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文档简介

.1,题目5DNA与蛋白质技术,郑,陇县二中,生物选修1,人文教育版,题目1 DNA的粗提取与鉴定,2、基础知识,提取DNA的基本思路:利用DNA和蛋白质在理化性质上的差异,提取DNA,去除其他成分。嘿。嘿。3,1)脱氧核糖核酸在不同浓度的氯化钠中的溶解度不同。2)脱氧核糖核酸在酒精中的溶解度不同于其他细胞成分。DNA不溶于酒精,而细胞中的一些蛋白质可溶于酒精。3)DNA和蛋白质对酶有不同耐受性:酶特异性蛋白酶水解蛋白。但是它对DNA没有影响。4)DNA和蛋白质对高温的耐受性不同:蛋白质和DNA具有不同的热稳定性。大多数蛋白质经不起60 80的高温,而DNA在80以上会变性。5)脱氧核糖核酸和蛋白质对去污剂的耐受性不同:去污剂能使细胞膜崩解,但对脱氧核糖核酸没有影响。粗DNA提取的实验原理,例1:以鸡血为实验材料提取粗DNA,例1:实验原理,例1:不同浓度的氯化钠对DNA的溶解度不同。2)脱氧核糖核酸在酒精中的溶解度不同于其他细胞成分。DNA不溶于酒精,而细胞中的一些蛋白质可溶于酒精。实验材料动物,提醒:人类和哺乳动物的成熟红细胞不含细胞核或DNA。它们不适合提取DNA,但它们是提取血红蛋白的理想材料。鸡血细胞液的优点:鸡红细胞和白细胞都有细胞核,含有大量的脱氧核糖核酸,既经济又容易获得。(2)植物:洋葱、新鲜花椰菜、大蒜、菠菜等。在500毫升烧杯中,搅拌玻璃棒,离心或静置沉淀。离心或静置以除去上清液、血浆、血细胞、7、提取核物质:将DNA溶解于核中:沉淀DNA:再次溶解DNA粘性物质:提取更纯的DNA:DNA鉴定:过滤DNA粘性物质:过滤含有DNA的氯化钠溶液:2)实验方法步骤:向上述溶液中缓慢加入蒸馏水,并向一个方向轻轻搅拌以形成细丝;当长丝不增加时,停止加水(此时氯化钠溶液的浓度相当于0.14摩尔/升)。用多层纱布过滤,含DNA的原液保留在纱布上。用两层纱布过滤。滤液中含有脱氧核糖核酸。所得滤液为95%体积的50毫升冷却醇,用玻璃棒向一个方向轻轻搅拌,溶液中出现乳白色细丝(沉淀),并用玻璃棒卷起细丝。利用细胞吸收水分而破裂,释放出细胞核中的物质,用纱布过滤得到滤液。向滤液中加入2ml/L氯化钠溶液,搅拌使染色质中的DNA与蛋白质分离,完全溶解DNA,过滤(除去杂质),用烧杯中的2ml/L氯化钠溶液溶解DNA。脱氧核糖核酸与二苯胺试剂反应,使溶液呈蓝色。(1) 4毫升二苯胺试剂(2) 2摩尔/5毫升lnacl溶液,自变量,能不能用其他方法鉴定脱氧核糖核酸?取一些细丝,放在载玻片的中心,加入1滴甲基绿溶液,细丝变成绿色。注:用于鉴别的试剂是二苯胺或甲基绿。用二苯胺加热。用甲基绿代替水浴。注:配制鸡血细胞液时,应在取鸡血时加入柠檬酸钠。静置后,上层是血清,下层是必需的血细胞。(2)在整个实验中加入蒸馏水两次、氯化钠溶液三次、酒精一次和蒸馏水两次的目的不同,一个是溶胀和破碎细胞,另一个是稀释溶液。最好的酒精是95%的冷酒精。(3)加入蒸馏水或酒精,用玻璃棒搅拌。动作应该轻柔,并且是单向的。确保DNA分子的完整性。使用时,小心不要让玻璃棒接触烧杯的底部。(4) DNA鉴定需要沸水浴加热。(5)二苯胺试剂应立即制备和使用,否则会影响鉴别效果。二苯胺是一种有毒试剂,使用时应注意不要让液体药物接触皮肤或身体的其他部位。(6)用于鸡血细胞的容器优选为塑料容器(在鸡血细胞破裂后释放的DNA容易被玻璃容器吸收,导致提取过程中的DNA损失)。(10)摘要:(11)锻炼。1.下图显示了DNA溶解度和氯化钠溶液浓度之间的关系()。2.在粗DNA提取和鉴定实验中,蒸馏水用于从鸡血细胞中提取核物质和分离含DNA的粘性物质。它的功能在于()。前者用于溶解血细胞,而后者用于溶解脱氧核糖核酸.前者导致血细胞吸收水分并分解。后者用于稀释氯化钠溶液。前者用于分离细胞核和细胞质,而后者用于提取脱氧核糖核酸.前者将DNA从细胞核中分离出来,而后者将DNA分离出来。丙、乙、12,3。下图显示了“粗DNA提取和鉴定”实验的相关操作。这些操作的正确目的是()。答:是清洗血细胞,去除血细胞表面的杂质;是溶解脱氧核糖核酸,去除不溶于酒精的杂质;是溶解脱氧核糖核酸,去除不溶

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