即基膜。面向肠腔的游离面上有一层深红色的结构，即纹状缘（微绒毛）。柱状细胞间有许多杯状细胞。,3.假复层柱状纤毛上皮：气管横切面用低倍镜寻找管腔面上皮组织的部位。可见组成管腔的上皮较厚，其中夹杂有形似高脚酒杯的细胞，即杯状细胞。换高倍镜观察：寻找切面切得较正的部位，可看到明显的三层细胞核：基部是一层近圆形的小核，排列在同一平面上，这就是锥形的基细胞的核。第二层细胞核较大，呈卵圆形，排列稀疏，是梭形细胞的核；表面的一层细胞核椭圆形，是纤毛柱状细胞的核。这种细胞的游离面有一层排列整齐的纵纹，即纤毛。在纤毛柱状细胞之间，可看到杯状细胞。杯状细胞的粘液在制片时被溶解，故呈空泡状。在上皮细胞和结缔组织接触处有一层很厚的基膜。,假复层柱状纤毛上皮：气管横切面,4.复层扁平上皮：食道横切先用低倍镜找到管壁内层的上皮后，换高倍镜观察。和基膜相连的是一层排列整齐的低柱状细胞，即基底层细胞，具有一圆形核。从第二层细胞向上的数层细胞形状不规则，排列也不整齐，为多角形细胞。细胞愈靠近表面愈变得扁平，核的着色也淡，甚至模糊不清，为扁平细胞。,图未角化的复层扁平上皮（食管）,5.变移上皮：输尿管横切先用低倍镜找到管腔壁表面的上皮后换高倍镜观察。选择切面较正的部位,表面是大小不一的盖细胞，表层细胞质浓缩成壳层，有的盖细胞具有两个细胞核。中间层细胞是多边形的；基底层细胞是立方或锥体形的。,6.疏松结缔组织/蜂窝组织肉眼观察：铺片呈紫红色，选择较透亮的区域用低倍镜观察。可看到很多分散的纤维，互相连接成网状。较粗的、染成粉红色的，为胶原纤维；纤细的、紫黑色的，为弹性纤维。换高倍镜观察各种细胞，其特征如下：A、成纤维细胞：为多角形或星形的扁平细胞、核大；B、巨噬细胞：细胞具短而钝的伪足；C、浆细胞：多呈圆形，核染色深，居细胞一侧；D、肥大细胞：常成群分布在毛细血管附近，胞体较大，略呈圆形，核小而圆，胞质中充满嗜碱性颗粒，有时把核遮蔽起来。,7.致密结缔组织：肌腱纵切、鼠尾腱纵切高倍镜观察：粗而直的胶原纤维束彼此平行排列，呈现纵行纹理。这是因为纤维束是由胶原纤维紧密平行排列而成的，胶原纤维束之间，分布着腱细胞，排列成单行的长带。,图胶原纤维（肌腱）光镜图（F腱细胞）,8.血涂片：制作步骤：取鱼血可用剪断尾鳍法，从尾静脉采血。将流出来的第一滴血擦掉，将第二滴血滴于载玻片右端的1/3处，用另一载玻片与血滴相接触，血液即沿玻片边缘散开，两玻片成40度角，然后均匀地向左端推玻片，血液即在载玻片上成一均匀的薄膜，放在无尘处晾干；用滴管滴Wright氏染液或Giemsa染液数滴，使其盖过血膜，静置23分钟后，在染液上滴加与染液等量的磷酸盐缓冲液或蒸馏水，用口吹气或用牙签轻轻拨动，使染液和缓冲液混合均匀，再染4分钟左右，用缓冲液或蒸馏水将染液洗去，稍干后，即可观察。如染色适宜，红细胞为粉红色，白细胞的核为蓝紫色，嗜酸性白细胞颗粒鲜红色，嗜碱性白细胞颗粒蓝色。,血涂片观察：人血涂片低倍镜观察：红细胞呈粉红色，白细胞的核蓝紫色。选择白细胞较多的区域换高倍镜观察，区分下列各种血细胞：A、红细胞：大量、小而圆、中央透亮、无核、红色。B、白细胞：a、嗜中性粒细胞：胞质呈淡红色、充满紫红色的小颗粒，核紫色、通常可分为2-5叶，叶间有细丝相连。如核呈杆状的，为幼稚型细胞。b、嗜酸性粒细胞。较难找到，胞质中充满桔红色的圆形颗粒。核淡紫色，常分2叶。c、嗜碱性粒细胞：不易找到，胞体比上述两种白细胞稍小。胞质中分散着大小不等的蓝紫色圆形颗粒。核色稍淡，位于细胞中央，圆形或分叶。d、淋巴细胞：核深蓝紫色，胞质天蓝色、很少，常呈圆环状围绕细胞核.e、单核细胞：不易找到。胞体很大，呈圆形成卵圆形。胞质多，呈灰蓝色。核呈肾形戎马蹄形，常扭曲或折叠。f、血小板：常聚集成群，形状不规则，淡蓝色，中央有紫色的小颗粒。蛙血涂片/鱼血涂片红细胞的胞体呈卵圆形，具有卵圆形细胞核，血栓细胞是成群的卵圆形细胞，有卵圆形的核和染成淡蓝色的细胞质。其它血细胞特征同人血细胞。,四、结果分析：绘图及标注(高倍镜下绘各组织的一个局部)1.单层立方上皮：立方上皮细胞细胞核2.复层扁平上皮：基底层细胞多角形细胞扁平细胞3.疏松结缔组织：胶原纤维弹性纤维成纤维细胞巨噬