医学动物实验与生物安全.ppt

教学目的是了解动物实验中的生物安全危害、常见人畜共患病、实验动物中的微生物和寄生虫感染、熟悉医学动物实验室中的生物危害和安全防护、掌握应急预案、实验后的无害化处理、医学动物实验和生物安全。第一部分涉及实验动物中重要的人和牲畜的共发病和传染病。第二部分涉及实验动物中常见微生物和寄生虫的感染。第三部分论述了医学动物实验室的生物危害和安全保护。第四部分涉及受感染动物的饲养和管理。第五部分是动物实验后废弃物的无害化处理。第六部分论述了实验室生物安全的相关规范和标准。医学动物实验是生命科学研究的基础和重要支撑条件。在生命科学的几乎所有领域，医学动物实验对于科学研究、教学、生产、验证和安全性评价都是不可或缺的。动物实验有生物安全的危险。人畜共患病、动物气溶胶和实验室相关疾病感染是动物实验中引起生物危害的三个重要因素。在第一部分，实验动物主要受人畜共患病和传染病的影响。首先，流行性出血热二型、淋巴细胞脉络丛脑膜炎三型、狂犬病四型、猴乙型病毒五型、弓形体病六型、沙门氏菌病七型、钩端螺旋体病八型、结核分枝杆菌病九型、志贺氏菌病十型、鼠痘XI病和兔出血症。人畜共患病是指脊椎动物和人类之间自然传播和感染的疾病，即由常见病原体引起的与人类和脊椎动物之间流行病学相关的疾病。首先，流行性出血热是由流行性出血热病毒(流行病出血热病毒)引起的一种烈性传染病，主要发生在大鼠体内，也是一种人畜共患的自然传染病。主要特征：高热和出血性肾损伤。1981年，世卫组织将其命名为肾综合征出血热(HFRS)。自然宿主主要是小型啮齿动物，如姬鼠、家鼠、仓鼠和老鼠。黑线姬鼠是HFRS型姬鼠的主要传染源。褐家鼠是HFRS感染的主要来源。大鼠是实验动物HFRS感染的主要来源。淋巴细胞脉络丛脑膜炎是由淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)引起的一种急性传染病，也是一种人畜共患病。它主要损害中枢神经系统，并出现脑脊髓炎症状。LCMV是人类和许多动物共有的病毒性疾病。小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、狗、猴子、鸡、马和兔子都是易感动物。狂犬病，由狂犬病病毒(RV)引起的急性直接接触性人畜共患病。主要特征：侵犯中枢神经系统，表现为躁狂焦虑、意识障碍，最后瘫痪和死亡。几乎所有的温血动物都对RV敏感。最敏感的动物包括啮齿动物，如狗、仓鼠、豚鼠和兔子。中度易感动物包括牛、羊、马和灵长类动物。在某些情况下，野生啮齿动物，如野生大鼠，可能成为疾病的长期危险流行源。第四，猴乙型病毒病，由猴乙型病毒(SimianBvirusInfections)引起，又称疱疹病毒，是一种人类和猴子都患有的传染病。猴是乙型肝炎病毒的自然宿主，感染率可达10% 60%。大多数情况下，疱疹和溃疡只出现在口腔粘膜。此后，该病毒可长时间潜伏在呼吸道或泌尿生殖器官附近的神经节中，也可长时间潜伏在组织和器官中以产生抗乙型病毒的抗体。人类感染主要表现为脑脊髓炎症状，大多数患者死亡。弓形虫病是由属于孢子类的弓形虫引起的，是一种重要的人畜共患病，可在人与动物之间传播。小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠、狗和猴子是中间宿主，猫是最终宿主。沙门氏菌是由埃伯斯于1880年首次发现的。它是人畜共患病的重要病原体。对实验动物的主要威胁是斑疹伤寒和肠炎细菌。在动物中可以发现两种沙门氏菌的交叉感染或同时感染。豚鼠对沙门氏菌高度敏感，感染后会发展成严重的临床疾病。小鼠和大鼠也非常敏感，经常长时间携带亚临床感染形式的细菌钩端螺旋体病是一种重要而复杂的人畜共患病和自然传染病。临床表现多样，主要包括发热、黄疸、血红蛋白尿、出血、流产、皮肤和粘膜坏死、水肿等。钩端螺旋体有非常广泛的动物宿主，几乎所有的温血动物都能被感染。啮齿动物是最重要的储藏宿主。结核分枝杆菌是由结核分枝杆菌引起的细菌性疾病，是人类和动物的常见病。结核病是在人类感染后形成的。猴子、狗、豚鼠、兔子和猫都可能被感染，其中猴子的发病率最高。志贺菌病是由志贺菌属引起的细菌性疾病。或痢疾志贺氏菌。细菌性痢疾是人类和猴子的主要症状。鼠痘(MPV)是一种对老鼠具有毁灭性和高度传染性的疾病。流行性腮腺炎病毒的病原体是大肠杆菌。鼠痘的特点是不仅在全身或局部皮肤上引起天花，而且在四肢和尾巴上引起肿胀、炎症和坏疽。四肢以“缺肢”的畸形形式脱落，因此被称为传染性足病(感染性足病)。鼠痘在世界各地普遍存在，经常导致大量老鼠死亡，其中一些是潜伏感染。然而，在实验条件下，病毒可转化为显性感染，从而严重影响和干扰实验研究的顺利进行。兔出血症是由兔出血症病毒引起的兔病毒性传染病，又称“兔瘟”。主要特征是病兔猝死、兴奋、挣扎、抽搐和惨叫。这种疾病只发生在兔子身上。不同品种的兔子都是易感的，不同性别的兔子的易感性也没有什么不同。不同年龄兔的易感性差异很大，主要发生在60日龄以上的幼兔和成年兔，发病急，死亡率高。断奶后饲养的家兔死亡率略低，而哺乳期的幼兔很少发病和死亡。一、危害较大的人畜共患疾病，1、流行性出血热2、结核分枝杆菌3、狂犬病4、沙门氏菌5、志贺氏菌病6、弓形虫病7、钩端螺旋体病、第二节常见实验动物微生物和寄生虫感染，1、仙台病毒感染2、小鼠肝炎3、支原体病4、巴氏杆菌病5、呼肠孤病毒型感染6、球虫病7、犬瘟热8、传染性犬肝炎9、犬细小病毒感染，实验动物繁殖环境和动物体内有多种微生物和寄生虫。这些微生物和寄生虫可能对实验动物具有致病性、条件致病性和非致病性，有些也可能是人畜共患的病原体。仙台病毒感染、小鼠仙台病毒感染是最难控制的两种疾病类型的临床表现之一。急性型多见于断乳小鼠，主要表现为呼吸道症状，主要表现为潜伏感染，有时会引起肺炎，严重干扰大鼠的麻醉实验和吸入毒理学研究。鼠肝炎是由鼠肝炎病毒(MHV)引起的高度传染性疾病。小鼠肝炎病毒被列为影响科学研究实验的主要病原体之一。现在人们认为MHV只感染老鼠。感染通常是隐性或亚临床的，但它是高度传染性的。MHV分布于世界各地，在中国鼠群中广泛流行，感染率为20% 100%。支原体病是一组介于病毒和细菌之间的多形性微生物，能引起人类、动物和植物的疾病，称为支原体病。这种疾病传染性很强，能使疾病迅速传播，并经常与其他实验动物疾病共同感染。这种疾病分布在世界各地，是啮齿动物慢性呼吸道疾病的主要病原体。在大鼠和小鼠的生产群体中广泛分布，感染率甚至超过仙台病毒和小鼠肺炎病毒。4.巴氏杆菌病是指由多杀性巴氏杆菌和嗜肺性巴氏杆菌引起的各种实验动物，尤其是兔和啮齿动物疾病。(5)呼肠孤病毒型感染由呼肠孤病毒型在小鼠、豚鼠和仓鼠中引起的传染病，主要特征为痢疾。6.实验动物的球虫病主要发生在兔子身上。兔球虫病可分为肠球虫病和肝球虫病，其中大部分是混合感染。精神抑郁、行动迟缓、厌食或废用。腹泻和便秘交替出现。犬瘟热是由犬瘟热病毒(CDV)引起的，该病毒感染犬科食肉动物(尤其是小狗)、黄鼠狼科和一些高度暴露于传染性和致命性传染病的浣熊。早期表现为双相热、急性鼻黏膜炎，其次是支气管炎、卡他性肺炎、严重胃肠炎和神经症状。出现少量鼻和足垫角化过度。传染性肝炎是由犬1型腺病毒引起的急性感染性传染病。它主要发生在狗身上，也可以在其他狗身上看到。肝炎和眼病是狗的主要表现。无论年龄、性别和品种，狗都会受到影响，但L岁以下的小狗更常见。幼犬死亡率高，达25% 40%，临床症状在成年犬中很少出现。犬瘟热病毒感染是犬的一种烈性传染病。临床表现以急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎为特征。狗是主要的自然宿主。犬类感染CPV的特点是发病急、死亡率高、暴发性流行。不同年龄、性别和品种的狗都可能被感染，但刚断奶到90天的狗更常见，疾病更严重，尤其是新生幼犬，有时表现为非化脓性心肌炎和猝死。纯种犬比杂种犬和本地犬更容易感染。第三节医学动物实验室的生物危害和安全保护。首先，实验室生物安全和实验室生物安全分级的概念是指从事病原微生物的实验室。为了避免病原微生物对工作人员、相关人员、公众的危害和对环境的污染，保证实验研究的科学性或保护被测因素不受污染，采取了建立标准化管理体系、配备必要的物理和生物防护设施和设备、建立标准化微生物操作程序和方法等综合措施。生物安全等级分为四个等级。生物安全实验室是通过防护屏障和管理措施满足生物安全要求的生物实验室。实验动物实验室安全实验室、ABSL实验动物生物安全实验室(ABSL)是专门的动物实验室。实验以实验动物为载体，在特定条件下通过人工或自然感染进行动物实验，或用于动物传染病的临床诊断、治疗和预防。动物实验室的生物安全标准与微生物实验室的标准基本相似，微生物实验室通常对传染性病原体进行实验研究。动物实验的生物安全等级也分为四个等级。一、实验室生物安全等级分类，生物安全实验室环境技术指标，1、BSL-3主实验室相对于大气的最小负压不应小于-30Pa，BSL-4主实验室相对于大气的最小负压不应小于-40Pa。2、ABSL-3主实验室相对于大气的最小负压不应小于-40Pa，解剖室不应小于-50Pa；ABSL四号主实验室相对于大气的最小负压不应小于-50Pa，其中解剖室不应小于-60Pa。3.本表中的噪声不包括生物安全柜和动物隔离器的噪声。如果包括上述设备的噪声，最大噪声不得超过68dB(A)。一、动物生物安全实验室(ABSL-1、ABSL-2)环境相关技术指标，1、动物生物安全实验室参数应符合GB14925 实验动物环境及设施的相关要求。2.ABSL 2号应为负压屏障环境，压力梯度应保证走廊动物实验区解剖室的清洁。动物生物安全实验室的其他要求1。在设计和建造动物生物安全实验室时，还应考虑降低人流和物流交叉污染的风险。ABSL-1比12、实验动物尸体和废物必须经过高压灭菌，然后才能运出隔离设施。一级实验动物生物安全实验室(ABSL-1)和一级实验动物生物安全实验室适用于饲养接种了1级危险微生物的动物。实验可能对实验室工作人员和环境有轻微的伤害。应制定动物操作和进入动物设施的程序和计划，要求应用微生物操作的技术规范。员工应制定适当的医疗监护计划，并制定和实施安全操作手册。二级实验动物生物安全实验室(ABSL-2)和二级实验动物生物安全实验室(ABSL-2)适用于对人类和环境中度有害的微生物实验。ABSL-2是根据ABSL-1的操作规范、加工方法、安全设备和实验室要求建立的。实验动物在隔离器和IVC饲养。气溶胶的产生应在生物安全柜中进行。门应保持关闭，并悬挂生物危害标志。危险废物应与一般废物分开放置。实验室动物生物安全实验室安全设备，(a)生物安全生物网(BSCs) (2)隔离器(3)独立通风笼系统(IVC)，A2型生物安全柜，70%气体循环。30%的气体排放可以接管管道排放。它也可以直接排放在实验室，隔离器，独立通风笼系统(IVC)，实验室生物安全管理系统，1。生物安全管理组织体系我国实验室生物安全管理组织体系由五个层次组成：国家、地区、单位上级主管部门、实验室所在地单位和实验室。(1)国家级(2)地区级(3)实验室单位上级主管部门(4)实验室单位(5)实验室，2)人员安全管理培训、健康检查、免疫或血清学检查，严格个人防护，3)实验室动物安全管理选用合格的实验动物，防止人畜共患动物健康管理，4)建立生物安全管理体系，上级文件应得到下级文件的支持，下级文件比上级文件更具体、更具可操作性，上、下级应相互衔接，内容应协调一致。5，动物实验室生物安全应急计划，(1)信息报告系统(2)应急处理程序(1)重大病原微生物实验室生物安全应急处理程序(2)一般病原微生物实验室生物安全事件(3)生物恐怖事件，5，实验室动物生物安全实验室安全保护，动物实验中的安全保护：防止动物咬伤，动物间传播，特别是防止动物吸入气溶胶感染。措施：组织、制度和教育、安全操作、防护设备、有效消毒和医疗监测，第4节：受感染动物的喂养和管理、受感染动物的健康管理、受感染动物的喂养和管理、动物传染病保护的兽医管理、喂养和实验中受感染动物的气溶胶保护，1。受感染动物的健康管理、动物健康监测的安全管理、隔离和检疫、新购买动物的隔离和观察、受感染动物的隔离、疑似受感染动物的隔离。饲养和运输受感染实验动物时，应戴手套，以减少更换衬垫时笼箱内的灰尘散落。如果及时检查发现尸体，应立即运走，并将动物尸体放在指定的容器中储存。向动物体内注射生物危险物质时，应戴防护手套，以防止生物危险物质的应激反应和扩散。带有有害生物气溶胶的实验动物应被保存在密闭通风的笼子里或使用独立的通风笼子。实验室动物应在封闭的笼子或其他能防止气溶胶扩散的笼子中运输。2.受感染动物的饲养和管理。3.兽医管理。兽医管理兽医