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离子交换色谱,使用和分析,演示者:徐显荣编辑:谢晓敏数据收集:刘建娜李春丰甘泉数据整理:李阳凡刘延08中药分析和鉴定(1)当移动相通过成分电离产生的离子通过固定相时,成分离子与树脂上的可交换离子组可逆转换。根据树脂亲和力,成分离子分离。主要用于分离氨基酸、多肽、核酸、核苷等离子或可解离的化合物。使用离子交换色谱:生物大分子的分离纯化,Po ZDo=Pb ZDb,重要性,Po:流动相溶质浓度;Pb:填料表面吸附溶质浓度;Do:流动相洗脱剂浓度;Db:填充表面洗脱剂浓度;Z:蛋白质在吸附过程中在填充物表面替换的洗脱液的数量;离子交换色谱法快速纯化8-淀粉酶,离子交换色谱研究,利用合成强阴离子交换柱分离a-淀粉酶粗产物,活性回收率提高96%,活性比388ug/mg蛋白纯度提高30倍。该方法的研究成功地为大规模制造高纯度a-淀粉酶提供了新的工艺路线。高纯度8-淀粉酶可用作测定生物作用特性、酶反应机制、生化反应平衡常数的酶试剂。1.0摘要:2.0实验部分,2.1标准酶液制造的微量平衡,准确地将5mg高纯度a-淀粉酶试剂在小型离心管中正确添加1.0ml水,溶解后在1300r/min的高速离心机中离心5min。这种液体相当于1062u/ml活性,3.0结果和讨论,3.1洗脱剂为了获得高洗脱效率,将0.02mol/LTris-2mol/LNacl(PH6.0)系统溶出剂(Tris-Tris-trie)在洗脱液中,离子强度对洗脱效率的影响可以归结为离子交换平衡转移,这种色谱行为表明固定相具有符合离子交换色谱洗脱规律的典型负离子交换特性。但是在2.0mol/L以上,随着盐浓度的增加,溶出能力下降。这种异常现象可能是离子交换柱的多功能特性造成的。实验表明,离子交换柱不仅具有离子交换,而且具有一定的疏水作用。而且,这种疏水性随着溶液的离子强度而变化。如果洗脱剂浓度大于2.0mol/L,溶液表面张力太高,离子交换剂的疏水性作用明显,蛋白质疏水性结合用得到加强,吸附的蛋白质难以溶解,活性回收率下降。因此,如果选择Nacl浓度为2.0 mol/L .3.3 ph,对活性回收率的影响,概括来说,溶液中所有能电离的物质通常可以用离子交换色谱分离。它不仅适用于无机离子混合物的分离,还可以用于生物(如氨基酸和蛋白质)的大分子等有机物
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