乙肝血清标志物检测PPT课件

(1)乙型肝炎血清学标志物的检测及意义，郭险峰，山西医科大学第二医院检验科，(2)抗原成分传染源传播途径的血清学模式及病原学诊断的临床意义，(3)前言，我国各种传染病中病毒性肝炎发病率最高，乙型肝炎在我国危害极大，我国有近3000万乙型肝炎患者，特别是一般由嗜肝病毒感染引起的肝炎。HBV-属于嗜肝脱氧核糖核酸病毒。4，甲，病毒性肝炎，肝炎病毒，肠道传播，肠胃外传播，TTV？其他，E，nanb，B，D，C，病毒性肝炎-背景，感染源，粪便，血液/，血液衍生物质/，体液，血液衍生物质/，体液，血液/，血液衍生物质/，体液，粪便，传播途径，粪便-口，皮肤/粘膜，皮肤/粘膜，粪便-口，慢性感染，否，是，是，是，否，病毒性肝炎类型，A，B，C，D，E，基因组型ssrnadsdnassrnassrnassrna6、乙型肝炎病毒，乙型肝炎病毒的病原体乙型肝炎1是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的一种传染病，主要是肝脏炎症性病变，可引起多器官损害。这种疾病在世界所有国家都很普遍，主要影响儿童和年轻人。少数患者可转化为肝硬化或肝癌。因此，它已成为严重威胁人类健康的世界性疾病，也是我国最普遍、危害最大的传染病。乙型病毒性肝炎没有明确的流行期，它可以全年发生，但大多是散发性的。近年来，乙型肝炎发病率呈明显上升趋势。据估计，世界上一半以上的人口感染了HBV，5%的人口长期感染了HBV。中国是乙型肝炎的高发区，人群中乙肝表面抗原的检出率为9.8%。8、乙型肝炎病毒在电子显微镜下、9、乙型肝炎病毒HBV和乙型肝炎病毒(HBV)都是特异性的亲肝病毒。近年来，由于核酸分子杂交技术的进步，HBV-DNA也可以在肝外器官细胞中检测到。北京乙肝病毒实验研究提供了肝外细胞复制的证据。人类HBV也可能在肝外细胞中复制，这需要进一步研究。电镜检查HBV感染者血清中有三种病毒颗粒。1.完整HBV粒子直径为42纳米的大球形粒子，也称为戴恩粒子，分为两部分：外壳和核心。外壳和包膜含有表面抗原，内壳是核心结构，有一个核心抗原。e抗原隐藏在核心抗原下。10，乙肝病毒HBV，2。小球形颗粒是阳性血清中最常见的颗粒，主要是表面抗原，不包括核酸和DNA成分，是不完全HBV。3.管状颗粒实际上是一系列聚集在一起的小球形颗粒，也含有表面抗原。HBVVIRION，theinfectioushionicialicalledhedane粒子。嘿。13，DANE粒子(完全病毒)形态学，HBsAg，HBcAg，HBVDNA，DNAP，(外膜蛋白)，(核衣壳蛋白)。14，BothcomprisedofHBsAg，15，HBVnomenclature，HbV : HepItisBvIrusHBsAg : HepItisBvIrussurFaceantinghbsAb : HepItisBvIrussurFaceantiBodyHBcGa : HepItisBvIrusCoreAntiBocbAb 3: HepAtitisCoreAntiBodyHBeAge : HepItabvireanGanBehab : HepItabviruseAntiBodyHBaBody，16，抗原组成(I) -乙肝表面抗原，位于病毒表面，是一种糖蛋白(以前称为奥康)。发生时间：在HBV感染后2-6个月(潜伏期)内，乙型肝炎表面抗原有10种亚型，亚型之间存在不完全交叉免疫。最近对亚型单克隆抗体的研究表明，D和Y、W和R决定簇可以同时存在于同一病毒抗原颗粒上，形成adwr、aywr、adyw和adyr复合亚型。嘿。17，其机制是不同亚型病毒的双重感染；(2)在感染单一亚型病毒后，一些HBV-DNA具有点突变。临床表现包括反复发作的疾病和严重的肝损伤，因此一些HBV感染患者的血清中乙肝表面抗原和抗乙肝表面抗原均呈阳性。四种亚型(adr、adw、ayr、ayw)。刺激身体产生保护性抗体，即抗-HBs。它是抗原性的，没有传染性。然而，乙型肝炎表面抗原被认为是一种传染性标记，因为乙型肝炎表面抗原和HBV经常同时存在然而，应该注意的是，HBV-DNA可以从X基因区域的终点与肝细胞反向整合。整合的S基因表达强，可持续产生乙型肝炎表面抗原。整合的HBcAg基因组被抑制，不表达HBeAg和HBcAg。在这种情况下，即使HBV已经从体内被清除，乙型肝炎表面抗原仍然可以持续呈阳性。理论上，这种乙肝表面抗原阳性的血液没有传染性。急性HBV感染后，乙型肝炎表面抗原首先出现在血清中，在整个急性期呈阳性，在恢复期呈阴性。如果乙型肝炎表面抗原持续阳性超过半年，则称为慢性乙型肝炎表面抗原携带者(无症状乙型肝炎表面抗原携带者)，并可持续阳性数年。人们普遍认为，乙型肝炎表面抗原滴度与病理变化的程度不成比例。肝功能正常，乙肝表面抗原下降高，肝脏可能是一个重要的病变，如果乙肝表面抗原为阴性，脱氧核糖核酸为阴性，就没有重要的传染性。相反，肝功能异常，乙肝表面抗原滴度不高，肝脏会有明显的病理变化，如一些肝硬化和肝癌患者是乙肝表面抗原阴性或滴度低。无症状的乙型肝炎表面抗原携带者或慢性活动性乙型肝炎可以有相同的乙型肝炎表面抗原滴度变化，这不能代表疾病的严重程度。因此，乙型肝炎表面抗原滴度的变化不能作为判断疾病严重程度和药物疗效的指标。20，免疫电镜和免疫荧光证实肝细胞血浆中有乙型肝炎表面抗原，但血清中乙型肝炎表面抗原阴性。这一机制尚未得到解释。其中一个已知的原因是目前的放射免疫分析检测方法的检测灵敏度为10-5，最低的感染量(10-7)还不能被检测到，所以有10%的假阴性。因此，乙型肝炎表面抗原的判断具有阳性诊断意义，而阴性不能排除HBV感染。近年来，已发现血清中的HBV标记均为阴性，而在白细胞或肝细胞中检测到HBV-DNA，这表明HBV感染的确定或排除不能仅通过HBsAg来确定，而应与其他标记结合。嘿。嘿。21，乙型肝炎表面抗原，持续时间急性自限性肝炎：血液中的乙型肝炎表面抗原大多持续1-6周，最多可在6个月内消失慢性肝炎或慢性乙型肝炎表面抗原携带者：持续阳性。嘿。22，抗原组成(二)-六溴环十二烷，六溴环十二烷是HBC复制的指标。它位于丹恩颗粒和肝细胞核的核心部分。血清中不易检测的游离HBcAg的主要成分是蛋白质刺激机体产生抗-HBc(非保护性抗体)，抗-HBc存在于受感染的肝细胞核中，具有很强的免疫原性。抗-HBc通常在急性期、恢复期和乙肝表面抗原携带者中检测到。除非HBVC基因序列有很少的变异或感染者有免疫缺陷。抗-HBcGM阳性表示慢性感染的急性期或急性发作。抗-HBcIgG出现较晚，但可以维持多年或终身。23，(抗-HBs，出现时间：急性感染后期或HBsAg转阴后(只能在几个月内检测到)。它在6-12个月内逐渐上升到峰值，并可持续多年，但滴度将逐渐下降。抗-HBs是一种保护性抗体(中和抗体)，表明HBV感染进入恢复期。* HBS对同一乙型肝炎表面抗原亚型的HBV再感染免疫，但对不同亚型的HBV病毒的保护不完全。嘿。24，抗原组合物(三)- HbeAg，位于HBV的核心，是一种可溶性蛋白抗原HbeAg和Dane颗粒，它们相互平行，并与血液中DNA聚合酶的动态变化相一致。血液中HBeAg的存在可作为HBV复制和血清传染性的指标。在急性HBV感染中，HBeAg的出现时间略晚于HBsAg，并在病变的极期后消失。如果HBeAg继续存在，这表明它往往是慢性的。大多数病例的持续表明患者正处于高感染率和低反应期。刺激身体产生抗HBe。转化过程是指从免疫耐受到免疫激活的转化，这往往导致病理变化的加剧。抗-HBe能与感染肝细胞表面的E抗原结合，通过补体介导破坏感染肝细胞。抗-HBe的出现是预后良好的标志。抗-HBe阳性转化后，病毒复制处于静态，传染性降低。一些病人仍然有病毒复制和肝炎检测HBV-脱氧核糖核酸和脱氧核糖核酸-有助于判断HBV病毒感染者的病毒复制程度和传染性，更敏感地评价抗病毒药物的疗效。乙肝。26、抗原组成(4)-前S抗原位于HBV的外壳上。有两种抗原刺激机体产生抗前S1和抗前S2，它们可以阻断HBV与肝细胞受体的结合，从而起到抗病毒的作用。反前S1和反前S2的出现表明，这种疾病正在好转，并趋于痊愈。27，感染源，无症状乙肝表面抗原携带者患者处于急性期和慢性潜伏期，高、中、低/不可检测，血液、精液、尿液、血清、阴道分泌物、粪便、伤口渗出物、唾液、汗液、眼泪、乳汁和各种体液中的HBV浓度，29、输血传播、注射、外科和牙科手术、剃刀如针灸、母婴传播如牙刷和蚊虫叮咬的垂直传播、分娩期间微小皮肤损伤处母婴传播的密切接触传播、HBV传播30岁。31，病因诊断(1)-抗原和抗体检测，项目：乙肝表面抗原，抗-乙肝表面抗原，乙肝表面抗原，抗-乙肝表面抗原，抗-乙肝表面抗原，抗-乙肝表面抗原和抗-乙肝表面抗原酶联免疫吸附测定法(酶-连接免疫吸附测定法，最常用，定性)发光免疫测定法(定量)反向间接血凝试验(较少使用)，32、酶联免疫吸附试验的基本原理，利用抗原和抗体特异性结合主要试剂固相抗原或抗体酶标记的抗原或抗体酶底物，33，酶联免疫吸附试验的主要方法，间接法：测定抗-HBs夹心法：测定HBsAg和HBeAg竞争法：测定抗-HBc中和法：测定抗-HBe捕获法：测定抗-HBcGM，34，病因学诊断(2)-核酸检测，核酸杂交探针聚合酶链反应引物，35，各种HBV血清标志物的解释，乙肝表面抗原-HBV感染的标志物，其可能是急性或慢性抗-乙肝表面抗原-来自先前感染/接种的天然免疫产生抗-乙肝表面抗原-急性HBV感染标志物抗-乙肝表面抗原-先前或慢性HBV感染HBeAg-活性病毒复制，高传染性抗-乙肝表面抗原-慢性感染，病毒不再复制，低传染性HBV-DNA-直接测定病毒复制状态，比HBeAg更准确；临床上主要用于监测治疗反应。36岁。为什么我们需要对乙肝进行“两半”的定量检测？乙型肝炎是一种全球性传染病，严重威胁人类健康。中国是乙型病毒性肝炎高发国家，据统计，世界上无症状携带者(乙肝表面抗原携带者)超过2.8亿。中国有超过1亿人口，其中大部分是无症状的。因此，乙型肝炎的早期诊断对控制传染源、降低发病率和治疗疾病具有重要意义。酶联免疫吸附试验(ELISA)始于20世纪80年代中期。在乙型肝炎的诊断、疾病监测和疗效观察中发挥了一定的作用，但酶联免疫吸附试验对乙型肝炎表面抗原的敏感性较低，不能真正定量测定血清中乙型肝炎表面抗原的含量。随着临床医学的发展，定性检测远远不能满足临床和患者的要求。化学发光免疫分析法定量测定乙肝“两半”，极大地弥补了酶标测定法的不足和灵敏度低的缺点。，37，血清学检测的临床意义，乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎，38，血清学检测的临床意义，乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原抗-乙型肝炎表面抗原的临床意义，血清学检测的临床意义，对于慢性携带者，HBV感染已经恢复，他们有免疫力。39、符号命令、HBeAg、抗-HBe、Totalanti-HBc、IgManti-HBc、抗-HBs、HBsAg、0、4、8、12、16、20、24、28、32、36、52、100、AcuteHbBvCompictionWithRecovery、典型血清学，40，总计抗-HBc，HBsAg，急性(6个月)，HBeAg，慢性(年)，抗-HBe，0，4，8，12，16，20，24，28，32，36，52，年，周安全暴露，滴度，进展慢性乙肝感染，影响乙肝检测的五个因素：1。样品收集和处理的效果1.1混合有红细胞的样品和血清的严重溶血很容易沉淀或粘附在聚乙烯孔上，并且不容易清洁。留在毛孔中的血红蛋白具有类似过氧化物酶的活性。催化底物的显色会导致假阳性，严重的溶血样品是禁止的。1.2塑料试管可以吸附抗原物质。如果将样品长时间放置在塑料管中，样品中的抗原含量会降低，导致假阴性。