菊花的组织培养(审定)PPT课件

,1,.,3.1菊花的组织培养,2,.,【学习目标】（1）说明组织培养的基本原理；（2）学习植物组织培养的基本技术；（3）进行菊花或其他植物的组织培养。【重点和难点】重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术;难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术,3,.,自主预习反馈,4,.,一基础知识,1植物组织培养的理论基础,细胞分化_过程中，细胞在_、_和_上出现_差异的过程。,个体发育,形态,结构,功能,稳定性,已分化的植物细胞在离体时，若条件适宜可能发育成完整植株，即植物细胞具有_。,全能性,5,.,一基础知识,2植物组织培养的基本过程,移栽成活,_,_,_,植物组织,形成愈伤组织,长出丛芽,生根,（1）请在横线补充图片所对应阶段，说明愈伤组织中细胞特点。（2）说出序号表示的过程名称；描述脱分化和再分化的起点及终点。,再分化,脱分化,再分化,脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。再分化：由愈伤组织重新分化出根或芽等器官的过程。,6,.,一基础知识,3影响植物组织培养的因素,植物组织的种类植物材料的年龄、保存时间营养条件调节剂（植物激素）环境因子（如pH、温度、光照等）,内因,外因,7,.,关于材料的年龄和保存时间长短，你来选一选：你选择未开花的菊花植株的茎上部新萌生的侧枝？还是茎下部的老枝？你选择昨天晚上采集的菊花枝条？还是今天早晨采集的？,8,.,MS培养基,大量元素,微量元素,有机物,讨论：1.上述成分各属于哪类营养物质？微量元素、大量元素、蔗糖、甘氨酸和维生素等的主要作用是什么？2.微生物培养基与MS培养基的配方有哪些明显不同？,9,.,MS培养基,大量元素,微量元素,有机物,无机盐,碳源、维持细胞渗透压,满足细胞代谢受影响后的特殊营养需求,2.微生物培养基以_营养为主；MS培养基包含大量_营养；,有机,无机,10,.,植物激素,讨论：1.生长素和细胞分裂素使用的先后顺序如何影响植物细胞的发育？在组织培养过程中若只需从愈伤组织中提取某种成分，则上述激素使用顺序如何？,利于细胞分裂但不分化,细胞既分裂也分化,分化频率提高,11,.,植物激素,讨论：2.同时使用时，生长素和细胞分裂素使用的比例如何影响植物细胞的发育？,根,芽,芽,根,愈伤组织,12,.,二实验操作,1.菊花植物组织培养有哪些基本步骤？2.植物组织培养中的无菌操作至关重要，哪些操作过程中哪些环节进行了怎样的无菌操作？,13,.,（一）制备MS固体培养基,（二）外植体消毒,（三）接种,（四）培养,（五）移栽,（六）栽培,二实验操作,14,.,（一）制备MS固体培养基,配制_,配制培养液,调_,培养基的_,灭菌,MS培养基包括20多种营养成分，常用4下保存的配制好的培养基_来制备。,配制各种母液,母液,培养基,_,PH,分装,_法,高压蒸汽灭菌,15,.,（二）外植体消毒,生长旺盛的嫩枝茎段流水冲洗加洗衣粉刷洗流水冲洗无菌吸水纸_无菌水清洗无菌吸水纸_无菌水冲洗数次,70%酒精,0.1%氯化汞,16,.,（三）接种,1.无菌操作_擦拭工作台；在_旁进行；锥形瓶瓶口和用过的器械火焰_灭菌。,2.材料的切取和接种消过毒的茎段切成小段（0.5-1cm）镊子夹取菊花茎段插入锥形瓶中的培养基（应注意方向）,70%酒精,酒精灯火焰,灼烧,17,.,（四）培养,接种后的锥形瓶最好放在_箱中培养，培养期间应定期_培养温度控制在_每日用日光灯光照_h,无菌,消毒,18-22,12,18,.,（五）移栽,打开封口膜,清洗转移,移栽,（移植到珍珠岩等环境）,（移到土壤）,19,.,高压蒸汽,70%酒精,灼烧,70%酒精,0.1%氯化汞,无菌,消毒,移到消过毒的环境中生长一段时间,二实验操作,制备MS培养基,外植体消毒,接种,培养,移栽,栽培,培养基_灭菌,_、_处理,_擦拭工作台、酒精灯火焰_,_箱培养，定期_,20,.,三结果与评价,正常苗,污染苗,21,.,菊花的组织培养,再分化,材料性质、营养物质、调节物质、环境条件,外植体的消毒,接种,基本原理:,细胞的全能性,基本过程:,脱分化,愈伤组织,影响因素：,操作流程：,配制MS培养基,培养,移栽,栽培,22,.,1.植物组织培养过程可归纳为：,，对此叙述有错误的是（）A的再分化过程中，细胞增殖的方式为有丝分裂B植物组织培养依据的原理是细胞的全能性C过程指植物的营养生长和生殖生长阶段D将经脱分化培养成时，再植上人造种皮可获得人工种子,D,巩固练习,23,.,2.菊花的组织培养需要严格的无菌操作，下列说法正确的是()A培养基应进行干热灭菌B刚经过再分化形成根和芽的幼苗可直接移栽到室外土壤C用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，一旦感染杂菌则前功尽弃D将菊花茎段插入时应注意方向，不应倒插，是为了防止杂菌污染,C,24,.,三结果与评价,污染途径,25,.,1、外植体带菌,2、培养基及接种器具灭菌不彻底,3、接种操作时带入,4、环境不清洁,污染途径,26,.,细胞排列_而_规则,是高度_化的、呈