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文档简介

.第1,5章植物胚胎培养技术,2,1,植物胚胎培养的概念(EmbryoCulture)包括成熟胚胎培养、未成熟胚胎培养、卵子培养、卵巢培养、胚乳培养、试管受精等类型。1904年,汉宁首次成功培育了萝卜和芥末胚胎。3,4,5,胚胎文化技术的应用:a .主要用于克服远缘杂交的不兼容;b .促进胚胎的发展。c .克服胚胎的休眠。d .用于胚胎学理论研究。6,2,植物胚胎文化技术(a)体外胚胎文化:包括成熟胚胎和未成熟胚胎的培养。植物胚胎发生过程:原始胚胎-球形胚胎-鱼雷胚胎-子叶胚胎,7,球形胚胎前,球形胚胎,心脏胚胎前,鱼雷胚胎。8,9,成熟胚培养:成熟胚是子叶后的胚胎,在简单培养基中发芽生长。对营养条件要求不严格。主要用于繁殖不易发芽的植物,或研究胚胎与胚乳、子叶的关系等。10、台湾红豆杉成熟胚文化,11、牡丹成熟胚的离体培养和快速繁殖matureemoryocultureandrapidpropagationoftreepeony。12,2。未成熟胚胎文化:未成熟胚胎(心脏胚胎阶段)对培养条件及营养要求很高。需要多种营养和适当的培养条件。影响未成熟胚胎文化成功的因素主要是未成熟胚胎发育时期、培养基及培养条件等。13,14,(1)天然提取物和特定蛋白质产品;1934年在银杏幼胚培养中添加银杏胚乳起到了促进作用。1941年发现,在蔓塔罗未成熟胚胎培养中添加椰奶可以很好地促进未成熟胎儿的发育(200-500um未成熟胎儿)。大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物、水解酪蛋白等可以促进未成熟胎儿的发育。15,(2)渗透压的作用:胚胎发育早期要求高的渗透压随着胚胎的发展逐渐减少。16,17,(3)植物激素和生长调节剂的作用:添加生长素适当浓度,可促进胚胎发育,单激素影响发育。(4)其他因素:pH值在大多数未成熟胎儿中为5.4-5.8。温度25-30oC适用于大多数植物。18,(2)卵子和卵巢培养:1,卵子培养:包括授粉卵子和未授粉卵子培养。1942年,兰花首次成功,从授粉到成熟的时间缩短了。1980年成功培养了未授粉的非洲菊、烟草的卵子,获得了单倍体植物。19、花植物花结构图标,20,21,22,影响卵子培养的因素:(1)材料选择:生理状态,基因型,发育时期。未授粉的卵子:开花前1-6天;授粉卵子:授粉后1-120天多种多样,在后期有利于胚胎发育。(2)材料消毒:在处理卵子培养之前将其去除。23,(3)培养基:a .植物激素传粉卵子:细胞分裂因子通常促进胚胎发育。未授粉的卵子:外源激素不利于向日葵的孤雌生殖。矮牵牛未授粉的卵子培养不需要激素,其他的要适当添加。b .有机物:添加有机添加剂可以促进水分卵子的发育。c .蔗糖浓度:3-12%,通常5%,高浓度有利于孤雌生殖。(4)胎儿组织的影响:促进胚胎发育。24,2,卵巢培养:包括水分卵巢和非水分卵巢培养。1949年和1951年首次在黄瓜、西红柿、大豆、草莓、烟草等植物上取得了成功。水分卵巢培养形成成熟的水果和种子。未授粉的卵巢培养形成小无籽果实。25,未授粉卵巢培养中应注意的问题:(1)材料选择;基因型,发育时期(接近成熟胚囊容易成功)(2)培养基:基本培养基(gramineous N6),植物激素(一起使用),蔗糖浓度(3-10%)(3)培养方法单倍体胚胎的来源:卵细胞、辅助细胞或半足细胞等可以是多种来源。26,(3)胚乳培养:胚乳是被子植物中双受精的产物,是极核和雄配子的三倍体组织。裸鼠胚乳在受精前形成为单倍体。仅40多种植物就进行胚乳培养研究,获得猕猴桃等再生植物的20种。混合现象很多。,27,胚乳培养中需要注意的问题:(1)确定适当的发育时期(发育旺盛期);(2)严格区分胚乳和其他组织。(3)激素的合理使用;(4)光、温度条件(24-280 c;)注意。黑暗的条件)。28,(4)试管受精:植物的体外受精(Invitrofertilization)或植物的试管受精,即在体外人工控制的环境下,植物两性配子体的融合是通过技术操作实现的。该技术在20世纪6

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