常用10种培养基的配置和质控标准

总结：常用的10种培养基的配置和质量控制标准(1)基础肉汤成分和调制方法：佩普顿十年美国航空5g牛肉膏5g酵母提取物3g德瓦1LpH值7.47.615磅30分钟高压灭菌，注入无菌试管备用。每次新调配都进行质量管理阳性质量控制： ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种基础肉汁中，35的温箱24h肉汁浑浊。无菌试验： 100管吸引检查为5%，100管随机提取无接种基础肉汁，在35烤箱中培养24小时，无细菌生长。并行试验：质量管理时，要求同时制作新旧批号的培养基用途：培养营养要求低的细菌增菌用作为其他选择培养基的基础液。保存干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后请务必拧上盖子。培养基：在2-8下保存1个月(2)普通营养琼脂成分和调制方法：肉汁100毫升琼脂2g15磅30min高压灭菌，倾斜平板待机。注：可以购买国内生产的瓶装营养琼脂粉。 按照上述说明进行调制。质量管理：每次新调制质量管理频度时都进行质量管理质量管理方法阳性物质控制：在ATCC 25923金黄色葡萄球菌或ATCC25922大肠菌接种营养琼脂上，35烤箱24h细菌生长良好。无菌试验： 100片吸引检查为5%，100片随机提取为10管未接种营养琼脂35的烤箱24h培养，细菌无生长。并行试验：质量管理时，要求同时制作新旧批号的培养基用途：培养营养要求低的细菌。作为无糖基础培养基。加入血制成血小板。加入血加热75以上，加入生长添加剂后变成巧克力平板。保存干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后，请务必盖好盖子。培养基：在2-8下保存半个月(3)葡萄糖肉汁成分和调制方法：佩普顿十年朊病毒十年美国航空5g牛肉膏5g发酵粉3g葡萄糖4g柠檬酸钠3g硫酸镁3g德瓦1LpH值7.27.40.4%苯酚红五毫升15磅30分钟高压灭菌，备用质量管理：每次新调制质量管理频度时都进行质量管理质量管理方法阳性质量控制：在ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种葡萄糖肉汁中，35温箱24h肉汁混浊。无菌试验： 100管吸引检查为5%，100管随机提取10管未接种的葡萄糖肉汁，在35的烤箱中培养24小时，无细菌生长。并行试验：质量管理时，要求同时制作新旧批号的培养基用途：培养营养要求低的细菌增殖用。六存储器干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后请务必盖好。培养基：在2-8下保存1个月(4)血液琼脂板成分和制备方法：(法国生物杆菌产品培养基)4g琼脂基础100mL蒸馏水高压灭菌(15磅，121)20min冷却到50，加入5%-10%的无菌羊(兔子)血倒入无菌的平盘(9mm )每个平盘分注1315ml。质量管理：每次新调制质量管理频度时进行质量管理质量管理方法阳性质量控制： ATCC 6303肺炎链球菌(或质量控制株)和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种到血液琼脂上，35的温箱24h细菌生长良好。 ATCC 6303肺炎链球菌为溶血。 ATCC 25923金黄色葡萄球菌为溶血。无菌试验： 100个抽检随机提取5%，100个无接种血液琼脂35的烤箱24h培养，无细菌生长。并行试验：质量管理时，要求同时制作新旧批号的培养基用途：分离培养营养要求高的细菌。保存干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后请务必拧上盖子。培养基：在2-8下保存半个月注意事项：制作血液平板时，温度必须适当。 琼脂必须冷却到50左右。 温度过高，血液变色难以观察溶血，温度过低，琼脂凝固，难以与血液混合。使用的血液是羊血、兔子血比较好，所以不应该使用人的血，因为人的血中有抗体、补体，不利于细菌的生长。 羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意，但能抑制脑膜炎奈瑟菌和嗜血杆菌的生长。(5)血液琼脂平板(国产)普通营养琼脂粉蒸馏水3.8克100毫升10%葡萄糖0.6毫升血液6-10毫升冷却到50，加入5%-10%的无菌羊(兔子)血倒入无菌的平盘(9mm )每个平盘分注1315ml。质量管理方法阳性质量控制： ATCC 6303肺炎链球菌(或质量控制株)和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂上，35温箱24h细菌生长良好。 ATCC 6303肺炎链球菌为溶血。 ATCC 25923金黄色葡萄球菌为溶血。无菌试验： 100个吸引检查随机提取5%、100个无接种血液琼脂35的烤箱24h培养，无细菌生长。并行试验：质量管理时，要求同时制作新旧批号的培养基用途：分离培养营养要求高的细菌。保存干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后请务必盖好。培养基：在2-8下保存半个月注意事项：制作血液平板时，温度必须适当。 琼脂必须冷却到50左右。 温度过高，血液变色，难以观察溶血，温度过低，琼脂凝固，难以与血液混合。使用的血液最好是羊血、兔子血，所以不应该使用人的血，因为人的血中有抗体、补体，不利于细菌的生长。 羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意，但能抑制脑膜炎奈瑟菌和嗜血杆菌的生长。(6)巧克力平板成分和调制方法：肉汁100毫升琼脂粉1.5g无菌脱纤维兔血10毫升方法：高压灭菌后，冷至8085加入兔血，85水浴混合1015min，血液由新鲜红色变成巧克力色。 取出，冷却到50时注入平板，无菌试验后，保存在冰箱中。质量管理方法阳性控制： ATCC10211流感菌或ATCC49619淋病菌，35，5%CO2温箱24-48h，细菌生长良好。无菌试验： 100片吸引检查5%，100片无接种巧克力平板在35的5%co2温箱24-48h中培养，细菌无生长。并行试验：质量管理时，要求同时制作新旧批号的培养基用途：分离培养脑膜炎奈瑟菌、嗜血菌。淋病奈瑟菌的分离培养。保存干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后请务必盖好。培养基：在2-8下保存半个月(7)二糖培养基基础液胰蛋白酶十年美国航空5g牛肉膏5g德瓦1LpH值7.40.4%酚红液六毫升调制： (1)基础液500毫升葡萄糖1g琼脂2.5g(2)基础液500毫升乳糖5g琼脂7.5g制法： 10磅20min高压灭菌高，首先将葡萄糖放入无菌试管内的1/3处使之凝固后，在2/3处加入乳糖制成斜面。质量管理：每次新调制品质管理频度时都进行品质管理质量管理方法阳性质量控制：在二糖培养基上接种福氏痢疾杆菌(卫生部临床检测中心质量控制株)，生长良好，上层红色/下层无色。阴性质量控制：用ATCC27853接种二糖培养基，35温箱24-48h培养生长良好，上层下层均为红色。无菌试验： 100管抽检5%，100管随机提取10管无接种二糖培养基在35烤箱中培养24-48h，无细菌生长。并行试验：质量控制时，要求同时制作新旧批号的培养基。用途：用于肠道病原菌的分离培养。保存干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后请务必盖好。培养基：在2-8下保存半个月(8) MH培养基成分和调制方法：可以使用国产(北京奥博星生物技术有限公司)或法国的生物梅利埃制品培养基进行制备3.8g M-H琼脂基础100mL蒸馏水高压灭菌(15磅，121)20min冷却到50，放倒平盘，使其厚度为4mm质量管理：每次新调制品质管理频度时都进行品质管理质量管理方法阳性质量控制： ATCC25923、ATCC25922接种于MH培养基中，在35的烤箱24-48h中培养，细菌生长良好。无菌试验： 100个抽检5%，100个无接种MH培养基在35的温箱24-48h中培养，细菌无生长。并行试验：质量控制时，要求同时制作新旧批号的培养基。用途：用于非苛性培养菌的KB法药敏试验用。保存干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后请务必盖好。培养基：在2-8下保存半个月(9)砂保弱培养基成分： 10克胨、20克琼脂、40克麦芽糖、1000毫升水。方法：在1000ml的水中加入上述成分，煮沸，持续搅拌，琼脂溶解后，加入40克麦芽糖(或葡萄糖)，搅拌，溶解，PH值为7.6，定量分在烧瓶内(每瓶100ml )，高压灭菌103.43 凝固后，在37下培养1824h小时，如无细菌生长，放入冰箱。每次新调整质量管理频度时都进行质量管理质量管理方法阳性质量控制： ATCC90028接种于札幌平板，35温箱24-48h培养生长良好。无菌试验： 100片抽检5%，100片无接种沙波培养基在35烤箱中培养24-48h，无细菌生长。并行试验：质量管理时，要求同时制作新旧批号的培养基。用途：用于真菌的分离培养。保存干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后请务必盖好。培养基：在2-8下保存半个月(10 )念珠菌显色培养基成分：由琼脂、胨、色素、氯霉素等组成调制方法：准确称量47.7克精梳念珠菌显色琼脂粉，加入1000毫升蒸馏水，在玻璃容器壁上加液面刻度，边搅拌边加热至完全溶解，不用蒸锅消毒，冷却至45后，用氨水将PH值矫正至6.3每次新调整质量管理频度时都进行质量管理质量管理方法阳性质量控制： ATCC90028接种念珠菌显色培养基，35温箱24-48h培养生长良好，菌落翠绿色。无菌试验： 100片抽检5%，100片无接种沙波培养基在35烤箱中培养24-48h，无细菌生长。并行试验：质量管理时，要求同时制作新旧批号的培养基。用途：念珠菌的通常鉴定用。保存干粉：在室温下保存，容易受湿，所以打开瓶子后，请务必盖好盖子。培养基：在2-8下保存半个月基本质量管理标准1项目标准规格外观液体培养基清晰透明，无沉淀物，淡黄色固体培养基表面光滑，无干裂，无细菌生长灭菌普通培养基15英镑2030分钟灭菌糖类培养基810磅1520分钟灭菌蛋白类培养基流动蒸汽或血清凝固器8095的间接灭菌pH值电位计法和标准比色法测定，禁止用试纸法测定。 室温基准范围pH0.2以内培养基的测定固体培养基一般培养基厚度为：3mm，药敏培养基为：5mm。液体培养基试管： 2030ml、培养瓶： 6080ml斜面琼脂斜面高度在试管的二分之三以下，没有干二糖斜面底层和斜面分别占1/3，两者之间有1cm的直立区无菌实验高压后培养基在不同环境下以10%的比例随机抽样无菌实验分注培养基以20%的比例对不同环境进行采样，将少量的100%作为无菌实验分离培养基的质量控制培养基质量控制股预期的结果琼脂乙型溶血性链球菌b型溶血，发育良好绿色链球菌甲性溶血，发育良好巧克力琼脂流行性感冒杆菌发育良好脑膜炎奈瑟氏务生长得好普通琼脂大肠菌(大肠菌)发育良好表皮葡萄球菌发育良好高盐蛋黄琼脂金黄色葡萄球菌卵磷脂沉淀，发育良好大肠杆菌不成长沙氏琼脂白色念珠菌发育良好大肠杆菌不成长麦肯凯琼脂大肠杆菌分解乳糖，菌落变红声子痢疾杆菌不分解乳糖，菌落无色透明琼脂声子痢疾杆菌不分解乳糖，菌落无色透明鼠伤寒菌不分解乳糖，菌落无色中心黑中国青琼脂大肠杆菌分解乳糖，菌落是蓝色的声子痢疾杆菌不分解乳糖，菌落是淡红半透明的细菌生化实验的质量控制生物化学实验阳性菌株阴性株糖发酵大肠杆菌绿脓菌糖氧化绿脓菌大肠杆菌V-P反应产气肠杆菌大肠杆菌靛蓝基质实验大肠杆菌产气肠杆菌甲基红的实验大肠杆菌产气肠杆菌柠檬酸盐柠