DNA重组技术的基本工具PPT精选文档

1、基因工程、细胞工程、胚胎工程、生态工程选材3现代生物科学技术专业2、专题1基因工程、基因工程：根据人们的需求进行严格的设计，通过体外DNA重组和基因重组等技术，赋予生物新的遗传特性，创造更符合人们需求的新的生物类型和生物产品。 基因工程是在DNA分子水平上设计和施工的，故又称为DNA重组技术。 基因工程概念，3，基因结合技术和DNA结合技术，生物体外，基因/DNA，分子水平，人类所需的基因产物，剪切，结合，导入，表达，基因结合，优点：实现定向改造生物遗传性状的基因在不同物种间的转移，迅速培育生物新品种，4，1 .基因结合的理论基础(1)多(2)DNA的基本构成单位是4种脱氧核苷酸。 (3)双链DNA分子的空间结构均为规则的双螺旋结构。 基因工程诞生的理论基础，2 .外源基因在受体中表达的理论基础(1)基因是调控生物性状的独立基因单位。 (2)遗传信息的传递均遵循中心法则。 (3)生物界共享遗传密码。 5、生长快、肉质好的转基因鱼(中国)、转基因生物例如乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)、转入人生长激素基因的超级小鼠、转基因蓝玫瑰、6、转基因抗虫棉、7、基因工程培育抗虫棉的简单解决培养抗虫棉的关键步骤所需要的工具是什么？ 8、8、8,1.1DNA重组技术的基本工具是识别9、双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且识别单链中特定部位两个核苷酸之间的磷酸二酯，其中分子切刀、限制酶、“分子缝合针”-“DNA连接酶”-“分子载体”-“基因进入受体细胞载体主要为原核生物，4000种。 1、由来：2、种类：3、作用：4、结果：形成两个末端，一、“分子刀”限制核酸内切酶、10、限制酶、限制内切酶作用过程，11、粘性末端是什么？ 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，由限制酶切开的DNA的两条单链切口有几个核苷酸，它们恰好互补，这样的切口称为粘性末端。12、什么是平末端，限制酶从识别序列的中心轴切开时，切开的DNA的2条单链切口是平的，这样的切口称为平末端。 13、限制酶识别的序列特征、限制酶识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都能找到一个中心轴，中心轴两侧双链DNA上的碱基呈反对称重复排列。 14、限制酶的识别序列：被限制酶特异性识别的切断部位均具有回文序列：在切断部位，一链先读取的碱基顺序与另一链先读取的碱基顺序完全一致。 15、基因针线： DNA连接酶，16，2，分子缝合针 DNA连接酶，1，种类： 2，作用部位：磷酸二酯键(扶手)不是氢键(梯子)，连接粘性末端和末端，将双链DNA片段“缝合”，限制酶切开的两个核苷酸之间的里17、DNA连接酶的作用过程18、常用载体：质粒、复制开始序列、切割位点、标记基因的存在、含氨苄青霉素培养基鉴别、三、“分子载体”基因进入受体细胞载体，质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物细胞中。裸体结构简单，细菌拟核DNA或核外自复制的小双链环状DNA分子，19，载体应具备的4个条件：(1)有1 多个不同限制酶的接点： (2)对受体细胞无害： (3)导入基因可以在受体细胞复制表达： (可以在宿主细胞内复制并稳定保存) 有几个标记基因的-77777777777777777777777777777777776，3，作为载体，如果没有切断部位会发生什么？ 4、如何鉴定具有目标基因的载体是否进入受体细胞？ 5、如果目标基因导入受体细胞后无法复制，会怎样？ 1、从化学组成来看，载体应该含有什么成分，双链DNA，不可能，DNA不能重组，载体上有标记基因，基因可能丢失，21、扩张提高，消旋酶，限制酶，DNA聚合酶，DNA连接酶，氢键，磷酸二酯键，22 磷酸二酯键，23，t，磷酸二酯键，a，24，复制阶段解说，25，限制酶和DNA外消旋酶的不同，切断特定核苷酸序列的磷酸二酯键，打开DNA双链的氢键，形成双链，26，DNA连接酶和DNA聚合酶是相同的吗？ 为什么？1 )将单一核苷酸连接到现有的核酸片段上，形成磷酸二酯键，形成磷酸二酯键，1 )在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，2 )以一个DNA链为模板，通过磷酸二酯键将单一核苷酸互补的DNA链DNA双链的两个间隙同时连接，无需铸型，27、教科书知识回顾、基因工程又称为or。 一般来说，提取某种生物，将其放入另一种生物的细胞中，改造生物的遗传性状。 基因剪接技术，DNA重组技术，基因，修饰改造，定向地，28，限制性核酸内切酶，主要来源酶。 识别双链DNA分子的某些种类，使单链中特定部位的两个核苷酸之间发生断裂。 形成两种末端，从原核生物中分离纯化出特定的核苷酸序列，磷酸二酯键，粘性末端，平末端，29， 练习，在基因工程中，要切断含有载体和目标基因的DNA片段，需要()同种限制酶b .两种限制酶同种的连接酶d .两种连接酶，质粒不被载体选择的原因是a，可复制，() b，具有多个限制酶切点c，标记基因d，它是环状DNA 在基因操作的基本步骤中，不进行碱基配对的步骤包括： () a，目的基因b，目的基因与载体的结合c，目的基因导入受体细胞d，目的基因的检测和表达，c，被选为不属于质粒的基因载体的理由是a，可复制，() b，多个限制性内切酶位点c， 具有标记基因d，其为环状DNA、d、31，如右图所示，关于工具酶功能的记述错误的是() a .限制酶能够切断a部位，DNA连接酶能够连接a部位的B.DNA聚合酶连接a部位的c .螺旋酶，b部位的d .连接酶能够连接DNA d，32，限制酶I的识别序列和接点为-gGATC，限制酶ii的识别序列和接点为gatc。 质粒具有酶的一