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文档简介
.,1,第六节植物体内的次生代谢产物,.,2,次级代谢产物合成的主要途径及其与初级代谢产物的联系,.,3,第一节初级代谢和次级代谢,糖类、脂肪、核酸和蛋白质等是光合作用的直接产物,称为初级代谢产物(primarymetabolites)。植物体中还有许多其他有机物,如萜类、酚类和生物碱等,它们是由糖类等有机物次级代谢衍生出来的物质,因此称为次生代谢产物(secondarymetabolites)。,.,4,次级产物贮存在液泡或细胞壁中,是代谢的最终产物,除了极少数外,大部分不再参加代谢活动次级产物可以分为三类:萜类、酚类和含氮次级化合物,.,5,第二节萜类,一萜类的种类萜类(terpene)是以异戊二烯为单位组成的。,萜类的种类根据异戊二烯的数目而定,有单萜、倍半萜、双萜、三萜、四萜和多萜之分。萜类化合物的结构有链状的,也有环状的。,.,6,.,7,桂叶烯(单萜),棉酚(倍半萜二聚物),.,8,二萜类生物合成,.,9,三、萜类的功能1.影响植物的生长发育如赤霉素,胡萝卜素2.防止哺乳动物和昆虫对植物的吞食。如拟除虫菊酯、桂叶烯、棉酚和冷杉酸3.药用和工业原料如红豆杉醇和橡胶,.,10,第三节酚类(phenol),酚类(phenol)是芳香族环上的氢原子被羟基或功能衍生物取代后生成的化合物,种类繁多,是重要的次级产物之一。,苯酚,.,11,一、酚类化合物的种类,.,12,肉桂酸简单苯丙酸类化合物(具苯环-C3的基本骨架),伞形酮苯丙酸内酯类化合物(具苯环-C3的基本骨架,但C3与苯环通过氧环化),没食子酸苯甲酸衍生物类(具苯环-C1的基本骨架),二、简单酚类,.,13,简单苯丙酸类、苯丙酸内酯和苯甲酸衍生物属于简单酚类。它们广泛分布于维管植物。其中许多在植物防御食草昆虫和真菌侵袭中起重要功能。,.,14,姜酚,.,15,咖啡豆绿原酸,.,16,丁香R=H对丙烯基酚R=OCH3丁子香酚,.,17,桂皮肉桂醛,.,18,木质素(lignin)在植物体中的数量很大,仅次于纤维素,是植物体中的重要组成物质。是简单酚类的醇衍生物(香豆醇、松柏醇、芥子醇、5-羟基阿魏醇)的聚合物,木质素的成分因植物种类不同而有差异。,三、木质素,.,19,木质素是构成植物细胞壁的成分之一,具有使细胞相连的作用。在植物组织中具有增强细胞壁及黏合纤维的作用。其组成与性质比较复杂,并具有极强的活性。不能被动物所消化,在土壤中能转化成腐殖质。,.,20,四、类黄酮类类黄酮类是植物酚类化合物中的另一大类物质。是两个芳香环被三碳桥连起来的15碳化合物,其结构来自两个不同的生物合成途径。类黄酮类可分为四种:花色素苷、黄酮、黄酮醇和异黄酮。不同的类黄酮具有不同功能。主要为呈现颜色、防御伤害。,.,21,花葵素花青素花翠素橙红紫红蓝紫,天竺葵玫瑰飞燕草,花色素苷在C环部位3有糖,是葡糖苷;如果没有糖,则称为花色素,.,22,黄酮醇(植物中抗UV-B的保护剂),.,23,五、鞣质(tannin单宁)鞣质可分为两类:缩合鞣质和可水解鞣质,具有防御功能。,鞣质有毒,草食动物吃后明显抑制生长。鞣质在口腔中与蛋白质结合,有涩味。一些牲畜不愿吃鞣质含量高的植物,因为鞣质与肠中的蛋白质结合会形成不易消化的蛋白质鞣质复合物。树干心材的鞣质丰富,能防止真菌和细菌引起的心材腐败。,.,24,第四节次级含氮化合物大多数次级含氮化合物是从普通的氨基酸合成的。主要的含氮次级产物有生物碱、含氰苷、芥子油苷和非蛋白氨基酸等,它们都具有防御功能。,.,25,生物碱(alkaloid)是一类含氮杂环化合物,其碱性来源于含氮的环。生物碱中有些是核酸的组成部分,也有些是维生素的组成成分。生物碱对动物往往有毒性,所以也有防御敌害的作用。生物碱是许多重要药物的有效成分。,一、生物碱,.,26,.,27,二、含氰苷,含氰苷广泛分布于植物界,无毒性。含氰苷存在于植物表皮细胞的液泡中,分解含氰苷的酶存在于叶肉细胞中。当叶片破碎后,含氰苷与酶接触,在酶的作用下释放出有毒的氰化氢。,.,28,第五节次级代谢物的生物技术应用,一、花色改良育种(1997年)二、改良农作物品质及提高抗逆性金色大米三、药用植物的快速繁殖1.简介2.细胞培养3.发根农杆菌诱导毛状根产生。,.,29,黄金大米,又名“金色大米”,是一种转基因大米,通过转基因技术将胡萝卜素转化酶系统转入到大米胚乳中可获得外表为金黄色的转基因大米,被称为“黄金大米”。,.,30,黄金大米富含胡萝卜素,不含维生素A,由美国先正达公司研发。其不同于正常大米的主要功能为帮助人体增加维生素A吸收。因为色泽发黄,该大米品种被称为“黄金大米”。质疑者认为黄金大米可能会严重威胁到环境和粮食安全,它也并不能解决造成维生素A缺乏症的根本原因贫困和缺乏多样化的饮食。2013年11月5日,国际研究机构和菲律宾政府官员表示供上市销售的转基因“黄金大米”可能数年内获准在菲律宾生产。,.,31,5.1药用植物的快速繁殖简介,(一).植物天然产物的数量大约是微生物数量的4倍中国:现有的12807种中药材中,药用植物达11,146种,占87%美国:尽管化学合成药物占主导地位,但25%的药物来源于植物提取,1981-2006年,美国新上市的新分子实体(newmolecularentity)为活性成分的全创新药共1184个,其中小分子占绝大多数,共974个,这些小分子中超过1/3是直接从天然物纯化而来,24%是从天然物结构改良而来,即使是占总体1/3的全合成药物中,几乎所有化合物都借助了天然物的的部分活性结构,”由人工构思而合成”的只有1个.,.,32,美国FDA:2000年初稿,2004年6月定稿植物药指导原则,鼓励从植物混合物中开发新药2006年批准Veregen作为植物新处方药在美国上市.欧洲药物管理局EMA:2004年发布草药传统草药质量标准指南中国植物药:地奥心血康2012年首次以药品进入欧洲市场,在荷兰成功注册上市!,.,33,我国生物制药行业现状,规模小、集中度低、增速快“十一五”期间(2006-2010),中国生物制药行业规模增长272%,目前已经达到年销售超千亿元的水平绝对数量上,这一行业规模仍然较小:仅美国生化公司安进(Amgen)一家2010年销售就达到150亿美元,接近中国生物制药全行业的销售额但在相对增速上,全行业销售年复合增长率22.16%,几乎是同期中国GDP增速的两倍,.,34,*已经濒临灭绝的重点品种,冬虫夏草Cordycepssinensis胡黄连Picrorhizascrophulariiflora雪莲Saussureainvolucrata石斛Dendrobiumspp.千层塔Lycopodiumserratum玫瑰红景天Rhodiolarosea重楼Parisspp鬼臼Sinopodophyllumhexandrum八角莲Dysosmaspp.红大戟Knoxiavalerianoides山慈菇Cremastraappendiculata珠子参Panaxjaponicus蜘蛛香Valerianajatamansi(心叶缬草)藜芦Veratrumspp.细柱刺五加Acanthopanaxgracilistylus手参Gymnadeniaconopsea金铁锁Psammosilenetunicoides黑草Buchneracruciata小红参Rubiayunnanensis青天葵Nerviliaspp.等20种常用中草药。,.,35,*重点关注的种类,产销量中等,目前仍旧来自于野生的品种,.,36,.,37,.,38,上述需要重点关注的品种有56种,为什么关注?(1)10年来采收强度过大,生境下再生困难或者再生年限长.(2)采集过程中老幼兼采、不适时采集等野生资源利用的问题(3)栽培技术研究不足、尚不成熟,或者栽培还存在一定的困难、栽培规模尚小、栽培品品质不佳等栽培方面的问题。已经出现产销量锐减,价格飙升,如不重点关注,必然形成越贵越挖,越挖越少的恶性循环,利用的断档也即将出现,从而对于中药产业带来困难和危机。,.,39,人工条件下进行,质量控制,标准化设备简单,能节省人力、物力生长控制和代谢过程合理调节,降低成本提高产率解决耕地、森林问题,解决环境、生态问题不受季节、地区限制和土壤和有害微生物的影响,1.生物技术生产替代品的优势,(二).细胞、组织与器官培养的特点,.,40,道地药材,产地不同,主要成分差异:青蒿素质量分数,.,41,植物细胞培养与完整植物生产紫草宁的比较,.,42,金铁锁原植物与培养物总皂苷含量的比较,液体培养35d的毛状根中总皂苷含量达到0.857%(干重),而原植物和愈伤组织中分别是0.217%和0.388%(干重),金铁锁毛状根中总皂苷含量分别是原植物的3.94倍和愈伤组织的2.2倍,.,43,愈伤培养物如西洋参、紫草、天山雪莲等细胞培养物如人参、红豆杉、长春花、红豆杉离体器官培养如人参、黄芪毛状根等原球茎培养物如石斛,药用植物培养物的产品类型,.,44,愈伤规模化培养生产新资源食品或天然活性成分,外植体,愈伤组织,.,45,雪莲是比较成功的案例,图1.雪莲培养物与人工栽培区别,.,46,图2.雪莲培养物与植株成分比较,.,47,(三)毛状根简介,植物被发根农杆菌感染后,在伤口处就会形成不定根,不定根除菌后能迅速生长,并产生多个分枝,呈毛发状,该不定根又被称为毛状根。,因为它将发根农杆菌含有的Ri质粒中的T-DNA(T-DNA区含有植物生长素合成的基因,能使寄主细胞无限繁殖)片段整合到植物细胞的DNA上,就可以诱导出毛状根,从而建立起毛状根培养系统。,.,48,3.1.毛状根的工业化生产概况,利用生物技术制备毛状根并进行规模化培养,是未来解决药用植物资源的重要途径之一。毛状根属于器官水平,其培养技术是植物细胞工程领域的最高阶段。,.,49,毛状根生产的次生代谢产物:,有生物碱类(如吲哚生物碱、喹啉生物碱、莨菪烷生物碱、喹嗪烷生物碱等)甙类(如人参皂甙、甜菜甙等)黄酮类、醌类(如紫草宁等)多糖类、蛋白质(如天花粉蛋白等)一些重要的生物酶(如超氧化物歧化酶)。,.,50,通过环境因子的调控提高毛状根的生产速度和有效成分含量,通过诱导和选育建立高产的毛状根株系,毛状根技术与其他基因重组技术联合使用,提高毛状根的生产能力,.,51,毛状根技术VS愈伤组织和细胞悬浮培养优点:生长速度快有许多分枝和根毛;激素自养性直接用于食品药品加工;分化程度高细胞分化而来,有遗传稳定;有效成分多借助基因工程,增加次生物含量;大量培养易向培养液释放代谢物。,3.2毛状根的特点,.,52,3.3毛状根再生植株,缩短良种繁育时间,毛状根再生植株与天然或栽培植株相比,一般具有叶片皱缩、节间缩短、植株矮化、须根发达等特点;主要的药效成分含量高于天然的;由于毛状根生长迅速,将其根尖切下,便可繁殖出大量的无性繁殖再生植株,大大缩短了药用植物的栽培周期。,.,53,3.4存在的困难与解决方法,第一个困难是由于许多单子叶植物和部分裸子叶植物对发根农杆菌不敏感,还不能诱导出毛状根。第二个困难是部分植物的毛状根有效成分含量较低或不含有效成分。第三个困难是有些发根生长不太快,有些难以维持正常的形态,常出现脱分化形成愈伤组织或分化出幼苗、胚状体等现象,致使生产能力下降、培养失败。,.,54,3.5.毛状根培养的生物安全性,除了与生长素合成、冠瘿碱合成相关外,无其他外源基因插入。前者是植物细胞本身能合成的激素,含量低;后者起到指示剂作用。因此,毛状根是安全的。外源激素,.,55,3.6.利用毛状根获得天然活性物质的例子3.6.1人参3.6.2柴胡,.,56,A,Ginsengadventitiousrootsin1-tonbioreactors,.,57,商业化生产人参根:35-40吨(FW)/年11g/L(DW)(50d),10-ton,3-ton,1-ton,.,58,Harvest,.,59,.,60,CBNBIOTECH,Subs
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