第一篇　细菌学 第九章 肠杆菌科

,作者:郭晓奎张彦,单位:上海交通大学医学院,第9章,肠杆菌科enterobacteriaceae,第一节概论,第二节埃希菌属Escherichia,第三节志贺菌属Shigella,第四节沙门菌属Salmonella,第五节克雷伯菌属Klebsiella,第六节其他菌属,重点难点,肠道杆菌的生物学特性；致病性大肠埃希菌的种类；肠出血型大肠埃希菌的常见血清型及所致疾病；志贺菌属、沙门菌属的种类、致病物质和所致疾病。,肠出血型大肠埃希菌的常见血清型及所致疾病；描述志贺菌属实验室诊断标本的采集要点、分离与培养鉴定流程；描述肠热症检验标本的采集与分离鉴定。,明确大肠埃希菌在卫生学中的应用；解释肥达试验的原理、应用和结果判定。,概论outline,第一节,医学微生物学（第九版）,少数为致病菌，是胃肠传染病的最重要病原菌,多数是肠道的正常菌群,种类多，有44个菌属，170个以上的菌种,一大群居住在人和动物肠道中生物学性状近似的革兰阴性杆菌,肠杆菌科（enterobacteriaceae）,肠杆菌科中与医学有关的常见菌属,医学微生物学（第九版）,肠杆菌科,致病菌,条件致病菌在特定条件下致病,沙门菌属志贺菌属耶尔森菌属,大肠埃希菌肺炎克雷伯菌,枸橼酸杆菌属克洛诺杆菌属爱德华菌属肠杆菌属摩根菌属泛菌属邻单胞菌属变形杆菌属普罗威登斯菌属沙雷菌属,医学微生物学（第九版）,共同特性,1.相似的形态结构,为G-小杆菌，无芽胞，多数有鞭毛、菌毛，少数有荚膜,大肠埃希菌（革兰染色1000，张彦提供）,医学微生物学（第九版）,2.简单的培养条件,营养要求低，普通培养基，常用选择鉴别培养基,SS平板左：大肠埃希菌，右：痢疾志贺菌，张彦提供,共同特性,医学微生物学（第九版）,肠杆菌科,发酵乳糖,不发酵乳糖,不产酸,中性红,红色,大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属、枸橼酸杆菌属,产酸,黄色,沙门菌属、志贺菌属、变形杆菌属、耶尔森菌属,乳糖,乳糖初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌的重要依据,3.活泼的生化反应,共同特性,医学微生物学（第九版）,4.复杂的抗原结构,共同特性,医学微生物学（第九版）,肠杆菌科抗原结构示意图张彦提供,5.一般的抵抗力,6.容易的变异性,溶原性转换(lysogenicconversion),生化反应性变异,耐药性变异,毒力性变异,转导(transduction),接合(conjugation),一般6030分钟杀死，但在自然界生存力强，胆盐与煌绿能抑制大肠埃希菌生长,共同特性,医学微生物学（第九版）,埃希菌属Escherichia,第二节,人类和动物肠道中的正常菌群,以大肠埃希菌（E.coli）最为重要，出生后数小时就进入肠道，并终生伴随,在卫生学中，常被作为样品被粪便污染的指标（大肠菌群数）,少数特殊菌株能致病，称致病性大肠埃希菌,医学微生物学（第九版）,1.均为G-小杆菌，无芽胞，有鞭毛，有些有微荚膜。,2.营养要求不高，生化反应活泼，能分解多种糖类，产酸产气（葡萄糖、乳糖）在肠道选择培养基（SS）上为红色菌落IMViC试验“+-”,一、生物学性状,大肠埃希菌菌落（SS平板）张彦提供,医学微生物学（第九版）,3.主要有三种抗原O、H、K分型依据，表示方式按O:K:H排列，如O111:K58:H2,4.抵抗力不强。胆盐、煌绿可抑制大肠埃希菌生长,一、生物学性状,医学微生物学（第九版）,1.黏附素（adhesin）（1）定植因子抗原CFA/、CFA/、CFA/（2）集聚黏附菌毛AAF/、AAF/（3）束形成菌毛Bfp（4）紧密黏附素（5）P菌毛（6）型菌毛,（一）致病物质,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,2.外毒素（1）志贺毒素和（2）耐热肠毒素a和b（3）不耐热肠毒素和（4）溶血素A,（一）致病物质,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,3.其他（1）内毒素（2）荚膜（3）载铁蛋白（4）型分泌系统,（一）致病物质,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,1.肠道外感染（1）败血症（2）新生儿脑膜炎（2）泌尿道感染,（二）所致疾病,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,2.肠道内感染（外源性感染）-胃肠炎（1）肠产毒型大肠埃希菌（enterotoxigenicE.coli,ETEC）,（二）所致疾病,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,2.胃肠炎（2）肠侵袭型大肠埃希菌（enteroinvasiveE.coli，EIEC）,（二）所致疾病,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,2.胃肠炎（3）肠致病型大肠埃希菌（enteropathogenicE.coli,EPEC）,（二）所致疾病,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,2.胃肠炎（4）肠出血型大肠埃希菌（enterohemorrhagicE.coli,EHEC）,（二）所致疾病,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,2.胃肠炎（5）肠集聚型大肠埃希菌（enteroaggregativeE.coli,EAEC）,（二）所致疾病,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,大肠埃希菌引起的腹泻,医学微生物学（第九版）,1.涂片染色镜检2.分离培养（血标本-增菌）菌落形态IMViC试验+-生化反应,（一）肠外感染,三、微生物学检查,最后鉴定,初步鉴定,尿路感染中段尿10万/毫升,医学微生物学（第九版）,（二）肠内感染,三、微生物学检查,医学微生物学（第九版）,（三）卫生细菌学检查,三、微生物学检查,细菌总数（样品被细菌污染的指标）,每1ml（g）样品中所含细菌数每毫升饮用水中细菌总数不得超过100个,大肠菌群数（样品被粪便污染的指标）,每1000ml（g）样品中的大肠菌群数每1000ml饮用水中不得超过3个；每100ml瓶装汽水、果汁中不得超过5个,医学微生物学（第九版）,无特别方法，在研制菌毛疫苗，有一定效果治疗用抗生素，注意耐药性的产生,四、防治原则,医学微生物学（第九版）,志贺菌属Shigella,第三节,1.G-杆菌，无芽胞、荚膜、鞭毛，有菌毛2.营养要求不高、发酵葡萄糖，不产气；除宋内菌迟缓发酵乳糖外，均不发酵乳糖；在肠道选择培养基（SS）上为无色透明小菌落；,一、生物学性状,痢疾志贺菌（革兰染色1000，张彦提供）,医学微生物学（第九版）,3.无鞭毛抗原，根据O抗原分群、分型A群（痢疾）C群（鲍氏）B群（福氏）D群（宋内）,一、生物学性状,医学微生物学（第九版）,（一）致病物质,二、致病性和免疫性,1.侵袭力致病主要决定因素菌毛黏附作用（质粒编码）,通过型分泌系统向上皮细胞和巨噬细胞分泌4种蛋白（IpaA、IpaB、IpaC、IpaD）溶解吞噬小泡,医学微生物学（第九版）,2.内毒素,（一）致病物质,医学微生物学第九版,二、致病性和免疫性,内毒素,刺激肠壁植物神经肠功能紊乱,破坏肠黏膜加重坏死及溃疡形成,典型痢疾症状脓血黏液便,典型痢疾症状腹痛、里急后重等,全身表现内毒素血症、发烧、神志障碍、严重者中毒性休克,3.外毒素志贺氏菌A群、型产生，也称志贺毒素毒性作用：阻止蛋白质合成，细胞损伤,（一）致病物质,医学微生物学第九版,二、致病性和免疫性,（二）所致疾病,二、致病性和免疫性,细菌性痢疾,人是唯一宿主,致病性强，摄入10-150个即可发病,医学微生物学（第九版）,（二）所致疾病,二、致病性和免疫性,腹痛、腹泻、里急后重内毒素刺激肠壁神经引起,局部症状,全身症状,细菌性痢疾,临床分类：急性（典型、非典型、中毒性）、慢性、带菌者,医学微生物学（第九版）,（三）免疫性,二、致病性和免疫性,不长久，不牢固（型别多、局部感染）,SIgA作用,医学微生物学（第九版）,三、微生物学检查,分离培养,快速诊断,及时送,30%甘油缓冲盐水保存,标本,用抗生素前,SS平板（无色透明小菌落）,血清学反应（玻片凝集）,双糖培养基（生化反应）,荧光菌球试验,协同凝集试验,其他试验,医学微生物学（第九版）,四、防治原则,传染源控制传播途径切断易感者疫苗（口服减毒活疫苗-Sd株）,预防,多种抗生素可选择但很易引起耐药性药敏试验、联合用药、用足药,治疗,医学微生物学（第九版）,沙门菌属Salmonella,第四节,沙门菌属,一群寄生于动物和人类肠道中的革兰阴性杆菌，有几千个血清型，可分三类：,医学微生物学（第九版）,1.G-杆菌，有周鞭毛，多数有菌毛，无芽胞、荚膜2.发酵葡萄糖，产气（除伤寒），不发酵乳糖；在肠道选择培养基（SS）上为无色透明小菌落,一、生物学性状,痢疾志贺菌（革兰染色1000，张彦提供）,医学微生物学（第九版）,3.抗原构造Oantigens菌体抗原O：由数个成分组成伤寒沙门菌和副甲、肖氏沙门菌有交叉的抗原成分。如12抗原刺激机体产生IgMHantigens鞭毛抗原H：phaseI第1相、phaseII第2相第1相特异性高，刺激机体产生IgG,一、生物学性状,医学微生物学（第九版）,Vi抗原(virulence)：,抗原性弱，刺激机体产生短暂低效价抗体伴随活菌一起存在,测定Vi抗体有助于检出带菌者,伤寒、希氏沙门菌的表面抗原与毒力有关,一、生物学性状,3.抗原构造,医学微生物学（第九版）,（一）致病性,二、致病性和免疫性,医学微生物学（第九版）,（二）所致疾病,二、致病性和免疫性,肠热症,胃肠炎,败血症,伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌,鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌等,鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌等,医学微生物学（第九版）,伤寒玛丽,体内带有病原菌，但无临床症状的人。带菌者能不断排出病原菌传染周围的人群。因其不出现临床症状，不易被察觉而加以隔离，其危害性常甚于病人，被视为最危险的传染源。健康人（包括隐性感染者）体内带有病原菌的，称为健康带菌者。如在流行性脑膜炎流行期间，一些健康人的鼻咽腔内可带有脑膜炎球菌。有些传染病患者病愈后，体内仍有病原菌不断排出，该类人群称为恢复期带菌者。伤寒、痢疾病人恢复期带菌者比较多见。伤寒玛丽本名玛丽马伦，爱尔兰人，生于1869年9月23日。1883年移民美国，是美国第一位被发现的伤寒健康带菌者。玛丽是一名厨师，并因此造成53人感染、3人死亡，但她坚决否认这项事实，也拒绝停止下厨，因此两度遭公共卫生的主管机关隔离，最后于隔离期间去世。,医学微生物学（第九版）,沙门菌,小肠上部黏膜,肠系膜淋巴结,血流,胸导管,细菌增殖肝、脾、肾、皮肤、胆囊,血流,尿,肠道,持续高热相对缓脉肝脾肿大玫瑰疹白细胞减少,粪便,肠壁淋巴组织,可能导致死亡,肠出血、肠穿孔,肠热症的致病过程,医学微生物学（第九版）,（三）免疫性,二、致病性和免疫性,伤寒和副伤寒病后可产生牢固的免疫力，细胞免疫为主（胞内寄生菌）。抗体有辅助杀菌作用。胃肠炎恢复与局部分泌型抗体产生有关。,医学微生物学（第九版）,伤寒和副伤寒食物中毒败血症第1周取静脉血可疑食物血第1-3周取骨髓液呕吐物第2周起取粪、尿粪,查病原体,标本,SS平板,生化反应,血清学鉴定,双糖发酵等,玻片凝集试验,52,三、微生物学检查,医学微生物学（第九版）,肥达试验（Widaltest）视频,三、微生物学检查,医学微生物学（第九版）,四、防治原则,一般性:消化道饮食卫生特异性:死菌苗、活疫苗（Ty21a株）好,医学微生物学（第九版）,克雷伯菌属Klebsiella,第五节,G-无芽胞、鞭毛，有较厚荚膜的一群杆菌；营养要求不高，在普通琼脂培养基上形成较大的灰白色黏液菌落，呈黏液型菌落，以接种环挑之易拉成丝；3.通常存在于自然界和人体咽、鼻咽腔、肠道中；4.为条件致病菌，对人类致病的主要是肺炎克雷伯菌,医学微生物学第九版,一、生物学性状,医学微生物学第九版,二、致病性与免疫性,（一）致病物质,荚膜荚膜合成相关基因（黏液表型调控基因A）气杆菌素,医学微生物学第九版,重症肺炎、支气管炎、肠炎、婴幼儿脑膜炎、泌尿系统感染、创伤感染和败血症等,二、致病性与免疫性,（一）所致疾病,肺炎克雷伯菌肺炎亚种,鼻臭鼻克雷伯菌臭鼻亚种,鼻硬结克雷伯菌鼻硬结亚种,鼻炎,鼻咽部慢性肉芽肿,克雷伯菌属,医学微生物学第九版,三、微生物学检查,1.涂片革兰染色和荚膜负染，可见革兰阴性杆菌，有较厚的荚膜。2.分离培养菌落黏稠，接种环挑之易拉成丝3.荚膜肿胀试验,四、防治原则,合理使用抗生素减少临床交叉感染,医学微生物学（第九版）,其他菌属othe