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文档简介
.,白细胞计数-Neubauer(牛鲍)板计数法,长治市第二人民医院检验科:薛彬彬,.,.,1、目的:掌握显微镜法白细胞计数的原理及方法。2、原理:用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。,.,3、器材:显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管、吸头等。4、试剂:白细胞稀释液:2%冰乙酸2ml,10g/L结晶紫(或亚甲蓝)3滴,加蒸馏水到100ml。5、标本:新鲜全血或末梢血。,.,改良的牛鲍计数板。,.,.,操作步骤,1、加稀释液:用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。2、吸取血液:用微量吸管吸取新鲜全血或末梢血20ul,擦去管尖外部余血。将吸管插入试管中白细胞稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次。,.,3、混匀:将试管中血液与稀释液混匀,待细胞悬液完全变为棕褐色。4、充池:再次将小试管中的细胞悬液混匀,用微量吸管吸取7ul左右充入改良牛鲍计数板的计数池中,室温静置2-3分钟,待白细胞完全下沉。,.,5、计数:在低倍镜下计数四角4个大方格的白细胞总数。6、计算:WBC=N/41020106=N/20109其中N为4个大方格的白细胞总数。,.,7、细胞计数原则,大方格四边压线细胞数左不数右,数上不数下,弓形移动,.,8、考核评价a.常规考核标准(RCS)RCS=100%评价:白细胞4.0109/L者,RCS30%白细胞在(4.1-14.9)109/L者RCS20%白细胞15.0109/L者RCS15%超过上述标准者为不合格b.其他方法,四大格所见白细胞最大值最小值,四大格所见白细胞数平均值,.,注意事项,(1).稀释液密封保存,防止污染,小试管、计数板、盖片均须清洁,以免杂质、微粒等被误认为细胞。(2).采血时针刺深度必须适当,不能过度挤压,防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。(3).稀释液和采血量要准确,充分混匀,充液适量,无不足、外溢和气泡,细胞分布均匀。,.,(4).白细胞总数在参考范围内,大方格间的细胞数不得相差10个以上,两次重复计数误差不得超过10。(5).白细胞数量过高时,可加大稀释倍数,白细胞数量过低时,可计数8个大方格的白细胞数或取双倍血量。,.,(6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多,会计数在白细胞总数内,应校正。校正公式:白细胞校正数/L=M(100/100+N
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