急性毒性及其评价方法

。急性毒性测试其评价方法，急性毒性、首先，急性毒性的概念，急性毒性是指人体(人或实验动物)在一个或24小时内多次接触外来化学品后，在短时间内产生的毒性效应。包括外观变化、一般形态变化、行为方式和死亡效应。最重要的观察指标是LD50，实验动物以不同的方式接触化学物质。通过口腔和注射，“一次”的含义也不同。“一次”是指通过呼吸道和皮肤接触将受试化学品瞬间引入实验动物体内。“一次”是指实验动物在特定时期内与被测化学品的连续接触过程。二、急性毒性试验的目的，1。测试并找出被测化学品的致死剂量(通常以LD50为主要参数)，对外源化学品进行急性毒性分类2。通过观察动物的毒性效应表现、毒性效应强度和死亡，初步评价该毒物的毒性效应特征、靶器官、剂量-反应关系和对人体的损害风险，3.为亚慢性和慢性毒性试验研究及其他毒理学试验选择暴露剂量和观察指标提供依据。为毒性机制研究提供线索，了解毒性效应的特征(包括症状、生理、生化和组织病理学损害)。5.研究急性化学中毒的诊断、预防和应急处理措施。3.急性毒性试验方法要点。(1)选择实验动物的原则：尽量选择具有与人类相似的急性毒性反应的动物，这些动物易于饲养，易于操作，繁殖力强，繁殖力强，数量大，能保证较低的供应价格，容易获得。常用的实验动物有大鼠和小鼠。性别，急性毒性试验中使用的动物应为雌性和雄性。如果研究发现待测化学品对雌性和雄性动物的毒性明显不同，则应分别获得雌性和雄性动物的LD50值。如果试验是为了准备致畸试验的剂量，也可以只对雌性动物进行LD50试验。当用不同方法测定化学品的LD50值时，应确定实验动物的分组和数量。实验设计中对动物数量的要求是不同的。霍恩法测定LD50需要4个剂量组，改良考克斯法、概率单位法和布利斯法测定每组4或5只动物需要5-7个剂量组。对于不同化学物质的测定，应根据相应的试验程序确定实验动物的数量。动物分组的原则是：平衡和随机，平衡：每组动物的平均体重和体重分布应尽可能一致。具体来说：(1)实验动物的体重不应超过所有实验动物平均体重的10%-控制分散度(2)每组之间的平均体重差不应超过5%-控制均衡的随机性：每只动物有均等的机会分散到每组，以避免偏见或系统误差。实验动物的预处理，适应性喂养一周，当选择生理健康的动物进行口服暴露时，要求在试验前禁食动物，以确保胃中没有食物，并减少食物对化学毒性的干扰。老鼠一夜之间吃了；暴露后禁食4h大动物每天早晨在喂食前继续禁食24h，但禁食期间应保证饮水，(2)受试对象及其处理、受试对象的验收、取样、储存、称重、制备以及在此过程中严格的质量保证影响受试对象急性毒性试验的剂型：水溶液、悬浮液、油溶液，(3)暴露方法，1。口服(胃肠)暴露：(1)洗胃：禁食洗胃后2-3小时再灌胃的量不超过体重的1-2%，0.2-1.0毫升/小鼠或0.1-0.5毫升/10克更适合于5毫升/大鼠(通常为0.5-1.0毫升/100克)，10毫升/2公斤体重兔，50毫升/10公斤狗，由洗胃设备制成。取l2普通注射针，先取下针尖，然后用细锉刀锉平洗胃的操作方法，首先固定动物，即右手抬起老鼠的尾巴，放在鼠笼或粗糙的平面上，当老鼠向前挣扎时，用左手的拇指和食指按住老鼠两耳后的颈背皮肤，转动老鼠的手掌，伸直后腿，用小指压住老鼠的尾巴。在固定老鼠的过程中，不要用力过大，也不要抓住它的脖子，以免窒息而死。用洗胃器轻轻按压头部，使口腔与食道对齐，然后将洗胃针沿上腭壁轻轻插入食道，当洗胃针进入约3厘米时，洗胃针到达胃。当它与呼吸道接触时，有可能通过呼吸道吸入，在正常温度和压力下是气态的，或者在生产和生活过程中用蒸汽、气溶胶、烟雾和灰尘污染生产和生活环境中的空气。吸入接触可分为两种模式：静态吸入和动态吸入，3.皮肤接触。应尽可能选择皮肤解剖和生理与人类相似的动物来研究外来化学物质的吸收。目前主要选择兔子和豚鼠。然而，由于需要大量的实验动物来研究通过皮肤吸收的化学物质的毒性(用于经皮LD50)，使用兔子和豚鼠是不经济的，并且经常使用大鼠来代替。4。注射暴露、(4)试验程序：1。首先，查阅文献，了解和分析被测化学品的化学结构和物理化学性质。在此基础上，查阅文献，找出与受试化学品的化学结构和物理化学性质相似的化学品的毒性数据，并使用文献中相同动物物种和相同接触途径测得的LD50(LC50)值作为受试化学品的预期毒性中值。预试验，以预期毒性中值作为待测化学品的中间剂量组，分别上下推动1-2个剂量组进行预试验(各剂量组之间的组距可以更大，有助于找出待测化学品的致死剂量范围)。根据确定的剂量组进行中毒，并根据预试验的死亡数据，确定组距，按下式计算剂量组：I=(lgld90-lgld10)/(n-1)或I=(lgld100-lgld0)/(n-1)，其中I为组距，N为设计剂量组数。对于正式测试，一般来说，组的数量是根据为测试设计选择的LD50计算方法来确定的。例如，改进的考克斯方法通常包括5-7个剂量组；霍恩方法固定四个剂量组。获得I后，将最低剂量组(LD0或LD10)的对数剂量加上I值，即第二剂量组的对数剂量，依此类推，直至最高剂量组，并检查他们的异议，以获得每个剂量的真实值。123456 LGLD 0 LGLD 0 IL GLD 0 2 IL GLD 0 3 IL GLD 0 4I，4。症状观察：(1)通过观察时间和周期测定外源化学物质的LD50值(LC50)。一般来说，需要计算暴露于化学物质后两周(14天)内实验动物的死亡总数。对于一些速死化学品，LD50(LC50)只能计算24小时(对于一些速死化学品，24小时LD50值和两周LD50值之间通常没有差别)。LD50值在什么时候应该指出，以便有一个共同的基础进行毒性比较，(2)观察中毒症状和发生过程，许多化学品是在接触实验动物的初始阶段兴奋。一些化学物质在与动物接触的最初阶段被抑制。(3)死亡情况和时间分布：计算LD50，重点观察和记录每只动物的死亡时间，尤其是最早的死亡时间和每组动物的死亡数。分析中毒死亡时间的规律具有一定的意义，可以为深入研究化学品的毒性机理提供参考。(4)体重：体重能反映动物中毒后的整体变化。体重变化有很多原因。如果化学毒物刺激或损害消化道，实验动物的饮食可能减少甚至拒绝进食，这表现为体重减轻。如果化学毒物引起腹泻，将影响食物的吸收和利用，并减轻体重。如果化学毒物a(5)病理检查及其他指标观察。所有中毒和死亡的动物应及时解剖进行病理检查，以检查器官是否充血、出血、水肿或其他变化。应对改变的器官进行病理检查。观察期结束后，应对存活动物进行病理检查。某些生化指标可根据试验要求确