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文档简介
限制性内切酶识别序列的特征是什么?限制性内切酶识别序列的特点是中心轴两侧的碱基反向对称并重复排列,如GAATTCCCCGGGCTTAAGGGGCCC。中轴线,1。EcoR(大肠杆菌的一种限制性酶)能识别GAATTC序列,并切断G和A2之间的磷酸二酯键。Sma能识别CCCGGG序列,并切割c和g之间的磷酸二酯键,两种常用的限制性内切酶,EcoR,粘端,粘端,什么是粘端?当限制性酶从识别序列的中心轴的两侧切割时,被限制性酶切割的DNA的末端具有几个突出的核苷酸,这些核苷酸正好互补并相互匹配。这种末端称为粘性末端。Sma,平端,平端,什么是平端?当限制性酶从识别序列的中心轴切下时,切下的DNA末端是平的,这种末端称为平末端。粘性末端之间的间隙可以被“缝合”。大肠杆菌na连接酶或T4DNA连接酶、T4DNA连接酶也可以“缝合”平端之间的缝隙,但效率相对较低,氢键、氢键、DNA聚合酶的功能是:将单个脱氧核苷酸连接到一个DNA片段的末端。脱氧核糖核酸连接酶的作用:连接两个双链脱氧核糖核酸片段。对载体的要求:(1)有1多个限制性内切酶切点(便于插入外源基因);(2)它们对受体细胞无害;(3)导入的基因可以在受体细胞中复制和表达;(4)有一些标记基因可供筛选;(1)作为分子转运蛋白的载体,如果没有切点会发生什么?(2)霍乱菌质粒有多个限制性内切酶切点。你会把它用作分子运输工具吗?(3)如果目标基因在导入受体细胞后不能被复制或转录,转基因生物能产生预期的效果吗?(4)目标基因是否进入受体细胞,如何找到?(3)“分子转运蛋白”基因进入受体细胞的载体,可与插入的靶基因一起复制和复制,并具有切割位点,标记基因可在将来用含青霉素的培养基鉴定。2。基因工程中常用的载体质粒。质粒是一种裸露的、简单的、自我复制的双链环状DNA分子,不依赖于细菌的核质。在基因工程操作中,真正用作载体的质粒已经在天然质粒的基础上进行了人工修饰。(1)质粒(2)噬菌体的衍生物、某些动物和植物病毒等。2)基因工程中常用的载体1)基因工程的概念2) DNA重组技术的基本工具1)限制性内
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