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文档简介
1暴露表面与固定,目的充分暴露表面,加以固定使之保持完好组织或器官的自然表面(如器管或肠腔的自然表面)酶消化,低频超声振动,生理盐水喷射冲洗清除表面附着的粘液或富于蛋白质的液体细胞内部结构冷冻断裂,蚀刻暴露结构,戊二醛(GA)与四氧化锇两步固定(1)1-3%GA1-2h(2)dd水冲洗(3)1%四氧化锇1h(4)dd水冲洗*暴露表面可在固定过程或固定后清洗过程中完成,2干燥(临界点法),在空气中自然干燥表面张力破坏表面微细结构(水,乙醇,丙酮)临界点干燥临界状态,表面张力水的表面有一层膜叫表面层。它处在气体与液体之间。液体表面层由于跟空气接触,与液体内部情况有所不同。表面层里分子的分布要比液体的稀疏些,也就是分子间的距离比液体内部的大一些。在液体内部,分子间的引力基本上等于斥力;在表面层中,由于分子间的距离比液体内部大,分子间的相互作用表现为引力。这种液体各部分间相互吸引的力,叫表面张力。在表面张力的作用下,液体表面有收缩到最小的趋势。,临界状态,临界条件,水:T=375C,P=218atmCO2(L):T=31.4C,P=72.9atm水乙醇醋酸异戊酯CO2(l),置换:醋酸异戊酯置换乙醇,0.5h,脱水:,临界点干燥:,临界点干燥,样品置于样品室;样品室充以液态CO2,15C,15min;40C,5min;放出CO2气体。,3导电处理,目的将射入的电子导走,将热量导走,同时增加二次电子产率,在标本与金属底座之间形成连续的金属膜,金属底座与仪器外壳连接,接地,导电胶:石墨乳胶,掺银粉或铝粉的火棉胶金属(膜):Au,Au-Pd,Pt,Pt-C,真空喷镀仪,离子镀膜仪,镀膜厚度,取材并把表面冲洗干净双固定GA,OsO4
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