临床分子生物学技术绪论

医学检验系李子博、临床分子生物学检验技术、绪论、第一节临床分子生物学检验技术的发展，一、临床分子生物学技术指的是临床分子生物学=分子生物学临床医学检验，分子生物学指的是以核酸、蛋白质等生物高分子在结构、功能和信号转导中的作用为研究对象，在分子水平上研究生命现象及其规律的学科。 第一代诊断技术早期细胞学检查、第二代诊断技术生化指标分析(20世纪50年代)、第三代诊断技术免疫学诊断(20世纪60年代)、第四代诊断技术临床分子生物学诊断(20世纪70年代末)、临床分子生物学检查技术的发展、 以第三代技术疾病的表型变化为依据，非特异性、迟滞性难以早期诊断、分子诊断、以疾病基因和表型为对象，寻找特异性、敏感早期诊断、预测、窗口时间： HBV56天(缩短6-15天) HCV70天(缩短41-60天) HIV22天(缩短10-15天)、1、分子生物学检查标志物2、建立实用可靠的检测技术方法。 方法进行学评价和临床意义评价，3 .建立分子生物学检测技术的质量控制和质量控制。 临床分子生物学检测技术的主要任务是1978年，KanYuet-Wai首次应用液相DNA分子杂交技术成功诊断镰状细胞贫血的产前基因，证明检测诊断已进入基因诊断时代。 二、临床分子生物学检测技术的发展，第一阶段：基于DNA分子杂交技术的诊断方法。 -开展遗传病基因诊断，简悦威(美国科学院院士):1936年出生于香港，1958年毕业于香港大学医学院，1980年获香港大学理学博士学位。 他于1972年在加利福尼亚大学旧金山分校工作，现任该校罗氏达蒙教授。 Kan yuet-wai yuetwakanandandreem.dozy.polymorphismofdnasequenceadjacenttomh-globinstructuralgene : c.natl.acad.SCC 开展多基因多因素疾病的基因诊断，第二阶段：基于PCR技术的诊断方法。 开展获得性基因病(病原微生物)的基因诊断，第四阶段：以DNA测序技术和生物质谱技术为代表的检测技术。 第二节临床分子生物学检测技术的应用，基因组DNA是目前最常用的分子靶标，DHPLC技术，一、病原生物基因组，一.菌种鉴定：通过测序和探针杂交鉴定结核杆菌。 2 .确定病毒感染和病毒载量：3.病毒分析：4.细菌耐药性检测和分子流行病学调查：2.基因变异，1 .病原基因的分子缺陷：单基因病原基因检查：2.线粒体基因变异：3.肿瘤相关基因：4.DNA位错融合基因： 3， 基因多态性1 .基因定位与遗传病相关分析2 .药物代谢酶与血药浓度3 .疾病诊断与遗传咨询4 .多基因病的研究5 .器官移植合格与个体识别4 .循环游离核酸、肿瘤、产前诊断、第三节临床分子生物学检查的发展与应用感染性疾病的分子诊断：病原微生物(病毒、病原菌、衣原体、 螺旋体等)遗传性疾病的分子诊断：血友病、血红蛋白病、产前婴儿检查肿瘤的分子诊断：个体化医学：1，临床应用，80年代以来，基因检查在许多国家已成为标准检查项目，主要用于感染性和遗传性疾病等的诊断。分子诊断技术在我国，对感染性疾病病原体的分子诊断有严格的管理-项目批准：卫生部批准-实验室：通过检查，定期检查仪器和器材-试剂：国家药监局批准-工作人员：经过培训，持证工作-质量控制：室内质量控制，室内质量评价对遗传性疾病的分子诊断？ 什么？ 多基因(多因素)疾病的分子诊断？ 什么？ 2、存在的问题，假阳性和假阴性问题重现性差，质量控制困难，分子诊断标准化和监管体系问题迫在眉睫；仪器设备要求严格，操作复杂，费用高，分子诊断应用于临床的前提分子诊断技术方法标准化； 建立了分子诊断标准化操作程序，建立了分子诊断标准化实验室测量方法的标准化，建立了分子诊断项目室内质量控制和室间评价体系，从单一病因诊断发展为综合检查诊断。 3、发展趋势；从分子杂交、PCR等单一技术诊断发展为有机组合多技术联合诊断。 方法