课题2　月季的花药培养 (4).ppt

,3.2月季的花药培养,花的主要结构：雌蕊和雄蕊,（一）被子植物花粉粒的形成,花丝,花药,1、雄蕊的结构,囊状结构，,内有很多花粉粒,一、基础知识,花粉：由花粉母细胞经减数分裂形成的单倍体生殖细胞,2、被子植物的花粉发育,经历时期：,小孢子四分体时期、单核期、双核期,形成过程：,花粉母细胞（小孢子母细胞）,小孢子四分体,小孢子（单细胞核）,2个精子,（二）产生花粉植株的两种途径,1.产生花粉植株的两条途径,2.产生花粉植株具有两条途径的原因：,花粉,花粉,丛芽,丛芽,移栽,脱分化,诱导,胚状体,愈伤组织,分化,再分化,生根,主要取决于培养基中的种类及其的配比。,激素,浓度,（三）影响花药培养的因素,1.材料的选择,2.培养基的组成,3.温度、光照条件等,亲本植株的生理状况、生长条件花药的发育时期：单核期材料的低温预处理接种密度,二、实验操作,（一）材料的选取,某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。,最常用的方法有醋酸洋红法,1、方法,（二）材料的消毒,1、酒精处理,花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒，立即取出。无菌水清洗无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分,2、消毒液处理,（三）接种和培养,放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）无菌水冲洗35次用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。,在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药,要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成,立即将花药接种于培养基上，通常每瓶接种花药7-10个。,1、剥取花药,勿损伤花药，以免诱导出非花粉愈伤组织,2、接种,注意：,培养条件：温度控制在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。,3、培养,培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株,注意：花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。,在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化（主要原因是营养核和生殖核融合造成的）,4、鉴定和筛选,5、植物组织培养技术与花药培养技术的异同点：,1、月季花药培养时的花粉粒最好是（）A、四分体时期B、单核居中期C、单核靠边期D、二核或三核花粉粒,C,练一练,2、关于花药培养产生花粉植株的途径，下列叙述错误的是()A花粉可通过愈伤组织发育成植株B花粉可通过胚状体进一步分化成植株C主要由培养基中激素的种类及用量决定途径D产生胚状体是花药离体培养中特有的途径,D,3、关于月季的花药培养技术与菊花的组织培养技术的不同，下列说法不正确的是()A花药培养需发育时期适宜的花蕾B花药培养对培养基配方的要求更为严格C培养基配制方法完全不同D花药裂开后长出的愈伤组织或释放的胚状体要及时换培养基,C,4、下面是被子植物花粉发育过程的简略表示，请回答：小孢子母细胞双核期(1)是指_时期，由小孢子母细胞经_分裂形成。(2)和分别是指_期和_期，该期细胞的特点是_。(3)1个花粉母细胞经过分裂最多能形成_个花粉粒，_个细胞核。(4)双核期的两个核分别