7版病毒诊防治VIP

第25章病毒感染的检查方法与防治原则,第一节病毒感染的检查方法virologicaldiagnosis一、标本的采取与送检：基本与细菌同，只是标本可加“双抗”处理另外就是低温送检；血清最好是早晚期双份二、病毒的分离培养与鉴定：一）病毒的分离培养：需提供活细胞,提供活细胞的三种方式:（一）动物接种（animalinoculation）（二）鸡胚培养（embryonatedeggs）绒毛尿囊膜接种尿囊腔接种羊膜腔接种卵黄囊接种,（三）细胞培养（tissueculture）#原代和次代细胞培养#二倍体细胞株#传代细胞系大多由癌细胞或二倍体细胞突变而成。如HEP-2、HeLa和KB细胞。病毒在细胞内增殖的检测指标*细胞变化：CPE、包涵体(inclusionbody)形成、红细胞吸附等,细胞病变(Cytopathiceffect,CPE),正常细胞,病变细胞,病毒在细胞内增殖的指标,细胞团缩、裂解、肿胀、变圆细胞融合或聚集成葡萄串样等,组织培养瓶与pH变化,*细胞代谢的改变:,*细胞代谢的改变:pH值*干扰现象：*免疫荧光法检测二）病毒数量与感染性的测定*空斑测定：PFU感染性病毒量：以PFU/ml表示*TCID50或ID50的测定：*红细胞凝集实验：,三）新分离病毒的鉴定1、核酸类型的测定2、理化性状的检测3、形态学观察4、血清学鉴定5、基因测序和生物对比（sequencingandblast）:这是最准确的方法,三、病毒感染的血清学诊断1、中和试验（neutralizationtest）2、补体结合试验（complementfixationtest）3、血凝抑制试验（hemagglutinationinhibitiontest）4、凝胶免疫扩散试验,四、病毒感染的快速诊断1.形态学检查：EM或IEM，107/ml2.病毒蛋白抗原检查：IF，RIA，EIA3.特异性IgM抗体的检查：4.检测病毒核酸：PCR或LCR,第二节病毒感染的特异性预防preventionagainstviralinfection一、人工主动免疫(activeimmunization)主要是疫苗（vaccine）一代：死疫苗、减毒活疫苗、新型活疫苗二代：亚单位疫苗（基因工程、合成）三代：DNA疫苗其他：转基因植物、治疗性疫苗等,二、人工被动免疫(passiveimmunization)1.免疫球蛋白(gammaglobulin)血清/胎盘，HBIg2.干扰素、淋巴因子等细胞免疫制剂,国家免疫规划疫苗:2008年2月乙肝疫苗、卡介苗、脊灰疫苗、百白破疫苗、麻疹疫苗、白破疫苗（以前）甲肝疫苗、流脑疫苗、乙脑疫苗、麻风腮疫苗（08）重点人群和地区：出血热疫苗、炭疽疫苗、钩体疫苗预防的传染病15种:乙肝、结核、脊灰、百日咳、白喉、破伤风、麻疹、甲肝、流脑、乙脑、风疹、腮腺炎、出血热、炭疽、钩体,第三节病毒感染的治疗therapyforviralinfection一、化学制剂：始于1959年1.核苷类：阿昔洛韦、拉米呋定、病毒唑（利巴韦林）等2.非核苷类：种类少，如Nevirapine3.蛋白酶抑制剂：赛科纳瓦、英迪纳瓦等4