溶血性链球菌

溶血性链球菌，也称为链球菌素，对热和化学毒素敏感，经常引起扁桃体、咽部、中耳和其他感染。它也是肾盂肾炎、产褥热和猩红热的病原体。(1)生物学特性，(2)流行病学，(3)致病性，(5)检查和控制，(4)溶血性链球菌，(1)形态学和染色，(1)链球菌是直径为0.6-1.0m的球形或椭圆形，并以不同长度排列在4-8至20-30个细菌细胞中，其长度与细菌的类型和生长环境有关。在液体培养基中容易形成长链，在固体培养基中容易形成短链。因为链球菌能产生脱支酶，所以在正常情况下，链球菌链不能无限延长。大多数菌株在血清肉汤中培养2-4小时后容易形成透明质酸胶囊，连续培养后消失。该细菌不形成孢子，无鞭毛，易被普通碱性染料染色，革兰氏阳性，经老化培养或嗜中性粒细胞吞噬后革兰氏阴性。2、培养特征为好氧或兼性厌氧菌，营养要求高，在普通培养基上生长差，需要补充血清、血液、腹水，大多数菌株需要核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37，最适生长温度为20-42，最适pH值为7.4-7.6。在血清肉汤中容易生长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀。血板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径为0.5-0.75毫米的小菌落，不同菌株的溶血作用不同。3、生化反应分解葡萄糖，产酸不产生气体，乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蘑菇糖、七糖的分解能力因菌株而异。通常，菊粉不分解，不被胆汁溶解，对接触酶呈阴性。(1)核蛋白抗原，或p抗原，没有特异性，对所有种类的链球菌都是一样的。(2)多糖抗原或C抗原，一种基团特异性抗原，是细胞壁的多糖成分，可用稀盐酸等提取。(3)蛋白抗原或表面抗原位于C抗原的外层，具有类型特异性，可分为M、T、R和S四种不同的抗原成分，致病性与M抗原有关。根据链球菌是否在血液培养基上生长和繁殖，以及它是否是溶血性的和它的溶血性，分类分为三类。(1)-溶血性链球菌：在菌落周围有一个1-2mm宽的草绿色溶血环，也称为溶血。这种链球菌主要是条件致病菌。(2)-溶血性链球菌：在菌落周围形成一个无色的溶血环，宽2-4毫米，边界清楚，完全透明，也称为B溶血。因此，这种细菌也被称为溶血性链球菌。这种细菌是高致病性的，经常在人类和动物中引起各种疾病。(3)-链球菌：它不产生溶血素，并且在菌落周围没有溶血环。它也被称为c型或非溶血性链球菌。它是非致病性的，通常存在于牛奶和粪便中，偶尔会引起感染。溶血性链球菌广泛分布于自然界，存在于水、空气、灰尘、粪便以及健康人和动物的口腔、鼻腔和咽喉中。它们可以通过直接接触、飞沫传播，或者通过皮肤和粘膜伤口感染。牛奶、肉类、鸡蛋及其产品等受污染的食物也会感染人类。人和动物的上呼吸道感染和化脓性感染部位的患者往往成为食物污染的污染源。一般来说，溶血性链球菌经常通过以下方式污染食物：1。食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手和面部化脓性炎症引起的食品污染；2、食品加工前已带菌，奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓，对牛奶和肉类的某些部位造成身体污染；3、熟食产品因包装不良而被食品污染。流行病学溶血性链球菌常可引起皮肤和皮下组织化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎暴发性流行、新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和肾小球肾炎。溶血性链球菌的致病性与其毒素和侵入酶有关。主要有以下几种：1 .链球菌溶血素：溶血素有O和S两种，O是一种含-SH的蛋白质，具有抗原性，S是一种小分子量的小分子多肽，因此不具有抗原性。2.发热毒素：曾被称为皮疹毒素或猩红热毒素，是人类猩红热的主要毒性物质，可引起局部或全身皮疹、发热、疼痛、恶心、呕吐和全身不适。透明质酸酶，也称为扩散因子，可以分解细胞基质中的透明质酸，从而增加细菌的侵袭力，使细菌易于在组织中扩散。4.链激酶：也称为链球菌纤溶酶，它可以将血液中的纤溶酶原转变为纤维蛋白，并具有促进细菌在组织中扩散的功能。这种酶耐热，能在100下保持活性50分钟。5.链球菌脱氧核糖核酸酶，也称为链球菌脱氧核糖核酸酶，可以稀释脓液并促进细菌的传播。6.白细胞杀伤：它能使白细胞失去动力，变成球形，最后膨胀破裂。该菌的抗性一般不强，在60下30分钟即可杀灭，对常用消毒剂敏感，可在干燥的灰尘中存活数月。链球菌B对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素和磺胺敏感。青霉素是链球菌感染的首选药物，耐药性很小。设备和材料1冰箱：04。2恒温培养箱：36和1。3恒温水浴：36土壤1。4显微镜：10 * 100 *。5均质器或灭菌砂浆。离心机：4000转/分钟。7盘药物天平：0g5009，精确至0.5g 8个灭菌试管：10mm*100mm，l6mm*160mm。9灭菌吸管：1毫升(带0.01毫升刻度)，5毫升，10毫升(带1毫升刻度)。10个灭菌锥形瓶：100毫升。11个无菌培养皿：直径90毫米。12个无菌棉签、镊子等。培养基和试剂1葡萄糖肉膏肉汤：根据GB/T4789.28-2003，4.1。将1%的葡萄糖加入肉提取液中。2浸肉肉汤：根据GB/T4789.28-2003条例4.1。3.泡菜肉汤：根据GB/T4789.28-2003，4.62。4血琼脂平板：根据GB/T4789.28-2003法规4.6。五个人的血浆。60.25%氯化钙。70.85%无菌生理盐水。8 .杆菌皮肤药敏纸(含0.04单位)。泡菜肉汤含1%胰蛋白胨和200毫升1: 25000结晶紫盐溶液10毫升1: 800硝酸钠溶液10毫升去纤维兔血(或羊血)10毫升制备方法：将上述灭菌组分按无菌程序依次混合，装在无菌试管中，每管约2毫升，放入冰箱备用。血盘：菌落呈灰白色，半透明或不透明，表面光滑。它有直径约0.5-0.75毫米的乳状光，是一个有圆形突起的小群体。溶血性链球菌B被2-4毫米清晰无色透明的溶血环包围。制备方法：取营养琼脂(PH7.6)，加热溶解，冷却至45-50，灭菌，每100毫升营养琼脂中加入5-10毫升灭菌去纤维羊血或兔血，轻轻摇匀，立即倒入平板或分装试管中，做成斜面备用。配方：pH7.4-7.6 100毫升大豆粉琼脂5-10毫升去纤维羊血、血琼脂平板(BA)、血琼脂也可由其它营养丰富的基础培养基制成。样品处理：取25克固体(或25毫升液体)样品，加入225毫升灭菌生理盐水制成悬浮液。2.将5mL悬液接种于50毫升葡萄糖肉汁肉汤中，或直接接种于血平板上(如果样品被严重污染，可同时接种5mL至泡菜肉汤)。在36培养24小时，接种血平板，在36孵育24小时，搅拌带有B型溶血性圆形突起的细菌落，在血平板上分离成纯菌落，观察培养特性、溶血、革兰氏染色和液固形态，进行链激酶试验和杆菌肽敏感性试验。(1)检验：葡萄糖肉膏肉汤，原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠保持平衡的渗透压；磷酸二氢钾用作缓冲剂。葡萄糖提供了碳源。配方(每升):最终ph值为7.50.2，将500克去筋膜的无脂碎牛肉加入1000毫升蒸馏水，混合后放入冰箱过夜，除去液面上的浮油，在水中煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用法兰绒过滤，压榨收集所有滤液，加水补充原来的量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH 7.4-7.6，煮沸，过滤，开瓶，121高压灭菌30分钟。杆菌肽敏感性试验：将典型菌落的菌液涂于血平板上，用无菌镊子夹住每张含0.04单位的杆菌肽纸，放于上述平板上，在36孵育18-24小时。如果有任何抑菌圈，它就会呈阳性。已知的阳性菌株用作对照。链激酶试验：吸收0.2毫升草酸钾血浆，加入0.8毫升灭菌生理盐水，混匀，然后加入0.5毫升18-24小时36的链球菌肉汁肉汤培养物和0.25毫升0.25%的氯化钙，混匀，置于36水浴中10分钟，血浆混合物自行凝固，观察血凝块再次完全溶解的时间，完全溶解为阳性，若24h后仍不溶解，则为阴性。同时，肉提取物肉汤用作阴性对照，已知的链激酶阳性菌株用作阳性对照。(2)控制1。防止细菌污染各种食物