病原菌的采样技术PPT课件VIP

.,1,病原菌的采样技术,广州市CDC邓志爱,.,2,主要内容,如何正确采集和处理标本选择合适的培养基和培养方法常见病原菌标本的采集食物中毒检材的处理,.,3,正确采集和处理标本无菌操作血液、脑脊液及穿刺液等-无菌操作粪便、肛拭子和咽拭子等-避免杂菌污染盛放容器无菌容器采集时间和部位在使用抗菌药物之前；选择合适的部位,.,4,送检时间和方法做好标记填好送检单立即送检置运送培养基送检4保存运送35-37保温运送安全防护人、标本、环境,.,5,选择合适的培养基和培养方法依据：标本来源、可能存在的病原菌血液、脑脊液1.部分标本直接涂片染色镜检2.培养基：血培养瓶/管、BAP（血平板）、MAC（麦康凯平板）/EMB（伊红美蓝平板）、CA（巧克力平板）、SA（沙保培养基）3.培养方法：同时在需氧、厌氧和CO2环境培养,.,6,粪便、肛拭子SS、MAC/EMB、TCBS痰、咽拭子1.可直接涂片染色镜检2.BAP、CA、SA、BCYE（军团菌培养基）3.在需氧、厌氧和CO2环境培养尿1.做细菌计数2.BAP、MAC/EMB、CA,.,7,脓液、分泌物1.可直接涂片染色镜检2.EB(增菌肉汤)、BAP、MAC/EMB、CA3.在需氧、厌氧环境培养生殖道标本1.部分标本直接涂片染色镜检2.EB、BAP、MAC/EMB、CA、SA眼耳口鼻标本1.部分标本直接涂片染色镜检2.EB、BAP、MAC/EMB、CA,.,8,常见病原菌标本的采集血液、脑脊液采血时间与次数用药前24小时内采34次血液标本，可使细菌检出率高达99%；一般在病人发热初期12天内或发热高峰时采集采血部位一般从肘静脉采血，亚急性细菌性心内膜炎等病人则从肘动脉或股动脉采血,.,9,采血量成人510ml/次，婴幼儿15ml/次脑脊液采集35ml/次，35-37保温，立即送检,.,10,粪便标本自然排便采集法挑取有脓血、粘液或絮状物部分置采便盒/保存液/增菌液中送检直肠拭子采集法置C-B保存液/增菌液中送检,.,11,呼吸道标本咽拭采集法尽量避免口腔正常菌群污染自然咯痰法用清水反复漱口，用力自气管深部咳出当日第一口脓痰，置无菌容器中尽快送检小儿取痰法气管镜采集法,.,12,胃内采痰法结核病人可用此法采集气管穿刺法主要用于厌氧培养呼吸道标本采集注意事项痰液标本以晨痰为佳，咳前要充分漱口，减少口腔正常菌群的污染采集的痰液标本必须是肺深部的痰液而不是唾液,.,13,标本采集后及时送检，以防某些细菌在外环境中死亡。作结核分枝杆菌或真菌培养的痰液如不能及时送检，应放入4冰箱，以免杂菌生长做结核分枝杆菌检查，最好收集24小时痰液有1/4到1/2肺部感染的病人可能发生菌血症，可同时做血培养,.,14,尿液标本中段尿采集法肾盂尿采集法确定菌尿是否来自肾脏膀胱穿刺尿采集法主要用于厌氧菌培养,.,15,食物中毒检材的处理肛拭1.采用C-B保存液和液体硫乙醇酸盐培养基运送。2.C-B管：检验人员在接到C-B管样后，应立即用旋涡振荡器充分振荡混匀，然后用无菌吸管分别吸取混悬液0.51ml放入11种增菌液增菌培养，病人肛拭同时接种于11种平板培养基直接分离培养。3.液体硫乙醇酸盐培养基：置厌氧培养箱培养，病人肛拭同时接种血平板/SPS平板直接分离置厌氧培养箱培养。,.,16,.,17,食品应以无菌操作取适量食品，分别放入12种增菌液管中增菌培养。产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌分别按国标GB4789.13、14-2003作菌落计数。,.,18,外环境一般不采用直接分离培养。分别放入12种增菌液管中增菌培养。,.,19,呕吐物需直接进行金葡肠毒素检测，用MiniVIDAS全自动荧光免疫分析仪检测。同时进行细菌学检验。,.,20,12种增菌培养液：亚硒酸盐增菌液/MM：培养沙门菌牛肉汤：培养金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌1%葡萄糖肉汤：培养链球菌7.5%NaCl肉汤：培养金黄色葡萄球菌嗜盐增菌液：培养副溶血性弧菌,.,21,碱性蛋白胨水：培养霍乱弧