高效液相色谱法习题答案

高效液相色谱苦恼考试问题和练习问题1.简述了高效液相色谱和气相色谱的主要异同。相同点：一种高效、快速、高选择性的色谱方法，可以全部联机检测其他点：分析对象和范围流动相选择工作条件GC可气化、热稳定性好、沸点低的样品，占有机物的20%移动床由于多种“惰性”气体有限，只起到搬运作用，对成分起小作用加热大气压操作HPLC溶解后可制成溶液的样品，高沸点、高分子量、气化困难、离子型稳定或不稳定化合物占有机物的80%流动相是液体或各种液体的混合。它除了承载作用外，还可以通过溶剂控制和改善分离。室温，高压下进行2.离子色谱、反相离子对色谱和离子抑制色谱的原理和应用范围有何不同？离子色谱：以离子交换树脂为固定相，以电解质溶液为流动相。使用电导检测器作为通用检测器。样品成分在分离柱和抑制柱中的反应方式与离子交换色谱相同。离子色谱是溶液中阴离子分析的最佳方法，也可用于阳离子分析。反相离子对色谱(IPC或PIC):反相色谱中，在极性流中添加离子对试剂，使被测量的组件形成其中的反离子和中性离子，增加k和tR以改善分离。适用于强力有机酸，碱。反相离子抑制色谱：反相色谱中添加缓冲溶液，控制流动相pH值，抑制分组分解，增加其k和tR，达到提高分离的目的。极弱的酸碱物质(pH=37弱酸；PH=78弱碱；男女化合物)3.速度理论方程式在HPLC中与GC有何不同？如何指导HPLC实验条件的选择？在：液相色谱中，引起色谱峰扩张的主要因素是涡流扩散、流动传质、滞留流动物质、柱外效应。在气相色谱中，径向扩散倾向于更明显，但在液相色谱中，径向扩散的影响较小，因此经常被忽略。另外，液相色谱中滞留流动和柱外效果比较明显。高效液相色谱中液体分配色谱、Van Deemter方程的完整表示如下因此，HPLC的实验条件应如下：粒度小，球化学结合均匀；低粘度流动相，流速不应太快。热温度适中。4.讨论影响HPLC分离度的各种因素，如何提高分离度？(1)色谱填充性能液体柱分离性能的优缺点由固定相粒度、柱长、柱内径和填充条件确定的柱压降三个参数图确定。这三个参数也决定了样品组件的保留时间，保留时间不仅与色谱过程的热力学因素k有关，还与确定热效率和分离度的热性能参数和与流动直接相关的粘度有关。这些参数都是影响色谱分离过程动力学的重要因素。但是在高效液相色谱中，分离柱的制造是一项技术要求很高的工作，通常很少购买商品柱自行制造。(2)流动相和流动相极性在液相色谱中，改变淋浴成分和改变极性是提高分离的最直接因素。液相色谱不能提高热温度，提高传质。所以大部分是恒温分析。流动相的选择在液相色谱中尤为重要，流动相可以显着改变元件的分离状态。(3)流速如果流速大于0.5 cm/s，则h u曲线是坡率不大的直线。降低流速，柱效果不会明显提高。但是，在实际操作中，流仍然是调整分离和峰值时间的重要可选参数。指出了反相色谱中苯、萘、蒽的溶出顺序，并说明了原因。这三种极性顺序从大到小是苯、萘、蒽，因此在反相色谱中，溶出顺序是苯、萘、蒽、苯首先是最高峰。需要什么HPLC方法来分离以下材料？(1)乙醇和丁醇；(2)Ba2和sr2(3) n-戊酯酸和n-丁酸；(4)相对分子质量的葡萄糖苷。(1)两相耦合气相色谱(2)离子交换色谱(3)离子对色谱(4)空间排斥色谱外标准法测定黄芩颗粒中黄芩苷的质量分数。8.内部标准修正系数法计算阿尔金和阿尔金的质量分数。9.测定生物碱样品中黄连和小檗碱的含量。内标记、黄连和小檗碱对照分别使0.2000g成为混合溶液。测量的峰值面积分别为3.60105、3.43105和4.04105mVs。用溶液制造0.2400g内部标准和样品0.8560g后，在相同色谱条件下，峰面积为4.16105、3.71105和4.54105mVs。计算样品中黄连和小檗碱的质量分数。(黄连碱26.2%，小檗碱27.3%)10.用15厘米长的ODS列分离两个成分。柱效果n=2.84104m1；测量T0=1.31分钟；成分的分；=4.45分钟