培养基的灭菌及保存方法_第1页
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文档简介

培养基的灭菌和保存方法培养基的灭菌和保存方法灭菌方法1 1 1,高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适用于高温培养基、接种设备和蒸馏水的杀菌。培养基在爱的准备过程中混合各种杂菌,装扮后必须立即杀菌,至少要在24小时内完成灭菌工作。灭菌时一般在0.105MPa压力下,温度121 灭菌15 30分钟即可。消毒时间不能太长,也不能超过规定的压力范围。否则,机械物质,尤其是维生素在高温下分解,失去营养效果,培养基难以变质、变色或变硬。将蒸馏水或自来水装在三角瓶里,水量通常不超过瓶的2/3,用牛皮纸或硫酸纸包绷带,放在高压锅里杀菌,就成为灭菌水。灭菌后,培养基可以放在培养室预先培养3d,如果没有污染的话,证明灭菌是彻底的,可以使用的。暂时不用的培养基最好保存在10 。包含IAA或GA3的徽章必须在一周内用完,他的徽章最多不能超过一个月。2 2 2 2,过滤杀菌:某些植物生长调节剂和有机物,例如IAA、GA3、ZT、CM等,容易分解热量,不能与培养基一起高温杀菌,使用细菌过滤器过滤其中的杂菌。使用细菌过滤器和过滤膜(光圈0.45微米)之前,必须进行高压杀菌。过滤后的溶液立即放入培养基中,液体培养基冷却到30 时加入。对于固体培养基,要将溶液与其他成分均匀混合,必须在培养基凝固之前添加(50-60)。保存方法保存方法已消毒的培养基一从高压灭菌锅中取出,放在扁平的台面上,安装可大量生产的水果盒,做好选择标记,然后送到接种室自然冷却凝固。消灭的培养基最好经过三维预培养,观察培养基是否完全灭菌。这是一种未完全灭菌的培养基,因此在接种前检测到,可以防止杂细菌污染造成的不必要的损失,成为小而重要的资料。但是在这样的条件下多次使用无污染后,就不再需要放置3d,冷却凝固后可以使用。(1)(1)(1)(1)防尘和除尘均须注意灰尘。卫生状况不良的地方保管,附着在灰尘上的细菌、真菌等掉落在培养瓶表面,使用前表面杀菌,接种时根据气流容易进入容器,污染,组织培养工作顺利进行,因此应将培养基放在清洁卫生的接种室。(2)(2)(2)(2)皮光预备徽章,因为某些物质(例如吲哚乙酸)容易分解,必须存放在光线较低的房子里。(。随着光的变化,部分培养基添加剂的成分也发生了变化。在接种室里,在厚窗帘或徽章的箱子上挂上厚黑布,徽章就能摆脱光线。(3)(3)(3)(3)恒温控制培养基冷却后,可在10左右的冰箱里保存3-5周;大批量生产时,放入装有空调的接种室,放2周左右,温度控制在20以内即可。保持在2 5d的状态下,可以放置在28以下的温度下。但是在徽章放置过程中,温度不能过高,温度变化也不能太大。随着保管室温度的升高或下降,培养基容器内的空气膨胀或收缩,细菌进入培养基,在储藏过程中培养基的污染也受到了极大的担忧。(4)(4)(4)(4)定期更新徽章,特别是固体徽章,不宜长期保存。随着时间的推移,培养基的水分被选定为气体,培养基的水分含量逐渐降低,培养基的浓度和理化特性发生变化,不利于体外移植体培养或植物的继代转移及根系培养。如果将培养基保存得太久,大气中混合的细菌和真菌也可能降落在造成污染的培养基表面。储存含有吲哚乙酸、椰奶等物质的培养基时,环境的光会光解吲哚

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