9.单克隆抗体.ppt

2.2动物细胞工程学，2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体，1 .抗体是由哪些细胞产生的？ 2 .抗体的化学本质是什么，主要分布在哪里？ 导入剧本，温故知新，3 .用传统方法获得抗体的方法是？ 动物体内反复注射抗原，从动物血清中分离出必要的抗体(多克隆抗体)，从抗体、抗体、单克隆抗体和多克隆抗体、抗体的传统生产方法、血清中分离出抗体，以此方法制备抗体的特点：产量低、纯度低、特异性差、灵敏度低。 由多种效应b细胞、动物体内、多种抗体、抗原、一个b淋巴细胞增殖形成的细胞群产生的单一型抗体、1、单克隆抗体的概念、特征：特异性强、灵敏度高。单克隆抗体、单克隆抗体的制备、问题：b淋巴细胞：骨髓瘤细胞：能产生抗体但不能无限增殖、不能产生抗体、以组为单位设计产生单克隆抗体的方案、诱导融合的方法：物理方法：电刺激等化学方法3360、 聚乙二醇(PEG )、生物法：灭活病毒、原理：细胞膜流动性、动物细胞融合：柯氏、米尔斯坦、1984年诺贝尔生理学或医学奖获得者b淋巴细胞与体外可大量增殖的骨髓瘤细胞融合后，得到的融合细胞大量增殖，可产生足够数量的特定抗体。 骨髓瘤细胞，小鼠，(培养基选择)，(抗体检测)，2个过程，杂交瘤细胞，分泌特定抗体的杂交瘤细胞，从培养液中提取，从腹水中提取，抗原注射，细胞合成DNA有d和s两个途径，其中d途径被氨基嘌呤阻断。 人淋巴细胞有这两种DNA的合成途径，一般不分裂增殖。 小鼠骨髓瘤细胞只有d途径，没有s途径，但继续分裂增殖。 小资料：以组为单位，根据以上信息，分析、研究、设计从培养液中提取杂交瘤细胞，在培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖细胞的方法！ 加入氨基嘌呤后，d合成途径被切断，只有d合成途径的骨髓瘤细胞和其融合的细胞不能增殖，而人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的杂种细胞由于能够利用淋巴细胞中的s途径合成DNA而增殖。 找到分离b淋巴细胞(b )的骨髓瘤细胞(g )。 请注意，b淋巴细胞是一系列的。 (B1，B2，B3，bn )第二次筛选：用“多孔培养板”培养杂交瘤细胞系列，在一个孔中只放入一个杂交瘤细胞。 “克隆培养”的各杂交瘤细胞是进行“单一抗体检查”，“阳性检查”的孔内需要的杂交瘤细胞。阳性孔、方法抗原抗体杂交法在单克隆抗体的制备过程中，两次筛选的原理和方法不同。单克隆抗体的应用，(1)作为诊断试剂应用最为广泛，准确、高效、简易、快速，(同位素标记单克隆抗体、肿瘤、心血管畸形等)，乙型肝炎诊断试剂盒，艾滋病诊断试剂盒，早孕诊断试剂盒，(2)用于治疗疾病和运输药物，生物导弹=单克隆特点：疗效好，毒副作用少，作为“生物导弹”的一名女童的头发在放疗和化疗中已经不复存在，白血病化疗1、科学家将小鼠骨髓瘤细胞和某些细胞融合，得到杂交细胞，培养出大量单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合() a .免疫b淋巴细胞b .免疫t淋巴细胞c .免疫t淋巴细胞d .未免疫b淋巴细胞a，加强训练2 .动物细胞融合与植物细胞杂交比较，准确诱导()融合的方法完全相同b .采用的技术手段大致相同c .操作程序可形成大致相同d .杂交细胞d 3.单克隆抗体生产过程中培养的杂交瘤细胞为() a .能从小鼠产生抗体的b淋巴细胞和肝细胞融合的b .小鼠与b淋巴细胞融合的c .小鼠与b淋巴细胞和肌瘤细胞融合的d .小鼠与b淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的d 4.动物细胞融合的一般诱导方法是() A.PEGB .灭活病毒c .电刺激d .离心、b 5 .动物细胞融合技术最重要的用途是() a .远源杂交不亲和b .单克隆抗体c .育种d .杂种细胞