实验四--细菌细胞的特殊染色模板PPT课件

.,1,球菌(coccus),四联球菌(tetrad),.,2,球菌(coccus),葡萄球菌(streptococcus),.,3,球菌(coccus),八叠球菌(sarcina),.,4,杆菌(bacillus),不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。,.,5,螺形菌(spiralbacterium),.,6,实验六细菌的特殊染色（芽孢、鞭毛）,.,7,.,8,.,9,.,10,单毛菌,双毛菌,丛毛菌,周毛菌,.,11,一实验目的,掌握细菌的芽孢、鞭毛染色原理及方法；辨认细菌鞭毛和孢子的形态；巩固无菌操作技术。,.,12,二实验原理,芽孢染色由于芽孢壁厚、透性低、不易着色，应当用石碳酸复红、结晶紫等进行染色菌体和芽孢囊着色，而芽孢囊内的芽孢不着色或仅显很淡的颜色，游离的芽孢呈淡红色或浅蓝紫色的圆或椭圆形的圈。用着色强的染色剂孔雀绿或石碳酸复红，在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的燃料经水洗后被染色，而芽孢一经染色难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体便于区分。鞭毛染色在染色前用媒染剂进行处理，使它沉积在鞭毛上，使鞭毛的直径加粗，然后在进行染色。,.,13,三实验器材,1.活材料：培养2天的枯草芽孢杆菌，培养18-30小时的大肠杆菌和变形杆菌；2.染色液和试剂：Tyler法染色液：复红染色液、香柏油、二甲苯、蒸馏水、5%孔雀绿水溶液、0.05%碱性复红、0.1%美蓝染色液等；3.器材：载玻片、擦镜纸、显微镜、接种环、载玻片、吸水纸、试管、小滴管、酒精灯、镊子等,.,14,四实验方法步骤,（一）芽孢染色Schaeffer与Fulton氏染色法（1）涂片：按常规方法将待检细菌制成一薄的涂片。（2）晾干固定：待涂片晾干后在酒精灯火焰上通过23次。（3）染色：加染色液：加5%孔雀绿水溶液于涂片处（染料以铺满涂片为度），然后将涂片放在铜板上，用酒精灯火焰加热至染液冒蒸汽时开始计算时间，约维持15-20min。加热过程中要随时添加染色液，切勿让标本干涸。（加热时温度不能太高）。水洗：待玻片冷却后，用水轻轻地冲洗，直至流出的水中无染色液为止。复染：用蕃红液染色5min。（4）水洗、晾干或吸干。（5）镜检：先低倍，再高倍，最后在油镜下观察芽胞和菌体的形态。结果：芽胞呈绿色，菌体为红色。,注意事项：染色加热过程要及时补充染液，切勿让涂片干涸。,.,15,.,16,（二）鞭毛染色硝酸银染色法,（1）清洗玻片（2）菌液的制备及制片（3）染色滴加A液，染46min。用蒸馏水充分洗净A液。用B液冲去残水，再加B液于玻片上，在酒精灯火焰上加热至冒气，约维持0.51min（加热时应随时补充蒸发掉的染料，不可使玻片出现干涸区）。用蒸馏水洗，自然干燥。（4）镜检：先低倍，再高倍，最后用油镜检查。结果：菌体呈深褐色，鞭毛呈浅褐色。,.,17,.,18,（三）运动性的观察,1制片：在干净的载玻片上滴一滴生理盐水，取一环菌液与之混合，加0.01%美蓝与之混合均匀，盖上盖玻片；2镜检：先用低倍镜找到目标，在用高背镜观察，可用油镜观察，但注意盖玻片的厚度。结果：有鞭毛菌做直线、波浪式或翻跟斗运动。,.,19,五实验报告及作业,一）结果1绘出所用材料的