第九章-香豆素PPT课件

.,1,第九章香豆素,.,2,本节内容,概述,基本知识,同步测定,本节小结,应用实例,实训项目,.,3,概述,含义,分布,作用,香豆素,香豆素母核苯骈-吡喃酮。从结构上香豆素可看作是顺式邻羟基桂皮酸的内酯。,.,4,概述,分布,含义,作用,香豆素,分布于：伞形科、芸香科、豆科、木犀科、菊科、兰科、茄科、瑞香科等科植物中常见中药：茵陈、秦皮、蛇床子、补骨脂、白芷、前胡等中均含有香豆素。,.,5,概述,作用,分布,含义,香豆素,香豆素类成分有多方面的生物活性。1抗菌消炎作用2光敏作用3松弛平滑肌作用4抗凝血作用5其他作用,.,6,性质,.,7,香豆素,.,8,香豆素,1、简单香豆素,来源于秦皮，是治疗痢疾的有效成分。,七叶内酯R=H七叶苷R=glc,基本结构,简单香豆素,异香豆素,呋喃香豆素,吡喃香豆素,其他香豆素,.,9,香豆素,2、呋喃香豆素（1）6，7-呋喃香豆素（线型）,基本结构,又称补骨脂内酯来源于豆科植物补骨脂（PsoraleacorylifoliaL.）的成熟果实中，具有光敏活性,（2）7，8-呋喃香豆素（角型）,基本结构,又称白芷素（angelicin）来源于豆科植物补骨脂（PsoraleacorylifoliaL.）的成熟果实中，具有中枢抑制、解痉作用。,简单香豆素,异香豆素,呋喃香豆素,吡喃香豆素,其他香豆素,.,10,香豆素,3、吡喃香豆素（1）6，7-吡喃香豆素（线型）,（2）7，8-吡喃香豆素（角型）,来源于芸香科植物美洲花椒中，具有解痉作用、抑制癌细胞作用。,来源于伞形科植物印度邪蒿的果实中，具有显著的抗真菌作用。,花椒内酯,邪蒿内酯,简单香豆素,异香豆素,呋喃香豆素,吡喃香豆素,其他香豆素,.,11,香豆素,4、异香豆素,仙鹤草内酯,来源于蔷薇科植物日本仙鹤草（AgrimoniapilosaLedeb.var.japonicaNakai）的根中，具有松弛肠张力的作用，对肠的蠕动也有抑制作用。,简单香豆素,异香豆素,呋喃香豆素,吡喃香豆素,其他香豆素,.,12,香豆素,5、其他类香豆素,来源于豆科植物印度黄檀（DalbergiasissooRoxb.）的心材中，具有微弱的抗凝血作用及显著的增加冠脉流量的作用。,黄檀内酯,西瑞香素,来源于瑞香科植物南岭荛花（WikstroemiaindicaC.A.Mey.）的根、茎中，具有改善血流量、抗肿瘤作用。,简单香豆素,异香豆素,呋喃香豆素,吡喃香豆素,其他香豆素,.,13,.,14,性状,溶解性,与碱反应,香豆素,（一）性状,显色反应,.,15,性状,溶解性,与碱反应,香豆素,（二）溶解性,显色反应,.,16,性状,溶解性,与碱反应,香豆素,（三）与碱的作用,显色反应,与浓碱共沸或共熔融，a-吡喃酮开环生成酚类或酚酸.,.,17,性状,溶解性,与碱反应,香豆素,1异羟肟酸铁反应,显色反应,在碱性条件下，内酯环开环，与盐酸羟胺中的羟基缩合生成异羟肟酸在酸性条件下与三价铁盐结合而显红色，作为鉴别反应。,.,18,香豆素,2、三氯化铁试剂反应：条件：有酚羟基的香豆素，试剂：在酸性条件下可与三氯化铁试剂，结果：一般为污绿色至蓝绿色。,性状,溶解性,与碱反应,显色反应,.,19,香豆素,3、Gibbs试剂、Emerson试剂反应：条件：香豆素结构中酚羟基对位无取代或碱性条件下C6位上没有取代时，试剂：Gibbs试剂（2，6-二氯（溴）苯醌氯亚胺）Emerson试剂反应（4-氨基安替比林-铁氰化钾）结果：Gibbs试剂反应蓝色化合物；Emerson试剂反应红色化合物。作用：判断香豆素C6位是否有取代基。,性状,溶解性,与碱反应,显色反应,.,20,提取和分离,（一）系统溶剂法（二）碱溶酸沉淀法（三）水蒸气蒸馏法（四）色谱分离法,.,21,(一）系统溶剂法（根据极性大小）,原药材用乙醇提取后，依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、萃取，得到不同极性的成分。,药材,乙醇提取物,石油醚（脱脂）,丙酮（极性）,乙酸乙酯（中等极性）,正丁醇（中等偏大）,乙醚（小极性）,.,22,（二）碱溶酸沉淀法,原理：香豆素可被热的稀碱液皂化溶解，酸化后环合沉淀析出。,药材,0.5%NaOH,提取液,乙醚萃取,乙醚液（脂杂质）,碱水液,加酸调至中性,香豆素析出沉淀,注意:所加碱液的浓度不宜太浓，加热时间不宜过长，温度不宜过高，以免破坏内酯环。,.,23,（三）水蒸气蒸馏法,小分子的香豆素具有挥发性，采用水蒸气蒸馏法进行提取，盐析，乙醚萃取，回收乙醚后，香豆素晶体析出。,.,24,（四）色谱分离法,结构相似的化合物，常用此法分离。1）硅胶石油醚-乙酸乙酯,氯仿-甲醇,氯仿-丙酮,正丁醇-醋酸-水,乙酸乙酯-醋酸-水2）Rp-18（反相）甲醇-水,丙酮-水,乙腈-水,乙醇-水3）SephadexLH-20甲醇-水,丙酮-水,乙腈-水,乙醇-水,.,25,四、检识方法,（一）荧光（二）显色反应*（三）色谱检识,.,26,（一）荧光,羟基香豆素在UV灯下显蓝色荧光,在碱液中荧光增强。荧光的有无或强弱与分子中取代基的种类和位置有关:C-7位引入羟基有强烈的蓝色荧光，加碱后变绿色荧光；如C-8位再引入羟基,则荧光减弱或不显荧光。,.,27,(二）显色反应*,1.异羟肟酸铁反应2.酚羟基反应（重氮化反应）3.Gibbs反应4.Emerson反应,.,28,香豆素,本节小结,.,29,香豆素,.,30,香豆素,.,31,理化鉴别,溶剂法：利用溶解性,碱溶酸沉法：利用内酯环碱水解的性质,水蒸气蒸馏法：利用游离小分子香豆素挥发性的性质,色谱法,提取,分离,鉴定,色谱法,薄层色谱法鉴定,香豆素,.,32,.,33,单选,1可发生异羟肟酸铁反应的母核为（）A.苯骈-吡喃酮B.对羟基桂皮酸C.反式邻羟基桂皮酸D.顺式邻羟基桂皮酸E.苯骈-吡喃酮,参考答案,.,34,单选,4游离香豆素可溶于热的氢氧化钠水溶液，是由于其结构中存在（）A.甲氧基B.亚甲二氧基C.内酯环D.酚羟基对位的活泼氢E.酮基,参考答案,.,35,单选,5下列化合物属于香豆素的是（）A.七叶内酯B.连翘苷C.厚朴酚D.五味子素E.牛蒡子苷7Gibbs反应的试剂为（）A.没食子酸硫酸试剂B.2，6-二氯（溴）苯醌氯亚胺C.4-氨基安替比林-铁氰化钾D.三氯化铁铁氰化钾E.醋酐浓硫酸,参考答案,.,36,单选,87-羟基香豆素在紫外灯下的荧光颜色为（）A.红色B.黄色C.蓝色D.绿色E.褐色9香豆素的HNMR中化学位移3.84.0处出现单峰，说明结构中含有（）A.羟基B.甲基C.甲氧基D.羟甲基E.醛基10香豆素与浓度高的碱长时间加热生成的产物是（）A.脱水化合物B.顺式邻羟基桂皮酸C.反式邻羟基桂皮酸D.裂解产物E.醌式结构,参考答案,.,37,多选,二多项选择题1下列含木脂素类成分的中药是（）A白芷B厚朴C补骨脂D五味子E牛蒡子2七叶苷可发生的显色反应是（）A异羟肟酸铁反应BGibbs反应CEmerson反应D三氯化铁反应EMolish反应3小分子游离香豆素具有的性质包括（）A有香味B有挥发性C升华性D能溶于乙醇E可溶于冷水,参考答案,.,38,多选,4香豆素类成分的荧光与结构的关系是（）A香豆素母体有黄色荧光B羟基香豆素显蓝色荧光C在碱溶液中荧光减弱D7位羟基取代，荧光增强E呋喃香豆素荧光较强5游离木脂素可溶于（）A乙醇B水C氯仿D乙醚E苯,参考答案,.,39,多选,6香豆素类成分的提取方法有（）A溶剂提取法B活性炭脱色法C碱溶酸沉法D水蒸气蒸馏法E分馏法7区别橄榄脂素和毕澄茄脂素的显色反应有（）A异羟肟酸铁反应BGibbs反应CLabat反应D三氯化铁反应EMolish反应,参考答案,.,40,多选,8属于木脂素的性质是（）A有光学活性易异构化不稳定B有挥发性C有荧光性D能溶于乙醇E可溶于水9木脂素薄层色谱的显色剂常用（）A1%茴香醛浓硫酸试剂B5%磷钼酸乙醇溶液C10%硫酸乙醇溶液D三氯化锑试剂E异羟肟酸铁试剂10香豆素类成分的生物活性主要有（）A抗菌作用B光敏活性C强心作用D保肝作用E抗凝血作用。,参考答案,.,41,问答,三问答题1简述碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分的基本原理，并说明提取分离时应注意的问题。,参考答案,参考答案,2写出下列结构，并用化学方法鉴别他们。（1）6，7-二羟基香豆素（七叶内酯）（2）7-羟基香豆素（伞形花内酯）（3）7-羟基-6-葡萄糖苷（七叶苷）（4）补骨脂内酯,.,42,问答,3民间草药窝儿七中含有抗癌成分鬼臼毒素、脱氧鬼臼毒素、脱氢鬼臼毒素、山萘酚等成分，试设计提取其总木脂素的流程，若用硅胶色谱法分离，分析三者的Rf值大小顺序。,鬼臼毒素R=OH脱氢鬼臼毒素脱氧鬼臼毒素R=H,参考答案,.,43,问答,4写出异羟肟酸铁反应的试剂、反应式、反应结果以及在鉴别结构中的用途。5设计从中药北细辛中提取分离l-细辛脂素和l-芝麻脂素的工艺流程。,l-芝麻脂素l-细辛脂素,参考答案,参考答案,.,44,.,45,实训,实训项目项目一：秦皮中七叶内酯和七叶苷的提取分离和鉴定实训目的能根据实训指导从秦皮中提取和分离七叶内酯和七叶苷能熟练进行连续回流、减压蒸馏、萃取、抽滤、色谱等操作能正确判断薄层色谱、显色反应的结果实训器材秦皮粗粉95%乙醇氯仿醋酸乙酯甲醇10%氢氧化钠溶液7%盐酸羟胺甲醇溶液1%氢氧化钾甲醇溶液盐酸1%三氯化铁试液硅胶HCMC-Na板重氮化对硝基苯胺回流装置分液漏斗常压蒸馏装置抽滤装置,.,46,实训,操作原理秦皮中的主要成分为七叶内酯和七叶苷，具有香豆素苷和苷元的通性，本实验根据七叶内酯和七叶苷均可溶于乙醇，可用乙醇提取，二者的分离可利用在乙酸乙酯中溶解度的不同进行。二者的鉴别，主要利用荧光性、显色反应和色谱方法进行。,提取流程见:电子挂图8-1,电子挂图8-2,.,47,实训,2鉴定（1）显色反应：将上述分得的七叶内酯和七叶苷各少许，分别加1ml甲醇溶解，做下列试验，观察颜色变化，纪录。将上述试液各1滴，分别滴于滤纸上，于254nm的紫外灯下观察荧光，然后，在原斑点上滴加1滴10%氢氧化钠溶液，观察荧光颜色变化。上述试液，分别加入7%盐酸羟胺甲醇溶液23滴，再加1%氢氧化钾甲醇溶液23滴，水浴加热数分钟，至反应完全，冷却，再用盐酸调配pH34，加1%三氯化铁试液12滴，溶液呈红紫红色。,.,48,实训,（2）薄层色谱鉴别样品：自制七叶内酯和七叶苷分别用少许甲醇溶解制成样品溶液。对照品：七叶内酯、七叶苷的甲醇溶液。薄层板：硅胶H-CMC-Na板展开剂：甲苯-乙酸乙酯甲酸（541）显色剂：在紫外光下观察，记录斑点的位置，或用重氮化对硝基苯胺喷雾显色。,.,49,实训,项目二：补骨脂中香豆素的提取分离与鉴定实训目的能根据溶解性采用溶剂法从补骨脂中提取香豆素成分能熟练进行回流、连续回流、减压蒸馏、抽滤、色谱等操作能通过分离补骨脂内酯和异补骨脂内酯，熟悉干柱色谱法的操作技术能正确判断薄层色谱、显色反应的结果实训器材补骨脂种子粗粉70%乙醇石油醚中性氧化铝氢氧化钠溶液稀盐酸7%盐酸羟胺甲醇溶液10%氢氧化钾甲醇溶液1%三氯化铁试液硅胶H-CMC-Na苯石油醚丙酮回流装置、分液漏斗、常压蒸馏装置、抽滤装置、薄层色谱、干柱色谱等设备,.,50,实训,操作原理补骨脂中的香豆素主要是补骨脂内酯和异补骨脂内酯，属于游离的呋喃香豆素，亲脂性较强。本试验利用补骨脂中香豆素易溶于有机溶剂，水中溶解度小的性质，用乙醇，将其从药材中提取。利用二者极性的不同，通过氧化铝干柱色谱进行分离。操作步骤,补骨脂香豆素的提取:如下,.,51,实训,补骨脂种子粗粉100g,用70%乙醇回流提取3次，每次用乙醇200ml,40min,乙醇提取液,减压蒸馏至原体积的1/4，放置析出沉淀，抽滤,沉淀,拌入纯净的细砂，干燥，置索氏提取器中，用石油醚连续回流提取,石油醚提取液,回收石油醚至干，用1015ml乙醇洗涤转移至50ml三角瓶中，放置，析出结晶，抽滤,黄色结晶（补骨脂总香豆素）,.,52,2补骨脂香豆素的分离取色谱用中性氧化铝12g，装于直径1.0cm28cm的色谱柱中。将补骨脂总香豆素0.2g溶于少量甲醇，用0.5g氧化铝吸收，60烘干，加到柱的顶端，用苯-石油醚（41）（每50ml加丙酮15滴）做洗脱剂，洗脱至柱低，置紫外灯下观察，用刀片切取两段蓝色荧光带，分别用甲醇回流提取，过滤，滤液回收溶剂至小体积，洗净，滤取结晶即为补骨脂内脂和异补骨脂内脂。,.,53,3鉴定（1）开闭环试验：取少许样品分别加稀氢氧化钠溶液12ml，加热，观察现象，再加稀盐酸几滴，观察现象。（2）荧光试验：取样品少许，分别溶于少量氯仿中，滴于滤纸上，于254nm的紫外灯下观察荧光。（3）异羟肟酸铁试验：上述结晶少许，置试管中，分别加入7%盐酸羟胺甲醇溶液23滴，再加10%氢氧化钾甲醇溶液23滴，水浴加热数分钟，至反应完全，冷却，再用盐酸调配pH34，加1%三氯化铁试液12滴，观察溶液颜色。,.,54,3鉴定（4）薄层色谱鉴别样品：自制异补骨脂素内脂和补骨脂素内脂的乙醇溶液对照品：补骨脂素内脂和异补骨脂素内脂的乙醇溶液薄层板：硅胶H-CMC-Na板展开剂：苯-石油醚（41）（每50ml加丙酮15滴）显色：紫外灯下观察荧光,.,55,返回题,单项选择题答案：1.A2.B3.A4.C5.A6.D7.B8.C9.C10.D,.,56,返回题,多项选择题答案BCE2.ADE3.ABCD4.BD5.ACDE6.ACD7.CD8.AD9.ABD10.ABDE,.,57,返回题,问答题答案：1答：香豆素类化合物结构中具有内酯环，在热碱液中内酯环开裂成顺式邻羟基桂皮酸盐，溶于水中，加酸又重新