第九章-血脂及血浆脂蛋白检验PPT课件

. 1、第9章血脂和血浆脂蛋白检测，2、脂质：是生物体内不溶于水或溶于水、溶于非极性有机溶剂的大类物质的总称，含有脂肪和脂质。 脂肪(fat ) :三酰甘油(triacylglyCErols，TAG )又称甘油三酯(triglyceride，TG )，脂肪(lipoid ) :胆固醇TC胆固醇酯ce磷脂PL糖脂，第一节概述，3，脂肪的消化和吸收1 受营养状况及活动量等影响易变动的可变脂肪2，脂肪：占体重5%，分布于各组织及器官，含量一定，称为一定脂肪及基本脂肪，4，5，血脂：血浆中所含脂肪的总称，主要包括甘油三酯、磷脂、胆固醇、胆固醇酯、游离脂肪酸等。 体内合成的脂质、血脂来源和去路：食物脂质消化吸收、脂库释放、一、血脂和血浆脂蛋白、进入、氧化供应能力、脂库贮藏，构成生物膜，转化为其他物质6、血浆脂蛋白：由脂质和脂蛋白组成的颗粒是脂质在血浆中的存在和运输形式(1) 血浆脂蛋白的分类和命名：CM，前，血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳图谱，(1)电泳分类法：脂蛋白，前脂蛋白，脂蛋白和乳糜微粒可以分离.7 .按密度的顺序：乳糜微粒(CM )，极低密度脂蛋白低密度脂蛋白(LDL )、高密度脂蛋白(HDL )、 密度血浆脂蛋白的分类、颗粒、(2)离心分类、电泳法和离心分离法分离的脂蛋白的对应关系，脂蛋白相当于HDL，前脂蛋白相当于VLDL，脂蛋白相当于LDL，8、(1)脂质：甘油三酯、磷脂、胆固醇(二)、血浆脂蛋白的脂质和脂蛋白的组成，(二)脂蛋白(apo ) :指血浆脂蛋白中的蛋白质成分，分为apoA、apoB、apoC、apoD、apoE，其主要功能是脂质的结合和转运，另外还有脂蛋白及其特殊功能。 9、载脂蛋白结构，10、9.1脂质概述，血浆载脂蛋白结构，11，血浆载脂蛋白特征，12脂质与稳定载脂蛋白结合和转运结构发挥主要作用调节载脂蛋白代谢的酶(如LPL、LCAT、HL ) 活性LCAT :卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(血浆中)参与脂蛋白受体识别的例如HDL受体、LDLR或ApoB/E受体、清道夫受体、ApoE受体(即LRP:LDL受体相关蛋白)、脂蛋白又称高脂蛋白血症，临床上空腹血浆中的一些LP含量明显称为高脂蛋白血症。 14、继发性高脂蛋白血症：指某一原发在病理演化过程中引起脂蛋白代谢障碍，继发的高脂蛋白血症。 例如糖尿病、肾病综合征、甲状腺功能低下症等。 原发性高脂蛋白血症：排除继发性高脂血症后，可诊断为原发性高脂血症。 已知原发性高脂血症的一部分是由先天性基因缺陷引起的。 高脂蛋白血症的分类，病因分类，15，15，15，高脂蛋白血症的路易斯分类(1976年)，16，高脂蛋白血症的WHO分类，17，脂蛋白血症的分类和特征，18，I型高脂蛋白血症，TG上升，TC正常，CM，VLDL含量上升，LDL和HL含量上升也称高CM血症原因： LDL活性降低CM中的TG不能水解成CM残粒，LDL受体认为不能代谢，19，iia型高脂蛋白血症，血清TG，b，LDL和TC含量明显高，电泳发现浓厚的脂蛋白带，是高脂蛋白血症的原因、20、b型高脂蛋白血症，Tc和TG增高，LDL和VLDl电泳时，除高脂蛋白带外，还有前脂蛋白带，但两者不融合，导致混合型高脂血症： LDL受体正常，但VLDl合成旺盛，b合成旺盛血液中积蓄了VLDL。21，型高脂蛋白血症，表现： TC和TG增高，电泳发现宽-脂蛋白带，(-脂蛋白带和前-脂蛋白带融合)，也称高-VLDL血症的原因：少见的遗传病，患者年轻时可能发生冠心病型高脂蛋白血症，表现：高TG，LDL正常，HDL下降，又称高TG血症的原因：病因尚未明确的显性遗传疾病，VLDL合成亢进，VLDL代谢速度慢，23，型高脂蛋白血症，TG高，CM和VLDL高，电泳高CM和高原因： LPL活性降低，TG不能分解，VLDL过量生成，引起血液沉积。 24、高载脂蛋白血症的WHO分类，25、动脉粥样硬化(AS )概述，AS是伴有动脉内膜脂质、血液成分堆积和纤维蛋白增殖、钙化、坏死和炎症病变的慢性进行性病理过程。 目前人类第一发病率较高，但其发病机制尚不完全清楚，共同观点是血脂变化、纤溶系统亢进、高血压与血管内膜炎症是AS的重要病因26、脂蛋白代谢与AS的关系血脂与AS的关系(1) 血脂异常升高是产生AS的重要因素，(2)血管内皮炎、氧化型LDL堆积在血管内膜，产生泡沫细胞是形成AS的主要原因，(3)高脂血症导致血粘度的变化，进而改变凝血系统和纤溶系统各种因子的表达和功能，促进血栓的形成， 可以加快AS的形成和发展，27、目前AS研究的新观点是： (1)脂蛋白氧化oxLDL的形成是炎症分子的强有力衍生物；(2)血栓素与前列腺素平衡异常血小板的凝聚释放血栓素，引起血栓发生；(3) 内皮细胞损伤和钙化内皮细胞损伤激活纤维蛋白激活剂，如组织因子、血小板激活因子、IL-1等促凝血物质，可引起血管钙化，促进血栓形成。28、高脂血症的防治、合理的饮食强化运动结合体重饮食治疗和药物治疗，29、国外血脂标准化工作的回顾和现状，70年代中期，血脂与冠心病的关系建立后，血脂测量工作和质量控制越来越受到重视，美国西北临床血脂研究中心(LRC )进行实验室间血脂评价，CV值差异1985年，美国的CDC提出了TC和TG测定的标准化计划，与WHO合作，当时有800多个实验室参加，CDC提供标准血清，掌握实验室之间TC和TG测定的精度和精密性，提高血脂测定水平。 30，1985年，美国卫生研究所(NIH )提出了胆固醇教育计划(NCEP )，设立了NCEP委员会，投入大量资金，动员了相关组织，设立了4个专家(LSP )，指导了TC的标准化。 1990年，NCEP提出了胆固醇测定的方法论，1995年提出了LDL、HDL和TG测定的建议，对一些脂质测定的现状、变异源、分析目标、医学决定水平和方法论、制造商和机构提出了具体的建议，被称为美国的脂质测定纲领文件。 31、22220000006国际免疫学会联盟脂蛋白委员会和美国CDC提供了ApoA和b的质量控制血清，分别于83年和87年进行了室内质量控制。 1989年，国际临床化学联合会(IFCC )召开了载脂蛋白免疫化学测定的标准化会议，总结了统一的标准化计划，提出草案，研究了1989年7月实施。. 32、当前国际脂质标准化系统和结构(美国)、33、美国脂质测定标准化系统、1 .针对各种脂质测定的分析目标脂质测定分析目标(NCEP1994 )、34， 美国脂质测定标准化体系脂质研究实验室网络和国家胆固醇参考方法实验室网络专业机构提供标准化血清和标准化指导服务(包括优秀方法的研究和推荐、参考材料和质量控制材料的研究和提供)，定期进行质量调查。 35、我国血脂检测的标准化现状，至今尚无全国性的血脂标准化体系，但有区域性的调查和行业标准化，已经做了很多基础性工作。 (1)调查底1987年江浙省和1992年京津上海医院实验室Tc测定调查(2)参考物研究开发老年人开发的胆固醇纯度标准物质(GBW092030 )和血清胆固醇标准物质(GBW09138 )，1994年国家技术监督局批准为国家一级标准，与美国标准物同等水平， 制备纯度达到99.8%的最近APOA和b的一定值血清，经WHO认可，36，我国脂质测定标准化现状，(3)参考方法的研究老年人提出HLPC法为TC的参考方法的各项技术指标达到了美国ALBK法的要求，(4)推荐普通测定方法的1994年全国脂质测定研讨会推荐了TC、TG、 2003年提出HDL和LDL推荐方法临床血脂测定建议，37，发表了血脂测定，血浆中脂质随年龄变化，与多种因素有关，因此分析前的变异是脂质标准化测定的基础，也是必要的考虑因素。38、第二节血清总胆固醇测定、(1)化学法(ALBK法)皂化、萃取、显色、比色。 美国参考方法(2)高效液相法我国参考方法(3)酶法临床常规测定方法，39，酶法测定血脂原理，胆固醇酯酶(CEH )胆固醇酯游离胆固醇脂肪酸胆固醇氧化酶(COD ) 游离胆固醇4-胆固醇H2O2H2O2酶H2O2 4-氨基安替萘酚红色醌亚胺H2O、 40、临床意义病理性血清胆固醇增高：脂肪肝、肝肿瘤、甲状腺功能减退、重症糖尿病、动脉粥样硬化病理性血清胆固醇降低：肝脏疾病、肝肿瘤、甲状腺功能亢进、恶性贫血，41，第3节血清三酰甘油测定，目前尚无统一的参考方法。 美国CDC的参考方法为二氯甲烷-硫酸-变色酸法，卫生部老年人对我国TG的参考方法也称HLPC法TG为中性脂肪，其甘油骨架上分别结合有3分子脂肪酸、2分子脂肪酸和1分子脂肪酸，因此42、TG的测定方法为： (1)化学法萃取、分离、皂化， 甘油糖氧化和显色(2)酶法氧化酶法推荐常规方法43、酶氧化法测定TG原理脂肪酶(LPC )甘油三酯游离脂肪酸甘油激酶(GK ) 甘油ATP甘油-3-磷酸ADP甘油-3-磷酸氧化酶甘油-3-磷酸二羟丙酮H2O2H2O2酶H2O2 4-氨基氨基萘酚红色醌亚胺H2O、44， 第4节HDL测定1 .离心