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文档简介
IVF实验室的基本操作,实验室操作原则,辅助生殖技术基本操作,培养液的准备,培养液的基本组分无机盐离子-维持pH和渗透压碳水化合物-能量来源蛋白质来源抗生素矿物油有利于维持培养液温度、pH值和渗透压稳定防护屏障，减少污染吸收脂溶性毒素防止液体蒸发,培养液的准备 取卵前一日下午进行,原则：高效、方便、安全、经济 四孔培养皿卵处理精液所需培养液微滴培养受精卵、胚胎胚胎移植液,37 ， 5% 或 6%CO2培箱内 平衡过夜,卵母细胞的获取,注射hCG后36-38小时取卵阴道超声探头引导下经阴道穿刺抽吸卵泡核对姓名解剖显微镜下辨认卵冠丘复合物OCCC37, 56%CO2 培养 操作迅速，避光,精液处理,正常精液：同IUI极度少精：增加离心力死精症：低渗肿胀实验附睾穿刺精子：睾丸穿刺或活检精子： 1ml注射器针头挑碎组织，离心悬液附睾、睾丸精子的冷冻,常规受精,适应症：精液正常， 轻度少、弱精症受精率：6580（MII卵）受精时间：长受精、短受精,卵母细胞浆内单精子显微注射,适应症：严重少弱精、梗阻性无精、畸精症、既往IVF常规受精失败史、某些不明原因不孕等时间：取卵后2小时剥卵：利用透明质酸酶（80mIU/ml)和机械法剥除颗粒细胞,卵母细胞浆内单精子显微注射,卵母细胞成熟度的评价,GV,MI,MII,卵母细胞浆内单精子显微注射,操作滴的准备：7PVP 加精装针显微注射 受精率：70,受精方式的选择,ICSI的安全性？ 逃避了自然选择过程 垂直传递遗传缺陷 操作过程对配子的损伤严格掌握ICSI适应症,非男性因素不孕ICSI治疗结局,非男性因素不孕症，ICSI未显现出优势,检查受精,时间：受精后1518小时机械法除去颗粒细胞及放射冠正常受精：两个原核，两个极体,合子形态评价,原核的大小、位置及方向核仁前体的数目、大小、分布胞浆的外观早期卵裂情况,异常受精1PN,发生率 15 卵裂率 74% 染色体二倍体率 5 囊胚形成率 29% (Noyes 2008)机制： 雌雄原核发育不同步 雌雄原核融合 孤雌来源 ICSI多见,异常受精多PN,发生率：IVF 5-8% ICSI 1%发生机制： 2精子进入 第2极体滞留 双倍体卵母细胞,未见原核未受精,可能机制 卵母细胞未成熟 卵母细胞染色体异常卵裂率 10% 染色体二倍体率 3% 优胚率低 (12/38) 囊胚形成 (0/12) (Noyes 2008),受精失败,受精率50%卵裂球完整 存活 复苏率90%无损伤胚胎着床率高 部分损伤胚胎着床能力下降,玻璃化冷冻,原理条件：高浓度冷冻保护剂 极快的降温速度载体：开放式 密闭式适应症：卵母细胞 囊胚优点：复苏率高,其他技术-IVM,未成熟卵母细胞体外成熟（IVM）优点：简便 经济 避免OHSS体
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