车间空气、设备、设施和人员微生物检测方法VIP

车间空气、设备、设施和人员微生物检测方法1、 目的：检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，达到规定的卫生标准，以控制食品成品的质量。2、 参照标准：中华人民共和国国家标准一次性使用卫生用品卫生标准GB159792002中华人民共和国国家标准公共场所卫生检验方法 第三部分：空气微生物GB/T 18204.320133、采样与检测方法：培养基和检测用具的准备：生理盐水（10ml一管，9ml两管）培养基：营养琼脂、乳糖胆盐发酵培养基用具：棉签、平皿（直径90mm），小试管、无菌取样袋，吸管（1ml、10ml）.剪刀、消毒棉球、酒精灯3.1空气的采样与测试方法3.1.1样品采集：(1)取样频率：a)正常生产状态的采样，每周一次。b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。（2）采样方法室内面积不超过50 m2的设置3个采样点，50 m2以上的设置5个采样点。采样点安均匀布点原则布置，室内3个采样点的设置在室内对角线四等分的3个等分点上，5个采样点的按梅花布点。采样点距离地面高度1.21.5m，距离墙壁不少于1m。采样点应避开通风口、通风道等。采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样点(约桌面高度)，打开平皿盖，使平板在空气中暴露15 min。采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h，若样品保存于04条件时，送检时间不得超过24h。3.1.2菌落培养：（2）将已采集样品的培养基在6 h内送实验室，并做空白对照，细菌总数于371培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。（3）菌落计算：a) 记录平均菌落数，用“个/皿”来报告结果。用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用510倍放大镜检查，不可遗漏。空气细菌落菌数（cfu/m3）=50000*N/AT式中： A平板面积，cm2； T平板暴露时间，min； N平均菌落数，cfu/平皿。 50000-系数有个前提条件是5分钟在100CM2面积上沉降的细菌数相当于10L空气所含的细菌数,用直径90mm的平板，暴露5min，最终结果是平板平均菌落数乘以157空气的沉降菌指标与平皿的大小和沉降的时间有关目前食品行业经常引用的标准是GB15979-2002一次性使用卫生用品卫生标准，其规定生产环境卫生指标指标为 a)装配与包装车间空气中细菌菌落总数应2500cfu/m3b)工作台表面细菌菌落总数应20 cfu/cm2,c)工人手表面细菌菌落总数应300 cfu/只手，并不得检出致病菌。3.2工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法：3.2.1样品采集：(1)取样频率：a)正常生产状态的采样，每周一次。b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。（2） 采样方法： a) 工作台（机械器具）：用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面（取与食品直接接触或有一定影响的表面）取25cm2 的面积，在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。b) 工人手：被检人五指并拢，用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。（3）采样注意事项：擦拭时棉签要随时转动，保证擦拭的准确性。对每个擦拭点应详细记录所在分场的具体位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间3.2.2 细菌大肠菌群的检测培养:样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇。此液为1：10稀释液。如污染严重，可十倍递增稀释，吸取1ml 1：10样液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1：100稀释液。 3.2.2.1 细菌总数：（1）以无菌操作，选择12个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿（平行样），将已融化冷至45左右的