法医物证学(11选修)

欢迎,法医物证学,南方医科大学法医学系台运春,yctai法医物证学、法医物证、法医物证鉴定的概念,法医物证学的任务和意义,概述,法医物证学是运用医学、生物学和其它自然科学的理论与技术，研究并解决与法律有关的生物性检材的检验与鉴定的一门学科。,法医物证：对案件的真实情况有证明作用的物品和痕迹。,与人体有关的组织器官或其分泌物、排泄物,作案工具和致伤物日常用品及其附着物药品、毒品、生草药等指纹、掌纹、趾纹、足迹、鞋印等印鉴、票证、笔迹、文件、遗书及伪造品等,法医物证鉴定：对与案件有关的生物性检材进行专门检验，判断它们在该案件中能否作为证据的过程。,符合法律程序,任务,个体识别,意义,为侦察提供线索,亲权鉴定,为审判提供证据,为行政提供依据,亲子鉴定Paternitytesting,“亲子鉴定热”摧毁家庭的基石,造福人类还是戕害家庭？,亲子鉴定杀死了中国人的家庭忠诚,“亲子鉴定”折射家庭信任危机,亲子鉴定拷问“真实的谎言”,亲子鉴定有什么错,应用医学和生物学的理论和技术判断父母与子女是否有亲生关系。,1.1概念,1.2发展史古代,三国：滴骨验亲（会稽先贤传）明代：滴血认亲（“合血法”）,电视剧洗冤录中滴骨验亲剧照,电影九品芝麻官中滴血认亲剧照,1920年，欧洲将血型用于亲子鉴定1935年，美国开始亲子鉴定1985年，PCR技术发明/使亲子鉴定从排除走向认定,1.2发展史现代,基于PCR的STR分型已成为非常成熟的技术手段，商业化试剂盒的开发和自动测序仪的应用，结果科学可靠。案件量（例/年）：美国，20000；德法，3000余；我们中心2010年1800余。,1.2发展史当代,1.3亲子鉴定类型,妊娠期限：28014天，早产儿、过熟儿性交能力和生殖能力：受精期间遗传特征（遗传性状）：最主要的依据,1.4亲子鉴定的依据,遗传特征是生物体表现的一切形态特征、生理特征和代谢类型的统称。,受多个基因控制和环境因素影响，如相貌、身高、智力,受单个基因控制，遗传方式明确，不受环境影响,遗传标记,可检测的、遗传方式明确的性状或基因,1.4亲子鉴定的依据,遗传特征,红细胞型、白细胞型、血小板型,红细胞酶型、血清酶型、血清型,RFLP，VNTR，STR,SNP、mtDNA,1.4亲子鉴定的依据,遗传标记分类,用于亲权鉴定的遗传标记的要求,遗传方式明确遗传标记的分型终身不变，具有体细胞的稳定性和遗传的稳定性检测方法稳定。不同实验室、不同批次的结果相同具有遗传多态性,1.4亲子鉴定的依据,基因产物水平遗传标记的局限性,为基因编码产物，多态信息容量小，应用价值有限在基因表达过程中受许多因素影响，不能正确反映DNA多态性情况某些血型系统存在生理性变异和病理性变异，使判型错误易受环境中各种理化因素影响而失活，检材难以保存检测方法多样、复杂，技术、人为误差较大,1.4亲子鉴定的依据,DNA遗传标记的优点,直接检测遗传物质DNA的组成，不受表达过程环节影响是显性遗传标记，遗传路径明确多态性程度高，可达到肯定和否定结论检材类型广泛可进行复杂亲权关系鉴定比较稳定，不易受生理、病理影响,1.4亲子鉴定的依据,DNA标记的发展,1980：White首次描述限制片段长度多态性(RFLP)标记1985：Jeffreys发现可变数目串联重复(VNTR)1985：聚合酶链反应(PCR)第一篇论文发表1988：FBI开始利用DNA分析协助办案1991：短串联重复序列(STR)第一篇论文发表1995：英国开始建立DNA数据库1998：美国启动CODIS（DNA检索系统）数据库2001：人类基因组计划HGP完成/同时发现300万SNP,1.4亲子鉴定的依据,即DNA的结构在不同的个体或等位基因之间存在差异。其本质就是由于进化过程中各种原因引起染色体DNA中核苷酸排列顺序发生了改变/即产生的DNA片段和DNA序列在个体间的差异。,长度多态性,序列多态性,1.5DNA多态性,短串联重复序列（shorttandemrepeat/STR）,也叫微卫星DNA/是由2-6bp长的“核心序列”串联重复构成。STR在人类基因组中分布广泛/平均每6-10kb就出现一个。绝大多数位于非编码区/极少数在编码区域。,长度多态性,重复单位的长度,二核苷,三核苷,四核苷,五核苷,TH01/asimplelocus,(TCAT)3-14,Allele:,*AmpFlSTR,=TCA,advantages,是指基因组内特定核苷酸位置上存在着2种不同的碱基/其中较少的一种在群体的频率不少于1%。通常表现出二态性。,优势：丰富遗传稳定性,序列多态性,单核苷酸多态性（singlemucleotidepolymorphisms/SNPs）,2.1总体思路,检测遗传标记的表型/观察否符合相应遗传规律，并进行统计学计算，判断血缘关系,DNA,核DNA,线粒体DNA,常染色体,性染色体,X染色体,Y染色体,父系遗传,母系遗传,22对/孟德尔,DNA类型,奶父孙女,常用STR基因座及在染色体上的位置,CSF1PO,D5S818,D21S11,TH01,TPOX,D13S317,D7S820,D16S539,D18S51,D8S1179,D3S1358,FGA,VWA,AMEL,AMEL,在肯定孩子的某一遗传基因必然来自生父（生父基因obligatorygene/OG）/而假设父（allegedfather/AF）不带有这个基因时/可以排除他是孩子的生父。,否定亲生,2.2基本原理,在肯定孩子的某一遗传基因必然来自生父/而AF也带有这个基因时/不能排除他是孩子的生父/这时可以计算他与孩子具有亲生关系的相对机会有多大。,不排除亲生,肯定亲生？,2.2基本原理,父权指数（paternityindex/PI）,H0：争议父是孩子的生物学父亲H1：随机无关男子是孩子的生物学父亲,两个概念,PI=,1/2,p13,=,=,2.782,1/2p17+0p13,p13p17+p17p13,=,=,1.391,PI=,=,父权相对机会（relativechanceofpaternity/RCP/W）,=,=0.5,前概率（）：非遗传学证据相信争议父是孩子生父的概率,父权相对机会意义,1、结果准确性更高99.73%99.95%99.99%,2、结论严谨性更强可以肯定（排除）被检男子是孩子的生物学父亲被检男子是（不是）孩子的生物学父亲/从遗传学角度已经得到科学合理的确信。,DNA提取,PCR扩增,电泳分离检测,结果分析评估,一般流程图,Chelex法、酚-氯仿法,单基因座或复合扩增,激光诱导荧光检测或银染,各种检材,血液、唾液、精斑、毛发、肌肉、骨骼、牙齿等,根据等位基因ladder分型,2.3亲子鉴定方法,分型结果,违反Mendelian定律,突变（亲生）,不违反Mendelian定律,非亲生,亲生,多个遗传标记联合检测,非亲生/巧合,2.4结果评估,累积非父排除概率超过0.9999,双亲鉴定：15个以上,单亲鉴定：18个以上,多个遗传标记联合检测结果,没有基因座违反/W99.99%,13个基因座违反,3个以上基因座违反,双亲鉴定,排除亲权关系,单亲鉴定,肯定亲权关系,不排除亲权关系,增加更多基因座/计算PI,无违反/W99.99%,新违反,被检男子是孩子的生物学父亲/从遗传学角度已经得到科学合理的确信,被检男子不是孩子的生物学父亲/从遗传学角度已经得到科学合理的确信,双亲鉴定,单亲鉴定,不排除被检男子是孩子的生物学父亲,案例分析,案例一,父权概率为99.99999957%。结论：争议父是子的生物学父亲，从遗传学角度已经得到科学合理的确信。,简要案情：父怀疑子是否为其亲生。,案例二,简要案情：父怀疑子是否为其亲生。,10个基因座违反遗传规律。结论：争议父把是子的生物学父亲，从遗传学角度已经得到科学合理的确信。,案例三,简要案情：父怀疑子是否为其亲生。,仅D16S539违反孟德尔遗传规律，父权概率99.99876357%。结论：争议父把是子的生物学父亲，从遗传学角度已经得到科学合理的确信。,案例四,简要案情：父母怀疑子在医院报错。,简要案情：被检父1（爸爸）怀疑孩子是其妻子与其父亲（被检父2）所生。,简要案情：刘某自称是吕某包养的二奶/且与其生有非婚生孩子陈某某（男）。吕某与其妻子张某生有一子吕某某（男）。现吕某意外死亡/由于涉及遗产纠纷事宜/张某和刘某共同委托要求鉴定陈某某是否是吕某的亲生孩子。,1、有无确信是吕某的生物性检材遗留2、有无更多的近亲属？目的：反推出吕某的基因型组合3、同一父系鉴定，必要时可结合常染色体STR进行同胞关系鉴定如果为一男一女或者均为女孩，能否鉴定？,个体识别IndividualIdentification,应用医学和生物学的理论和技术判断生物性检材是否同一来源。,概念,概述,生物性检材的个体识别意义,生物性检材通常细小且分布范围广,罪犯难以彻底毁掉或掩盖,身份不明的尸体、活体或检材,辨明身份,现场遗落血液、毛发、皮肤、指甲、牙齿、精液、唾液等,灾难性事故、水浮尸被拐卖的妇女、儿童被追捕的罪犯蜡块、切片、组织等,为侦查提供线索为审判提供证据,生物性检材是经历了环境调节作用的人体组织与器官或人体体液、分泌物、排泄物及由它们形成的生物性斑痕，由于环境的作用使生物性检材具有不确定性，对法医鉴定人是一个严峻的考验。,生物性检材的法医学特点,血痕：现场地面、墙壁、家具、衣服、凶器、指甲缝等。黑暗现场用鲁米诺喷射（发出荧光）。精斑：可附于衣裤、被褥、草纸、被害人腹壁、大腿和阴毛上。必要时用紫外线照射（银白色带淡紫晕的荧光）毛发：常见于地面、被褥、凶器上；死者手中、口中和衣服；强奸案被害人内衣、外阴和大腿间唾液：现场烟头、口香糖、牙签、饮料容器及咬痕上皮肤及其它脏器组织碎片：可见于被害人或罪犯指甲内；交通事故的车轮、挡泥板、车厢棱角、底盘,生物性检材的寻找、采集、包装和送检,生物性检材的寻找,新鲜血：活体，静脉血，EDTA抗凝；尸体，末梢血管血。4保存或干净纱布、滤纸上晾干血痕：必须同时取周边无斑痕部分做对照小件物品整件提取大件物品切割、刮取泥土上整块取下，衬以消毒棉花于盒内以防震碎体液、分泌液、排泄物、器官组织奸杀或死因不明女性尸体：取阴道内容物，必要时取肛门、会阴、口腔标本毛发用镊子夹取，勿损坏附着物皮肤、碎骨、脏器碎块及烟头，用镊子或手套收集，不可加防腐剂,生物性检材的采集,低温或晾干保存，尽快送检纸带、纱布或玻璃容器包装或存放，勿用塑料膜袋包装物外注明物品名称、来源、数量、采集日期等送检同时附必要的对照样本，如被害人或嫌疑人的血液、唾液必须附有委托书，且写明送检机关和联系人、送检物品清单、案情介绍、送检目的要求等。,包装和送检,个体识别一般程序,肉眼检查,预试验,确证试验,种属鉴定,个体识别,一个案例引发我的注意,委托鉴定女式内裤裆部明显斑痕是否含精液成分试纸条检测阳性，但阳性区域条带颜色较质控区条带和阳性对照略弱沉渣涂片镜检未发现精子细胞，仅见上皮细胞二步消化法上清和沉渣分别用ID试剂盒扩增，结果：上清一女性基因型，无三带；沉渣无基因型检出Y-STR试剂盒检测无结果,假阳性？,陈森等（2005）“抗P30胶体金免疫试纸条灵敏度和特异性探讨”女性黄体期、服用避孕药或激素药物以及某些疾病时，女性阴道分泌液也可出现弱阳性,精斑鉴定处理,涂片镜检作为精斑检测的常规有无精子估算精子细胞和/或上皮细胞的量试纸条阳性时要考虑有无假阳性可能考虑有混合斑可能且女性成分含量较多时做Y-STR检测,DNA在个体识别中的应用,独一无二：除同卵双生终身不变,基础,不同样本分型结果,不一致,排除同一个体,一致,同一个体,不同个体分型一致,认定同一个体