HIV抗体初筛试验PPT参考幻灯片

艾滋病毒抗体筛查试验，郭险峰，山西医科大学第二医院检验科，1。艾滋病病毒抗体检测的目的和要点目的诊断血液筛查和监测的要点。根据目的选择测试方法和策略！严格遵守实验室标准操作程序筛选试验阳性确认试验筛选试验阴性确认试验筛选和确认试验不应进行。应该进行协商。2.艾滋病毒抗体筛查试验。试剂储存温度效应期样品血清血浆全血方法酶联免疫吸附试验(酶联免疫吸附试验化学发光法或免疫荧光法)快速检测(RT)等检测试验明胶颗粒凝集试验(PA)免疫过滤试验免疫胶体金法(硒)，3、免疫胶体金阴性质控区(C)有红色反应线阳性质控区(C)有红色反应线检测区(T)有红色反应线无效质控区(C)无红色反应线、 艾滋病病毒抗体筛查试验，4、艾滋病病毒抗体筛查试验，酶联免疫吸附试验(酶联免疫吸附试验)方法型双抗原夹心试验抗体双抗体夹心试验抗原捕获试验抗体间接试验抗体竞争试验抗原/抗体，5、检测艾滋病病毒抗体的酶联免疫吸附试验方法，第一代：用艾滋病病毒全病毒裂解物作为抗原，应用间接法原理检测艾滋病病毒抗体。 例如，日本富士公司生产的艾滋病毒抗体试剂。第二代利用细菌或真菌中表达的人工重组或化学合成肽艾滋病毒抗原，通过间接法原理检测艾滋病毒抗体。基因重组通常容易在培养基中产生大量同源抗原。该产品是单一目标基因，而不是不同抗原的混合物，比第一代试剂具有更高的特异性。6、酶联免疫吸附法检测艾滋病病毒抗体，第三代：采用合成肽艾滋病病毒抗原(少数重组抗原)，并应用双抗原夹心法原理检测艾滋病病毒抗体。由于血清中的艾滋病病毒-1型抗体、免疫球蛋白样抗体和免疫球蛋白样抗体可通过标记艾滋病病毒抗原来同时检测，这种试剂的灵敏度和特异性优于标记抗人免疫球蛋白的间接方法。基于第三代试剂盒的第四代试剂通过在固相载体上用HIV-1抗原包被抗P24抗原的抗体，可以同时检测HIV-1 IgG、IgM、IgA抗体和P24抗原。灵敏度和特异性增加。8.检测艾滋病病毒抗体的酶联免疫吸附试验试剂必须经过国家食品药品监督管理局的注册和批准。对于在有效期内符合储存要求的试剂，应在2-8的冰箱温度下使用合格的艾滋病病毒抗体检测试剂进行批量检验。使用前，室温应保持平衡。9.应放置检测艾滋病毒抗体的酶联免疫吸附试验试剂。完整的酶联免疫试剂盒包括以下组分：包被有抗原或抗体的固相载体酶标记抗原或抗体酶底物阴性对照物和阳性对照物定性测定样品(及结合物)的稀释液洗涤液酶反应终止液，10、酶联免疫检测试剂、固相载体材料聚苯乙烯固相载体形状微量滴定板，11、检测艾滋病病毒抗体的酶联免疫检测试剂，结合物(酶标记抗体或抗原)辣根过氧化物酶(HRP)底物四甲基联苯胺(TMB)反应后呈蓝色，终止后呈黄色，最佳用于检测艾滋病病毒抗体的酶联免疫吸附试剂，洗涤液通常含有0.05%吐温20磷酸盐缓冲液，终止液通常采用强酸。最常见的2毫升/升硫酸，13，酶联免疫吸附试验，样品收集和保存，样品添加，孵育，洗涤，显色和用停止酶标记仪器测定，14，样品收集和保存防止溶血红细胞溶解时释放具有过氧化物酶活性的物质。在辣根过氧化物酶标记的酶联免疫吸附测定中，溶血样品可能会增加非特异性显色，以避免污染血清样品，血清样品应在新鲜时检测。如果有细菌污染，菌体可能含有内源性辣根过氧化物酶，这也可能产生假阳性反应。在2 8保存一周以上-20，15，送样检查，姓名信息，外螺旋盖(带橡胶垫)血清管，16，17，收到样品时，必须填写样品接收记录如果发现泄漏，立即取出剩余样品，对样品管和包装进行消毒，并报告主管和相关专家检查样品的物理性质。做记录。如果样品不符合试验要求，应安全丢弃样品，同时应立即通知发送者。19.为了接收样本，实验室工作人员在打开样本容器时应小心，以防止内容物溢出。样品处理过程中，应穿戴防护服并在生物安全柜中操作。同时，应佩戴一次性口罩和防护眼镜，防止皮肤和粘膜污染。用过的包装应消毒。20.检测方法必须按照试剂盒说明书(sop)中规定的要求进行操作，包括检测的实验条件，如阳性对照和阴性对照的设置、试剂、样品加载量、孵育时间、反应温度、洗涤程序和次数等。样品质量的冷冻样品应在实验前解冻并混合。血清或血浆样品如溶血、微生物污染、高脂血症、黄疸等。21、样本移液器(包括单头和多头移液器)是实验室中重要的基本仪器，可能会影响测试。它们应至少每年校准一次，并准确地添加到微孔板的底部，以避免添加到微孔板壁的上部，并注意不要溢出或产生气泡。添加后，应及时放入培养箱。检测方法22、检测方法、孵育温度应控制好，时间应控制好，并严格按照说明书将平板密封。为避免蒸发，反应板不应堆叠。反应板应达到水面的1/3，以确保每个板的温度能够快速平衡，并确保温度均匀。23.用于清洗各种试剂盒的测试方法和洗涤液不得混合。按要求稀释。如果洗液结晶，应在融化后进行准备，以检查洗衣机管道是否通畅。如果有渗漏，根据洞的大小调整洗液的量。洗衣机吸收孔中液体越干净，洗涤效果越好。手动清洗板可防止洗液在孔中形成气泡。24.检测方法、显色和终止。当没有使用过期的显影剂和终止溶液时，应避免出现气泡。如果产生更多气泡，将确定假阳性微孔板读数器。25.每天(每次)检查微孔板读数过滤器的波长，检查洗衣机管道是否畅通，是否有液体泄漏，每周清洗仪器表面，保护光学部件，每月清洗时检查每个孔是否与相应的清洗头对准，负压是否符合规定要求。这是确保每个孔、酶联板洗涤器和酶标仪(推荐方法)、26、结果报告、分析结果的平衡和一致洗涤的前提，并且在发布检测报告之前，样品应在试剂盒和外部质量控制产品的结果满足要求的前提下进行分析。试剂盒和外部质控品不合格，样品需要重新检测。审查人员应仔细审查测试结果，并对结果做出结论。发行人应审核、分析、总结、签署、27、结果报告、筛选阴性样本并出具具有法律效力的正式报告。血清应保存1-2个月，以筛选阳性样品，并及时送至确认实验室。如有必要，筛查实验室可出具待复查的艾滋