溶血对生化检验结果的影响.ppt

溶血对生化检验结果的影响，程峰，溶血的定义，01，溶血对生化检验结果的影响，02，溶血样品的处理，04，样品溶血的原因，03，如何避免溶血，05，1，溶血的定义，溶血是对红细胞的破坏，红细胞的某些成分被释放到血清或血浆中，导致实验样品出现特有的红色增加。许多因素会破坏红细胞并引起溶血，从而干扰监测，使检测结果失去真实性和准确性，影响疾病的诊断和治疗。溶血是临床生化检验中最常见的干扰和影响因素。溶血后，谷丙转氨酶、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、钾、TBIL、总蛋白、白蛋白等。显著增加。GLU、CR等。是溶血后显著减少的项目。(1)溶血对肝功能测定的影响。1.天冬氨酸氨基转移酶(AST)溶血引起的AST升高可能是由以下两个原因引起的：(1)人红细胞的AST活性约为血清的40倍。当样品被溶血时，红细胞破裂后AST的释放必然导致血清中AST活性的增加，因此溶血样品的结果明显高于未溶血样品。(2)溶血后血清颜色加深，吸光度值增加。谷丙转氨酶(ALT)在红细胞中的活性是血清中的7 15倍。严重溶血(血红蛋白约6.5克/升)可使血清丙氨酸氨基转移酶从20升/升增加到26.5升/升(增加约27%)。因此，溶血后丙氨酸氨基转移酶含量的增加主要来源于细胞内丙氨酸氨基转移酶的大量释放。可以看出，丙氨酸氨基转移酶受溶血的影响比天冬氨酸氨基转移酶小。乳酸脱氢酶(LDH)红细胞和血小板含有丰富的LDH，红细胞中LDH的含量是血清中的160 200倍，因此受溶血影响最大。在测定过程中可能会出现不同程度的血小板破坏，影响乳酸脱氢酶的测定，导致测定结果偏高。4。谷氨酰转肽酶(GGT)由于红细胞中GGT含量低，轻微溶血对其测定结果影响不大，但严重溶血有影响。5.总蛋白的测定通常采用缩二脲法，主波长为540纳米，而血红蛋白在555纳米处有吸收峰。试验表明，如果溶血样品中的血红蛋白小于或等于0.5克/升，则无干扰。然而，高Hb将使结果更高，并且可以使样品空白以消除影响。总胆红素(TBIL)重氮法用于测定TBIL，最终生成紫红色偶氮胆红素，主要在波长540 560nm处有光吸收。血红蛋白在540-550nm处有光吸收，这与偶氮胆红素的比色波长非常相似。因此，当溶血后细胞破裂，大量血红蛋白进入血清时，TBIL测量值必然增加，这是TBIL测量的一个正干扰因素。此外，由于Hb重氮试剂反应形成的产物会破坏偶氮胆红素，同时溶血对重氮法测定胆红素有负面干扰，使测定结果偏低，但影响很小，因此溶血后Hb对测定结果的干扰往往导致TBIL测定结果偏高。(2)溶血对血脂测定的影响。1.总胆固醇(TC)试验表明，如果溶血样品中Hb小于或等于1.5g/L，则无干扰；然而，在高浓度下，由于Hb固有的颜色干扰，结果将更高。(2)甘油三酯(TG)除了总胆固醇等上述因素外，目前使用的甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法和乙酰丙醇显色法都是基于甘油的测定，而红细胞膜磷脂可以被磷脂酶作用生成游离甘油，因此溶血后的测定结果相对较高。载脂蛋白A(APOA)和APOB免疫透射比浊法是最广泛使用的方法。基于抗原和抗体，血红蛋白可以增加测量结果，因此溶血后测量结果更高。(3)溶血对肾功能测定的影响。1.尿素(尿素)无论是双乙酰肟法还是尿素酶法，溶血都会导致光谱蓝色部分吸光度值的增加，从而干扰结果并导致更高的结果。2。尿酸(UA)试验表明，如果HB 1g/L处于溶血性这种假反应素物质主要存在于红细胞中，较少存在于血清中，因此溶血后红细胞中假反应素物质的释放是导致测量值偏差的主要原因。溶血释放的物质会导致Jaffe反应，增加测定结果。Jaffe反应是指血浆中的肌酐与碱性苦味酸发生反应，生成黄绿色苦味酸肌酐复合物。(4)溶血对电解质测定的影响。1.钾是细胞内液体的主要阳离子，大约98%的钾储存在细胞内。红细胞中的钾浓度约为105毫摩尔/升，而血清中的钾浓度仅为3.5毫摩尔/升至5.4毫摩尔/升。红细胞中的钾含量是血清中的23倍。因此，溶血导致血清钾显著增加，这主要是由于红细胞中大量释放钾。据报道，血清游离血红蛋白在2.5 2.8 g/L时增加14% 16%，血清钾在6.6 g/L时增加41%，因此，应在采集样品后1小时内将红细胞从血清中分离出来。此外，应高度重视血清钾结果的分析。2、血浆中的氯(CL-)约为103毫摩尔/升，红细胞中的氯约为49 54毫摩尔/升。溶血可导致细胞内氯离子转移到血清中，从而导致血清氯离子测定值的增加。3.磷(P)实验表明，如果溶血样品中Hb 1g/L影响不大，但当Hb等于2.8g/L时影响很大，血细胞应在采血后30分钟内分离，否则由于磷酸酯从红细胞中释放，结果会更高。(5)溶血对葡萄糖测定的影响。葡萄糖氧化酶法对葡萄糖的测定有很强的特异性，干扰物质少，但过氧化氢酶易受其他物质的影响，如维生素C和谷胱甘肽，它们能与H2O2竞争，导致负偏差。样品中的一些强酶会促进葡萄糖的降解，导致测量值显著下降。如果在血清或血浆中加入氟化钠和KF作为糖酵解抑制剂样品，并在收集后立即除去蛋白质，也可以使用溶血样品。(6)溶血对心肌酶谱的影响。由于红细胞中低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的含量明显高于细胞外，溶血后的结果增加。虽然红细胞不含CK，但它们含有大量的腺苷酸激酶(AK)，这可干扰测定CK的偶联方法的反应体系，并人为地导致CK结果的增加。(3)标本溶血的原因，(1)环境温度变化，温度低时血清不易分离，标本需多次离心，离心后易发生溶血。2.样品运输过程中会发生碰撞，离心后会导致溶血。3.采血不足和相对低的抗凝渗透性会导致溶血。4、特殊人群如肥胖、儿童等血管不易发现或过细，导致抽血时多次手术或压迫时间过长也会引起溶血。5.如果针太细或抽血速度太快，负压过大，红细胞在通过针尖时会被破坏和溶血。4.溶血标本的处理。1.积极接触临床实践。结合临床实践，首先排除了体内溶血的可能性。如果不是体内溶血，建议再次取标本。否则，应在试验报告上标记“标本溶血”以提醒临床医生。2.利用溶血指数的变化值，根据各项回归方程，对易发生溶血的AST、CK、CK-甲基溴、乳酸脱氢酶、钾和钾的测定结果进行部分校正，特别是轻度和中度溶血，但对重度溶血标本应进