常见肿瘤动物模型PPT

常见肿瘤动物模型列表，肿瘤动物模型，1，自发性肿瘤动物模型，2，诱导性肿瘤动物模型，3，移植性肿瘤动物模型和研究方法4，人肿瘤异种移植肿瘤模型，1，自发性肿瘤动物模型，定义：实验动物中自然发生的肿瘤不经人实验治疗而成为自发性肿瘤，选择实验动物：发病率高的实验动物，一般选择小鼠，肿瘤在常见肿瘤模型小鼠中的自然发生率，自发性肿瘤动物模型的优点，自然发生，肿瘤发生和细胞学特征与人肿瘤相似。2.便于慢性治疗和综合治疗。3.发生条件是自然的，通过仔细观察和研究，可以发现新的环境致癌因素和其他致癌因素。可以着重观察遗传因素在肿瘤发生中的作用。自发性肿瘤动物模型的缺点，肿瘤的发生是不均匀的。很难在短时间内获得大量的肿瘤材料，这需要很长的时间和大量的资金。患有肿瘤的动物的肿瘤生长率差异很大，难以评估。诱发肿瘤的动物模型，定义：在实验条件下使用致癌因子在动物中诱发肿瘤的动物模型。原理：利用外源性致癌因子引起的异常细胞遗传特性，表现出异常生长和高增殖活性，形成肿瘤。有许多种动物被用来诱发实验性肿瘤。啮齿动物是最常用和最广泛使用的，包括大鼠、小鼠、豚鼠等。诱导肿瘤模型的动物选择。物理方法：通过放射性物质、辐射照射或局部注射放射性同位素形成肿瘤。化学方法：使用化学致癌物，如苯并芘、甲基胆蒽、联苯胺、亚硝胺、黄曲霉毒素等。生物学方法：致癌作用是由能诱发动物肿瘤的病毒引起的，如小鼠白血病病毒和SV40病毒。为了通过转基因方法在动物中诱导肿瘤，可以根据不同的启动子类型选择不同的肿瘤产生器官，例如使用乳球蛋白启动子的SV40T抗原的转基因小鼠，其可以诱导乳腺癌或胰腺癌。MMTV-Wnt-1转基因小鼠乳腺癌发病率高。用于建立诱发肿瘤的动物模型的方法，原位诱发的致癌物直接与动物靶组织或靶器官接触以诱发组织或器官中的肿瘤。异位诱导是动物组织或器官的肿瘤，是通过将与致癌物接触的动物组织或器官埋在动物或另一正常动物的皮下而产生的。建立诱发肿瘤、致癌物、致癌物动物模型的方法，1。涂片法(皮肤癌)，2。口服给药方法(消化道或消化腺)，3。注射法，4。气管灌注法(肺癌)，5。穿线法，6。埋藏法，致癌物诱导肿瘤模型的给药途径，1。简介：在实验工作中诱发肺癌比诱发其他肿瘤困难得多，癌症诱发率低。呼吸给药方法经常诱发各种肺外肿瘤而不是肺肿瘤。方法： DEN诱发小鼠肺癌：每周一次皮下注射1% DEN水溶液，剂量为56 mg/kg。(2)氨基甲酸乙酯诱导的肺腺癌：每隔3-5天向小鼠(品系A，1-1.5月龄)的每个腹腔内注射0.1-0.3毫升马拉坦生理盐水溶液。每只小鼠的总剂量约为100毫克，持续2-3个月。诱导肿瘤模型的一个例子是。特征】:DEN总量为868毫克，观察时间为100天，癌症发病率可达40%，DEN总量为1176毫克，观察时间为半年，癌症发病率可达94%，其中支气管鳞状细胞癌占41%。(2)氨基甲酸乙酯注射后3个月肺腺癌发病率为100%，且多为多发性。诱发肺部肿瘤的部位和组织类型与人肺部肿瘤相似。2。食道癌(癌瘤)简介：亚硝胺在体内代谢产生重的碳烷，碳烷将核酸或其他分子烷基化，从而导致癌症。口服或胃肠外给予不对称亚硝胺可诱发大鼠食管癌。方法：甲基苄基亚硝胺(MBNA)诱发食道癌：将1% MBNA溶液加入少量粉状饲料中，搅拌均匀。一个月大的Wistar大鼠可以自由进食。剂量为每天0.75 1.5毫克/公斤。二氢黄樟素诱导大鼠食管癌模型：小剂量(1/2500 1/10000)黄樟素诱导率为20% 70%。特征及应用：在MBNA诱发的食管癌中观察到食管鳞状细胞癌组织，但转移罕见。亚硝胺具有高度致癌性，一旦大剂量服用，就会致癌。3。肝癌(癌转移)简报):常用的引起肝癌的口服物质包括乙基亚硝胺(DEN)、4-2甲基氨基偶氮苯(DBA)、2-乙酰氨基酸(2AAF)、亚氨基偶氮甲苯OAAT和黄曲霉毒素。方法： DEN诱发大鼠肝癌：给一组体重约250克的大鼠灌服0.25-1毫升0.25% DEN水溶液或稀释10倍，置于饮料瓶中，每天2-10毫升/公斤，免费饮用。喂养大鼠约半年黄曲霉毒素诱发大鼠肝癌：每月将0.001-0.015毫克/千克混合到饲料中，喂养约6个月。特征和应用: DEN诱导的大鼠致癌率为70%，DBA诱导的致癌率为60%，黄曲霉毒素诱导的大鼠肝癌发生率为80%。从病因学的角度来看，这种方法类似于人类肿瘤，因此这种类型的模型通常用于深入研究肿瘤特征。4。宫颈癌(Carvicalcarcinoma)将一个含0.1毫克二甲基胆蒽(DMC)的棉纱布结穿入雌性小鼠的颈部并固定缝线。观察约半年后，处死动物，取宫颈组织。可移植肿瘤的动物模型及其研究方法，定义：模型是指选择将动物或人的肿瘤移植到相同或不同的动物体内连续传代形成可移植肿瘤动物的肿瘤实验动物：可移植肿瘤的常见动物是小鼠、大鼠和仓鼠的肿瘤细胞的选择：在筛选抗癌药物时，最好选择3种肿瘤株、肉瘤、腹水瘤和白血病株。在众多移植肿瘤中，小鼠Lewis肺癌、小鼠黑色素瘤B16和小鼠白血病P388是目前最有价值和应用最广泛的。接种方法(无菌操作)，1。实体瘤、实体瘤接种法：肿瘤块接种法、肿瘤细胞悬液接种法、培养细胞接种法、活细胞接种法等。肿瘤块接种法，选择接种后7-10天生长状态良好的肿瘤衍生动物，颈椎脱臼处死，手术部位皮肤消毒。切开皮肤，剥离肿瘤进行接种，去除非肿瘤组织和坏死组织，选择生长良好但无变性和坏死的肿瘤组织、红色(黑色素瘤为黑色或黑紫色)和鱼肉，在无菌盘中切成2mm3小块。盘子放在冰块上，盘子里放一点消毒过的PBS或其他营养液。用无菌套管针抽吸肿瘤，并在同一受体动物的腋窝下皮下接种(接种部位的皮肤应首先消毒)。也可以将肿瘤取出并切成小块，在受体动物的腋下切开一个小开口，用无牙眼钳夹住肿瘤块并送入切口。腋窝的皮肤松弛，使得肿瘤变得更大，延长了宿主动物的寿命。接种操作的时间应尽可能缩短，并应在肿瘤获得至接种结束的30分钟内完成。当每次接种的动物数量大时，可以使用肿瘤细胞悬液接种方法。具体方法如下：无菌操作取出肿瘤块，将多个肿瘤块混合，切成小块，放入玻璃匀浆器中，加入无菌生理盐水，单向旋转研磨，过过滤网，加入生理盐水，稀释成1:3-1:4(肿瘤g:生理盐水ml)的肿瘤细胞悬液，用台盼蓝染色法计数活细胞数，用1毫升注射器注入接种部位，接种0.2毫升(一般含11000毫升通常在腋下接种，每只动物可以选择多个接种点。肿瘤细胞悬液接种法，对数生长期细胞用0.25%胰蛋白酶消化去壁，然后用PBS或生理盐水以1000r/min离心10分钟，洗涤两次以洗去细胞培养液中的胰蛋白酶和血清等成分，用台盼蓝染色排斥法计数活细胞数，肿瘤用生理盐水稀释至一定浓度的细胞悬液，将细胞悬液置于冰上， 用1毫升注射器在每个接种点接种0.2毫升(包括1106-1107个细胞)，并尽快注射到接种部位。 2.腹水肿瘤和肿瘤细胞的冷冻保存和复苏。肿瘤细胞或肿瘤菌株的冷冻保存能够使它们长期使用，防止退化或变异，并保持不同代细胞的特征。一般在液氮中保存12年，细胞存活率可达80%90%。1.冷冻保存方法：取对数生长期增殖旺盛的细胞，消化，离心，用胰蛋白酶洗涤，用7份培养液、2份小牛血清和1份二甲基亚砜制备(15)*106细胞/ml细胞悬液，移入细胞冷冻保存管。将冷冻保存管在4放置30分钟，-20放置4小时，-70过夜，然后放入液氮中。2.复苏方法：取出冷冻保存管，迅速放入3840的水浴中，保持振荡，使其在1分钟内完全融化，以500 800转/分钟离心5分钟，弃去上清液，加入培养液，移入培养瓶培养。第二天更换培养基，然后按照常规培养。人肿瘤异种移植瘤模型采用人肿瘤细胞，在病理组织形态和遗传特征上与人肿瘤相同，可用于直接研究人肿瘤的生物学特性和抗肿瘤药物。常用宿主动物：裸鼠和C57BL/6小鼠，作为移植宿主的裸鼠，实验动物：BALB/c裸鼠，6-8周龄，体重21-22g，在无SPF特异性病原体的条件下繁殖和生长。肿瘤来源：来源大致可分为两种类型，一种是人类肿瘤细胞系，另一种是来源于快速人类肿瘤组织的癌细胞。常用的人癌裸鼠细胞系、接种方法和最佳生长期为：结肠癌HCT-8(匀浆，3周)、胃癌MGC-803(组织块，4-5周)、肝癌BEL-7402(组织块，4周)、小细胞肺癌LTEP-SM1(组织块，4-5周)、乳腺癌MCF-7(组织块，4-5周)和其他手术方法(如人胃腺癌SGC-7901): 1。将移植的肿瘤在超净台上切割成2 3m 3大小的肿瘤块，用套管针在BALB/c裸鼠右腋下接种肿瘤。2.接种24小时后，随机分组，开始给予试验药物进行实验治疗。测试期约为6周。3.停药后第二天称肿瘤，剥离肿瘤并称重，计算肿瘤重量抑制率。观察指标和疗效评价：1。在肿瘤接种后约6周，动物形成超过1g的肿瘤块(平均肿瘤重量),这表明肿瘤2的移植成功。如果20%小鼠的肿瘤重量小于400毫克，则表明肿瘤生长不良3。在药物治疗期间，如果给药组小鼠的死亡率超过20%或肿瘤切除后的平均体重超过15%(自我控制)，则表明该药物具有毒性。根据给药后的肿瘤重量抑制率来评价药效，当肿瘤重量抑制率大于30%时，经统计学处理后组间差异有统计学意义，表明受试药物有体征。重复3次，如果疗效稳定，说明药物有一定疗效。注意：肿瘤模型形成需要很长时间，30 40天甚至更长。在异种移植肿瘤实验中，还有另一种直立移植，即根据人体内相应器官的主要位置，将人体癌组织或细胞接种到相应器官中，这不同于通常的皮下接种(异位接种)。免疫抑制的大鼠被用作移植宿主。实验动物：体重120 160克的Wistar大鼠(如人胃癌细胞系):1只。老鼠被分开饲养。皮下注射200mg/kg体重的具有免疫抑制作用的阿糖胞苷，全身照射10Gy(1000rad)60Co 2