第五章消毒与灭菌

消毒与灭菌,第五章,灭菌效果可靠，不残留有害物质，是消毒工作中的首选方法。常用的有：,热力紫外线电离辐射过滤除菌,微波等离子体冷杀菌技术等,四、物理消毒与灭菌方法,（一）热力热力灭菌是利用高温杀灭微生物1.湿热灭菌法2.干热灭菌法,四、物理消毒与灭菌方法,1.湿热灭菌法湿热穿透力强；湿热中菌体吸收水分，使菌体蛋白质易于凝固变性；湿热蒸汽有潜热，潜热可迅速提高被灭菌物品的温度。,杀菌机制：使菌体蛋白质变性和凝固；使细菌核酸降解；使细菌胞浆膜损伤。常用方法：煮沸、流通蒸汽、巴氏消毒、压力蒸汽灭菌等。,2.干热灭菌法穿透力与杀菌作用不及湿热，所需温度高(160)，时间长(13h)用于耐热忌湿物品的消毒杀菌机制：是使菌体蛋白质变性；电解质浓缩常用方法：烘烤、红外线照射、烧灼、焚烧等焚烧对废弃物兼有消毒与销毁的作用,是以较高的压力提高蒸汽的温度和穿透力，灭菌效果可靠、快速，不留残毒。（1）下排气式蒸汽灭菌器：根据蒸汽比空气轻的原理，将蒸汽缓慢均匀由上方不断通入灭菌器内，将空气由下方排气口挤压排出。方法简单，但影响因素多，很难将冷空气排除彻底，器内存在冷空气可阻碍蒸汽对物品的穿透，稍有不慎即可造成灭菌失败。,3.压力蒸汽灭菌器,下排气式蒸汽灭菌器有手提式、立式和卧式三种。操作时应注意：冷空气：彻底排出包装：不能过紧装载量：不得超过总体积的80%灭菌时间：根据物品的导热性和包装大小确定,3.压力蒸汽灭菌器,3.压力蒸汽灭菌器,3.压力蒸汽灭菌器,先将空气抽出，再通入蒸汽至常压或略高反复34次最后一次抽真空后，通入蒸汽至182.41kPa(132)持续34min进行灭菌。,（2）脉动真空压力蒸汽灭菌器,脉动真空压力蒸汽灭菌器优点,灭菌效果稳定：反复抽气，98%冷空气被抽出，加快了蒸汽对物品的穿透，减少了对容器透气性的要求；,对物品装载量和装载方式没有严格要求；,灭菌时间短：减少了高温对物品的氧化损害；,自动化、智能化：自动记录打印，有利于消毒监督工作。,不适用于液体的灭菌,脉动真空压力蒸汽灭菌器缺点,4.压力蒸汽灭菌器的监测（1）压力、温度和时间的监测（2）化学指示器材的监测：,灭菌指示胶带：灭菌包外灭菌指示卡：物品包中央B-D试验指示图：标准敷料包内中层,压力蒸汽的灭菌效果如何监测？,灭菌指示胶带,（3）生物指示器材监测将嗜热脂肪杆菌芽孢(ATCC7953或SSIK31株)染于纸片上，干燥后装入纸袋或安瓿内备用。含菌量：5.01055.0106cfu/片D值：1.31.9min（1210.5）杀灭时间(KT值)：19min存活时间(ST值)：3.9min,D值：1.31.9min杀灭试验微生物数量达90%所需的时间或辐射剂量杀灭时间(killingtime,KT)：用于生物指示物抗力鉴定时，受试指示物样本，经杀菌因子作用后，全部样本无菌生长的最短作用时间（min）存活时间(survivaltime,ST)：用于生物指示物抗力鉴定时，受试指示物样本，经杀菌因子作用后，全部样本有菌生长的最长作用时间（min）,（3）生物指示器材监测,培养基：溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养温度：561培养时间：7d监测次数：1次/月菌片：卫生部认可，有效期内使用阴性对照和阳性对照快速生物指示器材，12h内出结果,（3）生物指示器材监测,1.使用前先检查有效期,3.灭菌结束后，从灭菌器内取出,2.将生物指示剂置入灭菌袋内，封口，置于灭菌器内,4.灭菌处理后的生物指示剂,注明标签及日期,48h后，观察结果阳性：黄色且浑浊阴性：不变色（仍为紫色）,5.将灭菌处理后的生物指示剂置于5560培养6.未处理的生物指示剂作阳性对照，注明标签,5.超高温瞬时灭菌超高温瞬时灭菌机的结构：（1）主机内装着压力容器-高温桶，充盛压力蒸汽。桶外是螺旋形双套管，对进、出物料的冷热交换桶内是螺旋形单管，间接受热,（2）灭菌过程：物料通过供料泵进入双套盘管的外层流道，由内层流出的热料间接加热-预热；物料进入高温桶内的高温盘管桶内的蒸汽间接加热至需要的灭菌温度然后在桶外单旋管内保温，杀灭细菌，当回到双套盘管时，物料便进入内层流道，被外层冷料冷却，使出料温度显著下降（低于65）。如工艺需要提高或降低出料温度时，可启用角式截止阀，接通蒸汽或热源（水或冰水等），让它们进入双套管下端的外层流道。,（3）调节节流阀一方面：让物料维持在一定的压力下，提高沸点温度，防止汽化；另一方面：调节流量。物料最后经三通旋塞出料。该旋塞下端接着旋管，其出口接贮槽，当需要时，可旋动旋管对准溢流管。进料三通旋塞的上端与贮槽接通，下端则与物料源管道相连接。当需要提高处理能力时，可卸去“U”形管改接离心泵。,超高温瞬时灭菌机适用范围鲜乳、果汁、饮料、棒冰及冰淇淋浆料、酱油、豆浆、炼乳、酒类等流体食料的瞬时灭菌，也可用于其它流体的灭菌，效果十分显著。主要规格及技术参数1.处理能力:1.52m3/h；2.灭菌温度:115135；3.蒸汽压力:0.78Mpa；4.高温受热时间:4-6S；5.出料温度:45(加冷却管)；6.出料温度:65；7.蒸汽消耗量:0.15kg/L物料；,紫外线为非电离辐射，200280nm波长的紫外线具有杀菌作用，240280nm最强(以253.7nm为代表)，与细菌DNA吸收光谱范围一致，1.杀菌机制：主要是作用于DNA，使一条链DNA上相邻的二个胸腺嘧啶共价结合而形成双聚体，改变DNA的分子构型，干扰DNA的复制与转录，致细菌死亡或变异。,（二）紫外线,2.优点：（1）操作方便（2）杀菌谱广,3.缺点：（1）穿透性差（2）反射率低（3）阴影效应（4）影响因素多紫外线适用于对平坦光滑的表面、或流动的空气和水的消毒，一般不用于灭菌处理。,（二）紫外线,4.紫外线消毒监测项目（1）测定辐照度值：用辐照度值测定仪或化学指示卡距光源lm处测定（2）表面消毒的效果监测：菌片定量法或棉拭涂抹采样定量法（3）空气消毒效果的监测：琼脂平板沉降法或撞击法采样消毒后菌落总数不应超过国家规定的卫生标准,紫外线消毒空气,紫外线消毒柜,包括高速电子、X射线和射线等。1.杀菌机制：电离辐射具有较高的能量和穿透力，直接或间接破坏微生物的核酸、蛋白质和酶系统从而对微生物产生致死效应。60Co（137Cs）辐射和电子加速器照射装置,H2OH、OH、HO2、H2O2、H2,（三）电离辐射,2.电离辐射的优点：穿透力强物品不升温，适用于忌热物品的消毒或灭菌。如塑料制品、生物制品、食品、药品(中药)等包装后消毒和灭菌：多用于对一次性使用医疗卫生产品Co60照射装置：应用最为普遍电子加速器照射装置：占地小，使用较安全，宜用于对小件物品，如外科缝线、手术刀等一次性使用器材的灭菌,电离辐射装置,（四）滤过除菌1.原理：是用特殊的器具将液体或空气中的细菌除去，以达到无菌目的。滤菌器的微细小孔，只允许液体或气体通过，而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。用途：主要用于不耐高温的血清、毒素、抗生素、药液以及空气的除菌。滤菌器的种类：薄膜滤器、素瓷滤器、硅藻土滤器、玻璃滤器和石棉滤器等。滤膜：由硝酸纤维素或醋酸纤维制成。,2.层流通风法使空气经高效滤器过滤后，由房间的一侧均匀缓慢地流向另一侧(或由上往下)，将污染空气排出，可达近乎无菌程度。用于空气消毒、除尘设备,医院、实验室、工厂等对空气洁净度要求严格的场所已广泛采用。,空气层流模式图,高效滤器,高效滤器,空气出口,空气出口,图空气乱流模式,高效滤器,空气出口,空气乱流,HEPAFilter,1.原理：微波使物质中偶极子（如水分子）产生高频运动，从而将微生物杀灭。兼有热和其他效应。,2.优点：（1）作用温度低，与红外线加热方法相比（2）时间短（3）内外加热均匀等,（五）微波,等离子体为物质的第四状态，由气体电离产生，含离子、电子和未经电离的中性粒子组成，对微生物有良好的杀灭作用。现有过氧化氢等离子体灭菌装置。用途：用于金属与塑料制品器材消毒内镜的消毒与灭菌不适用于纺织和液体消毒,（六）等离子体(plasma),等离子体灭菌装置,等离子体灭菌装置,（七）冷杀菌技术,超高压杀菌超高压脉冲电场杀菌脉冲强光杀菌放射线杀菌,在抑制杀灭微生物的同时，还能很好地保留食品的营养以及品质特性,半导体光催化杀菌脉动强光杀菌软电子束冷消毒杀菌超声杀菌,最大的优势,（七）冷杀菌技术,超高压杀菌(高压技术或高静水压技术)（ultrahighpressuresterilizationtechnology）是将食品物料包装以后，放入液体介质中，如是食用油、甘油、油与水的乳液在100MPa1000MPa压力下作用一段时间后，使之达到灭菌要求杀菌机制：,是压力对微生物的致死作用，主要是破坏细胞壁，使蛋白质凝固，抑制酶活性和抑制DNA等遗传物质的复制，等,（七）冷杀菌技术,超高压脉冲电场杀菌-是采用高压脉冲器产生的脉冲电场进行杀菌的方法。基本过程：是用瞬时高压处理放置在两极间的低温冷却食品。机理：细胞膜穿孔效应、电磁机制模型、粘弹极性形成模型、电解产物效应、臭氧效应等假设。主要作用:（1）场的作用（2）电离作用优点：保持食品的新鲜及其风味，营养损失少缺点：杀菌系统造价高，对黏性及固体颗粒食品中的应用还有待进一步研究,（七）冷杀菌技术,高压脉冲电场杀菌装置,（七）冷杀菌技术,强磁脉冲杀菌-采用强脉冲磁场的生物效应进行杀菌在输液管外面，套装有螺旋形线圈，磁脉冲发生器在线圈内产生（210）T的磁场强度当液体物料通过该段输液管时，其中的细菌即被杀死。升温一般不超过5，物料的组织结构、营养成分、颜色均不遭破坏利用磁场杀菌要求食品材料具有较高的电阻率，一般大于10cm，以防材料内部产生涡流效应而导致磁屏蔽,（七）冷杀菌技术,半导体光催化杀菌是光照射到大聚集体的TiO2表面时，激发产生光生电子和光生空穴对。光生空穴有很强的得电子的能力光生电子-空穴对一方面与细胞壁、细胞膜以及细胞内组分作用，导致酶失活等另一方面光生电子和水中溶解氧发生作用形成氢氧自由基，与细胞壁、细胞膜以及细胞内组分作用，使细胞功能单元失活半导体光催化通过生物生命活动过程中电子的得失来进行杀菌,脉冲强光装置是以极强的直流电通过充有惰性气体的灯管，发出比地面上太阳光强近2万倍的光能，在仅10-7s的滞留时间内照射于物料表面，达到有效杀死细菌的效果。也称“纯亮”杀菌光线组成：紫外线25%，可见光45%，红外光30%；脉冲持续时间：200300s脉动次数：120次/s功率：1.5J/cm2时，可使金葡菌减少107以上4.0J/cm2时，可使枯草杆菌芽孢减少107以上穿透能力有限,仅限于食品表面的灭菌,脉动强光技术(PureBrighttechnology),（七）冷杀菌技术,软电子束冷消毒杀菌是利用直线加速器产生的电子束破坏微生物的DNA，从而杀灭食品表面的细菌超声杀菌超声杀菌利用超声空穴现象产生的剪应力能机械地破碎细胞壁和加快物质转移的原理进行杀菌,（七）冷杀菌技术,超声波和高压联合杀菌辐照和高压联合杀菌高压和CO2联合作用高压和气调包装相结合辐照和气调包装联合保鲜,冷杀菌技术在食品工业中的应用？,杀菌机制应用范围优缺点,化学消毒灭菌法：利用化学药物杀灭微生物的方法化学消毒剂：用于消毒的化学药物,缺点：杀菌效果不稳定有腐蚀性、刺激性毒性（生态毒性）可造成环境污染,优点：种类多适用性广泛使用方便,化学消毒剂在消毒与灭菌工作中占有重要地位,五、化学消毒灭菌方法,（一）微生物对化学消毒剂的耐受力1.微生物对化学因子的抗力分级：,1.朊病毒(克雅氏病病原体)2.细菌芽孢(枯草杆菌芽孢)3.分枝杆菌(结核杆菌)4.无脂病毒或小型病毒(脊髓灰质炎病毒),5.真菌(发癣菌属)6.细菌繁殖体(绿脓杆菌、金葡菌)7.含脂病毒或中型病毒(单纯疱疹病毒、乙型肝炎病毒、艾滋病病毒)。,按杀灭微生物的能力分为三级：高效消毒剂中效消毒剂低效消毒剂,高效消毒剂可杀灭所有种类微生物(包括细菌芽孢)，达到消毒要求的消毒剂。如戊二醛、过氧乙酸等，提高此类消毒剂浓度或延长作用时间用于灭菌者，称为灭菌剂(sterilant)。,中效消毒剂：可杀灭细菌繁殖体(包括结核杆菌)、大多数种类的病毒与真菌(不包括细菌芽孢)，达到消毒要求的消毒剂，如乙醇等。,低效消毒剂：可杀灭大多数细菌与一些种类的病毒和真菌(不包括结核杆菌和细菌芽孢)达到消毒要求的消毒剂，如氯己定、苯扎溴铵等。,（三）常用液体消毒剂及其作用机制液体消毒剂指在使用时需配制为溶液的消毒剂。常用液体消毒剂按其成分与特性分为：,1.含氯消毒剂类5.含碘类2.过氧化物类6.季铵盐类3.醛类7.酚类4.醇类8.其他类,你所知道的化学消毒剂有哪些？,要求掌握的内容消毒剂作用机制适用范围优缺点注意事项,液体消毒剂的杀菌机制使菌体蛋白质变性或凝固：大多数重金属盐类、氧化剂、醇类、酚类、醛类、酸、碱等；干扰细菌的酶系统和代谢：某些氧化剂、重金属盐类（低浓度）与细菌的-SH基结合使有关酶失去活性；改变细胞膜的通透性：能降低细菌细胞的表面张力并增加其通透性，胞浆内物质溢出，胞外液体内渗，致使细菌破裂。如阳离子表面活性剂、脂溶剂等，,1.含氯消毒剂是指溶于水中产生次氯酸的消毒剂。如次氯酸钠、次氯酸钙、氯化异氰尿酸盐类、液氯等。杀菌作用：初生态氧的氧化作用，氯化作用形成氮-氯复合物用途：饮水消毒、预防性消毒、疫源地及医院消毒,优点：杀菌谱广价廉作用迅速,缺点：易受有机物影响有刺激性和漂白作用稳定性差,2.过氧化物类消毒剂杀菌作用是其氧化能力破坏蛋白质的分子结构杀灭微生物。种类：过氧乙酸、过氧化氢、过氧戊二酸、二氧化氯、臭氧等。,优点：广谱、高效作用迅速易溶于水分解后无毒、无残留毒性,缺点：不稳定、易分解未分解前有刺激性或毒性有漂白或腐蚀作用,臭氧（O3）氧气在一定条件下能转变为性质不同的另一种氧的单质（O3），具有特殊臭味气体，故名臭氧。是一种强氧化剂，可杀灭所有类型的微生物，并可破坏肉毒杆菌毒素在水中杀菌速度较氯快，是一种较理想的水消毒剂，臭氧消毒后无残余毒性，且能除去水中的异味、颜色和气味。,臭氧（O3）一般洁净饮用水消毒，臭氧浓度为0.51.5mg/L，作用510min。游泳池循环水处理，臭氧量为2mg/L。缺点：分解快，消毒作用持续时间短，不能清除持续污染稳定性极差，常温下可自行分解成氧，只能现场生产，立即使用,3.碘类消毒剂杀菌机制：碘元素可卤化菌体蛋白质，形成沉淀，杀灭微生物。碘溶于乙醇成碘酊，用于皮肤消毒。碘的水溶液可作口腔、咽喉及阴道粘膜的消毒。碘甘油溶液刺激性小，适用于粘膜消毒碘还可用于少量饮水的紧急消毒。,碘伏是碘与表面活性剂（如聚乙烯吡咯烷酮）的不定型结合物，表面活性剂作为碘的载体和助溶剂，使碘逐渐释放，延长碘的杀菌作用时间。优点：杀菌谱广刺激性小，无腐蚀性，毒性低不易着色性质稳定颜色深浅与杀菌作用成正比，便于判断其有效性。,碘伏用途：0.51.0%的有效碘广泛用于外科擦洗注射前及手术部位皮肤食具、皮肤及物品表面制备碘伏时，大部分碘成为无杀菌作用的复合物，以致成本较高,4.醇类消毒剂乙醇和异丙醇常用，有较强的渗透力，能迅速杀灭各种细菌繁殖体、结核杆菌和亲脂病毒，对亲水病毒和真菌孢子效果较差，不能杀灭芽孢。用途：常用于注射前皮肤消毒6090%浓度杀菌作用最强不宜用于血、粪便及污物的消毒：因醇使蛋白质变形需要水，在凝固蛋白质的同时，也保护了微生物，使醇溶液不能与微生物有效接触,5.醛类消毒剂主要通过凝固蛋白质，还原氨基酸，使蛋白质分子烷基化杀灭细菌。种类：甲醛和戊二醛甲醛可杀灭各种微生物甲醛的缺点：对芽孢需较长时间才有效有毒性强烈的刺激性气味，对眼睛和鼻粘膜有极强的刺激。,戊二醛-属灭菌剂适用范围：不耐热的医疗器械和精密仪器等消毒与灭菌。特别是内镜的消毒与灭菌优点：广谱、高效稳定对金属腐蚀性小受有机物影响小灭菌浓度：2%，作用10h消毒浓度：2%或1%增效戊二醛浸泡1020min,分子结构式：分子式：C5H8O2,缺点：刺激性少数人过敏,6.季胺盐类消毒剂阳离子表面活性剂常用苯扎溴铵（十二烷基二甲基苄基溴化铵C21H38BrN）、苯扎氯铵对G+菌的杀灭作用大于G-菌对亲脂病毒较敏感亲水病毒和抗酸杆菌有较强的抵抗力对芽孢只有抑制作用可用皮肤消毒和粘膜冲洗,季胺盐类消毒剂的特点：对皮肤粘膜无刺激毒性小稳定性好对物品无损害等。极易被多种物体吸附，浸泡液浓度随消毒物品数量增多逐渐降低，应该及时更换不得与肥皂或其它阴离子洗涤剂合用不宜消毒粪、尿、痰等限量：皮肤：2.0%；粘膜：0.35%,7.其他化学消毒剂氯己定是阳离子双缩胍，碱性，常用双醋酸氯己定、葡萄糖酸氯己定。性质稳定无臭、有苦味难溶于水对G+菌的杀灭作用较G-菌强不可用于杀灭芽孢、抗酸杆菌及亲水病毒。,氯己定分子式：C22H30Cl2N10抑菌能力最突出。pH5.58.0具有杀菌活性，偏碱时活性最佳阴离子去污剂、肥皂可与氯己定反应，使其失活受有机物影响明显皮肤、粘膜的消毒：0.20.5%的水溶液手术部位皮肤消毒：0.5%的乙醇溶液限量：皮肤：4.5%；粘膜：0.5%,三氯羟基二苯醚(2,4,4-三氯-2-羟基二苯醚)玉洁新,三氯生,特可新,5-氯-2-(2,4-二氯苯氧基)苯酚非离子表面活性剂对细菌繁殖体良好杀灭作用不受阴离子表面活性剂的影响复配于肥皂、洗发液、沐浴液中，使兼有杀菌作用急性口服毒性：LD50(小鼠口服)=3800mg/kg限量：皮肤：2.0%；粘膜：0.35%,高氧化还原电位酸化水发生器发生器在有隔膜的电解槽中，将含有0.05%氯化钠的自来水电解成高氧化还原电位(1100mV以上)的酸性水(pH2.7)对细菌繁殖体有良好的杀菌作用，可用于医疗卫生消毒优点：无毒性残留物缺点：稳定性较差极易受有机物和金属离子的影响,酸化电位水发生器,理想的化学消毒剂？,广谱、高效、快速对物品无损害或损害小无色、无味、无毒稳定、易贮存有机物对其无影响消毒效果容易监测使用方便，便宜,六、气体消毒剂,使用时为气体状态的消毒剂灭菌气体消毒剂：环氧乙烷、甲醛、臭氧、过氧化氢、过氧乙酸、二氧化氯等上世纪50年代开始大量用于物品的灭菌处理，有关技术发展较快目前使用最多的是环氧乙烷,杀菌力强、杀菌谱广,可杀灭各种微生物穿透力强,能穿透玻璃纸、聚乙烯和聚氯乙烯薄膜，可包装后消毒和灭菌对细菌繁殖体和芽孢的敏感性差异很小对物品损害轻微，适用对电子仪器、光学仪器、医疗器械、内窥镜、透析器和一次性使用的诊疗用品等是目前最主要的低温灭菌方法,环氧乙烷气体消毒剂的特点,环氧乙烷灭菌器,环氧乙烷灭菌器,臭氧：30mg/m3的臭氧，作用15min，对空气中自然菌的杀灭率达到90%以上。,消毒空气：必须在封闭空间、无人条件下进行有毒：大气中允许浓度为0.3mg/m3，室内：0.16mg/m3。消毒至少30min后人才能进入用于手术室，病房，工厂无菌车间等场所的空气消毒,臭氧发生器,只有使用规定剂量的消毒剂才能达到预期杀菌效果。剂量包括作用浓度和作用时间，两者缺一不可。,七、消毒剂应用剂量的确定,(一)浓度的计算按所含主要杀菌成分的浓度为准，不能以商品原药作为100%计算稀释浓度注意在保存期有效成分的下降，特别是稳定性差的次氯酸类和过氧化物类消毒剂，有的3个月内下降10%以上配制不稳定的消毒剂，应用化学滴定法进行监测。,七、消毒剂应用剂量的确定,(二)作用时间消毒剂与被消毒物品接触的时间，不得任意缩短规定的作用时间提高浓度，缩短作用时间的方法是可行的，但必须有一定的试验基础，且应有一定限度时间过短，药物未能进入物品深处与微生物接触，或接触未达必须的时间，均难达到预期效果达到灭菌所需时间远比达到消毒的时间长,七、消毒剂应用剂量的确定,(三)安全系数若将实验室试验测定的杀菌剂量，作为应用剂量，往往会造成消毒或灭菌的失败。实验室的条件是人为固定的，是有利于对比而设计的现场应用时的条件，如温度、有机物、pH、穿透时间等往往变化较大微生物的抗力也可能超过试验菌株实际使用剂量需在实验室试验结果上再加安全系数,七、消毒剂应用剂量的确定,消毒剂的杀菌作用是相对的，并不一定能杀灭所有细菌某种消毒剂能杀灭某种细菌，在达到规定浓度时有效，低于此浓度时只能抑菌，更低时甚至还可能有助于细菌生长配制浓度不准，或使用中有效成分分解等原因，均可能使消毒液的浓度低于杀菌有效浓度。,八、消毒液的污染问题,卫生部规定：消毒的药液：菌落数100cfu/ml，无致病菌检出无菌的消毒液不得有菌避免消毒液染菌量超标一是建立监督检查制度二是勤换消毒液(13d)，更换消毒液时，容器也应进行清洁消毒或灭菌。,曾有的医院使用中的消毒液细菌污染率高达2050%使用次数愈多，存放时间愈长，污染率愈高用于消毒染有血液器材的消毒液，或消毒手的消毒液，污染几率最高。,消毒与灭菌的效果，受多种因素的影响掌握有关规律，采取适当措施，可以保证消毒灭菌的效果反之处理不当则会导致消毒灭菌的失败主要影响因素是：,九、影响消毒与灭菌效果的因素,（一）处理剂量（二）微生物的种类和数量（三）温度（四）湿度（五）酸碱度（六）化学拮抗物质（七）穿透力,九、影响消毒与灭菌效果的因素,（一）处理剂量处理剂量：包括强度和时间强度：热力消毒-温度，化学消毒-药物的浓度。时间：使用的处理方法对被处理物品作用的时间强度越高越易杀灭微生物，醇类例外时间越长越易杀灭微生物,九、影响消毒与灭菌