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文档简介
w.w.w.k.s.5.u.c.o.m生物技术实践选修课主题一传统发酵技术的应用3.(李宗,第1卷)以下关于通过发酵工程生产谷氨酸的说法是错误的A.发酵过程中必须不断引入无菌空气,否则乳酸会积累B.通常用于发酵的培养基是液体天然培养基C.从自然界分离的野生型菌株可以直接用于生产当菌体生长进入稳定期时,补充营养可以提高谷氨酸产量。主题2:微生物的培养和应用40(宁夏)。生物学选修1生物技术实践 (15分)(1)在大肠杆菌培养过程中,除营养条件外,还应考虑_ _ _ _ _ _、_ _ _和渗透压等条件。由于其体积小、结构简单、易于选择突变类型、_ _、_ _等优点,该细菌常被用作遗传研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,培养基和培养皿应进行_ _ _ _ _ _(灭菌和灭菌);操作者的手需要清洁和_ _ _ _ _ _;静止空气中的细菌可以被紫外线杀死,因为紫外线可以使蛋白质和_ _ _ _ _ _ _变性。(3)如果用稀释涂布板法计算活大肠杆菌数量,为了使估算值更接近实际值,除了严格操作和多次重复外,还应保证待测样品的稀释度。(4)一般情况下,根据菌落形状和大小等菌落特征,得到的纯菌也可初步为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(5)培养大肠杆菌时,必须在接种前检测培养基是否被污染。对于固体介质,检测方法应为_ _ _ _ _ _。(6)如果用大肠杆菌进行实验,用过的培养基及其培养物在丢弃前必须经过_ _ _ _ _ _处理,以防止培养物扩散。回答:(1)温度、酸碱度、易培养和生命周期短(2)损伤DNA结构的灭菌消毒(3)适当的比例(4)识别(或分类)(5)将未接种的培养基在合适的温度下放置合适的时间,观察培养基上是否有菌落。(6)消毒33.(10分)(国家管理学院2分)微生物分解玉米淀粉生产糖浆具有广阔的应用前景。然而,现有野生菌株对淀粉的转化效率较低,一位同学试图对其进行转化以获得高效菌株。(1)实验步骤:(1)准备_ _ _ _ _ _ _ _(固体、半固体和液体)培养基,培养基的碳源应为_ _ _ _ _ _ _ _。(2)将_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _连接到灭菌的培养基板上。(3)立即用适当剂量的紫外线照射,目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(4)菌落形成后,加入碘溶液观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围。周围有_ _ _ _ _ _ _现象的菌落为初级菌落,经分离纯化后可达到实验目的。(2)如果获得了两个突变菌株和,它们的淀粉转化率较高,菌株的淀粉酶催化活性较高,菌株的淀粉酶蛋白含量较高。进一步研究表明,该突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区,可以推断菌株的突变发生在_ _ _ _ _ _区,菌株的突变发生在_ _ _ _ _ _区。答:(1)固体和玉米淀粉;(2)野生品系;(3)诱变野生菌株(诱导野生菌株的基因突变);(4)(透明圈)光色范围大;(2)编码区,非编码区6.(安徽)以下是对“土壤细菌总数检测”实验操作的描述,其中误差为A.用蒸馏水配制牛肉酱蛋白膝盖培养基,高温高压灭菌,然后倒盘b、分别取104倍、105倍和106倍的土壤稀释液和0.1毫升无菌水,分别涂于每组平板上C、将实验组和对照组的平板倒置,在370恒温培养24-48小时d、确定对照组无菌后,选择平板用大肠杆菌工程菌生产干扰素时,应及时添加核酸等生长因子大肠杆菌处于对数生长期。它经常被用作生产菌株和科学研究材料。主题3植物组织培养技术34.(山东) (8分)(生物技术实践)人参是一种罕见的中药。其活性成分是人参皂苷。用细胞培养技术生产人参皂苷的一般过程如下:请回答:(1)制备诱导愈伤组织的固体培养基,分装。人参根应在接种前处理。(2)试管培养的切根称为。经过几天的培养,发现少量培养基被污染。如果有有色绒毛菌落,它们就被污染了。如果它是一个闪亮的粘液群落,它属于污染。(3)用少量酶处理愈伤组织,获得单细胞或小细胞团,在液体培养基中悬浮培养,可有效提高人参皂苷的合成。(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂。应选择从培养物干粉中提取的人参皂苷方法,操作中应使用加热。答:(1)消毒(2)外植体真菌(霉菌)细菌(3)果胶(4)萃取(浸出)水浴专题四酶的研究与应用3.(江苏)以下关于固定化酶和固定化细胞的说法是正确的A.固定化细胞技术在多步连续催化反应中具有明显的优势在固定化酶的应用中,应控制好pH、温度和溶解氧C.使用固定化酶降解水中的有机磷农药需要提供适当的营养条件d .利用固定化酵母细胞进行发酵,其中糖类的作用只是作为反应底物22.(江苏选择一个以上)加工桔子罐头和用酸碱处理去除中间果皮(桔子侧枝)会造成严重污染。目前,酶水解被用来去除桔皮,可以减少污染。以下4种在特定环境中生长的微生物可以产生大量的酶A.产于麦麸上的黑曲霉酸奶中的乳酸菌C.生长在棉籽壳上的平菇32.(17分)(国家管理学院2分)请使用给定的实验材料和工具设计实验来验证哺乳动物体内转化酶和淀粉酶催化的特异性。要求完成实验设计,补充实验步骤,预测实验结果,得出结论和回答问题。实验材料和用具:蔗糖酶、唾液淀粉酶、蔗糖和淀粉的四种适当浓度的溶液、薄膜试剂、试管、37恒温水浴罐和沸水浴罐。(1)如果 表示添加适量的溶液,-表示不添加溶液,并且A和B代表试管标签,请使用这些符号完成以下实验设计,并请在答题卡上回答。解决办法试管蔗糖溶液淀粉溶液蔗糖酶溶液唾液淀粉酶溶液A(2)实验步骤:(1)根据上表中的设计,取试管并添加溶液。(3)结果预测:_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(4)结论:_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(5)在上述试验中,如果仅将37恒温水浴的温度调节至20。但是,如果在其他条件不变的情况下重复上述实验,由于_ _ _ _ _ _,砖红色试管中的颜色将比37下的颜色浅。回答:(1)解决办法试管蔗糖溶液淀粉溶液蔗糖酶溶液唾液淀粉酶溶液ABC钟声(2)混合均匀,保持温度在37一段时间;(3)取出试管,分别加入适量的philin试剂,混合,沸水浴一段时间;观察实验现象,记录实验结果。(3)含有蔗糖和淀粉酶溶液的试管(试管A)和含有淀粉和淀粉酶溶液的试管(试管B)中出现砖红色沉淀,而其他试管中未出现砖红色沉淀;(4)(哺乳动物的蔗糖酶和淀粉酶)酶的催化是特异性的;(5) 20低于酶的最适温度,酶活低,水解产生的还原糖少。31(李宗卷1) (10分)桃果实成熟后,如果它很快软化,它的耐贮藏性将会很差。下图显示了两个品种A和B的桃果实在室温下成熟后硬度和其它变化的实验结果。根据图,回答:(1)实验结果表明,桃果实成熟后硬度降低,随着细胞壁的增加硬度降低这种物质的降解与其活性的变化有关,也与细胞壁的变化有关这种物质的降解与其活性的变化有关。(2)在品种A和品种B中,耐贮运品种为。(3)根据实验结果,推测减缓桃果实采后软化的保鲜方法应为。(4)如果果实在采摘后提前成熟,家庭选择的方法包括和谐。(5)一般来说,由于以下原因,水果的成熟过程也伴随着绿色的亮色。答:(10分)(1)纤维素酶、纤维素酶、果胶和果胶酶(2)A(3)适当降低温度,低温可降低相关酶的活性,延缓果实软化(4)用乙烯处理,适当提高贮藏温度(5)降低叶绿素含量31.(江苏)(6分)酶水解制备原生质体的原理是用酶溶液降解细胞壁成分。蜗牛酶溶液提取自蜗牛的消化腺(以植物为食);果胶酶和纤维素酶是从微生物中提取的。为了研究不同酶溶液的酶解效果,实验组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6个试管中。试剂的用量和实验结果如下表所示。请回答相关问题。管号项目iV蒸馏水(毫升)2O1111缓冲液(毫升)0210.50.50.5果胶酶液体(毫升)O0O0.5O0蜗牛酶溶液(毫升)O0OO0.50纤维素酶溶液(毫升)0O0O00.5实验结果(绿色深度)(注:“更多”表示深绿色,“一”表示颜色没有明显变化)(1)在实验过程中,有必要轻轻摇动试管,目的是使原生质体脱离叶片,以便观察悬浮液的绿色深度。(2)从绿色的深度可以推断蜗牛酶溶液具有最佳的酶解效果,因为蜗牛酶溶液含有许多酶,如等。本实验中为空白对照组,其设定意义为。(3)将原生质体过滤到带筛网的离心管中,离心后收集沉淀,用洗涤。(4)原生质体是否符合要求仍需检验。检验方法为。答:(6分)(1)为了使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果(2)果胶酶和纤维素酶、消除不相关变量的干扰(3)等渗溶液(4)低渗透膨胀破碎法主题5 DNA和蛋白质技术23.(江苏多选题)以下关于DNA和蛋白质提取分离实验的陈述是正确的A.从细胞中提取DNA和蛋白质需要用蒸馏水破坏细胞用不同浓度的氯化钠溶液反复溶解沉淀脱氧核糖核酸,可以除去蛋白质C.蛋白质提取和分离过程中的透析可以从溶液中去除DNA蛋白质和DNA可以通过电泳分离和纯化38.(广东卷一)(10分)生物技术实践(1)商业植酸酶主要来源于微生物。在产酶菌株的筛选过程中,不溶于水的肌醇六磷酸钙经常被添加到基本培养基中以制成固体平板。植酸钙被植酸酶分解后,可以在平板上生成。目标菌株可以根据其大小进行选择。获得的菌株需要进一步测量植酸酶活性。活性测定可以用植酸钠作为底物,在一定条件下,活性可以用单位时间表示。(2)的主要成分是:含有多种酸、酶和其他蛋白质。请写下获得植酸酶的纯化方法及其依据。(3)为了构建基因工程菌,可以通过聚合酶链反应等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。聚合酶链反应包括多个循
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