疫苗基础知识与疫苗研制18598.ppt

疫苗的基础知识和疫苗的开发，宁波荣安生物药业有限公司乐威，生物产品概念是以微生物、细胞、动物或者人类源组织和体液等为原料，应用传统技术和现代生物技术而建立的，用于人类疾病的防治和诊断。 人用生物制品、细菌类疫苗(含类毒)病毒类疫苗抗毒素以及抗血清血液制品细胞因子生长因子酶体内及体外诊断用品等其他生物活性制剂，如过敏原、抗原抗体复合体、免疫调节剂、微生态制剂等。 疫苗的基础知识，疫苗(Vaccine )这个词和天花疫苗(天然痘苗)有关，拉丁语“vacc”是“牛”的意思。 疫苗的基础知识，与疫苗相关的三位伟大科学家：陈娜，巴斯德，科赫。 陈娜的贡献是发明了天花预防疫苗，18世纪50%的孩子不到10岁，其中40%死于天花。 每个大陆有几百万人死于天花。 1979年10月26日，世界卫生组织宣布天花已从地球上完全根除。 发明了巴斯德的贡献，解毒疫苗，发明了狂犬病疫苗，巴斯德把当时被狂犬咬的人的发病率从20%降低到了1%。 科赫的贡献是，炭疽菌是感染症由微生物引起的，疫苗的作用，疾病流行的预防，如果没有疫苗，世界会变成什么样人口可能还不到10亿人，平均寿命： 4045岁。社会发展和科学进步的速度至少减少一半，每年正如每年举行世界大战一样，每个人都生活在死亡的恐惧中，肿瘤疫苗、结核疫苗等治疗性疫苗。 疫苗基础知识、疫苗不可预防，疫苗分类、灭活疫苗(细菌、病毒、立克次体及类毒)灭活疫苗(AR疫苗、麻疹灭活疫苗)成分疫苗(流感亚单位疫苗)基因工程疫苗(乙型肝炎疫苗) 灭活疫苗、灭活疫苗、灭活疫苗、方法：在人工培养病原微生物(细菌或病毒)的条件下，促进方向性变异，大大失去病原性，但保持一定的剩馀毒性、免疫原性及的细菌性： BCG、炭疽、鼠疫等。 病毒性：麻疹(Mv )、小儿麻痹(OPV )、流行性腮腺炎、风疹、甲型肝炎、黄热病等。 对灭活疫苗和灭活疫苗进行比较，疫苗使用基本原则，正确选择使用疫苗严格把握高质量的免疫接种者免疫过程严格选定接种对象正确把握禁忌症保证冷链要求的疫苗使用。 疫苗接种方法，皮肤损伤法(炭疽，鼠疫)皮肤内接种法(PS苗)皮下接种法肌肉注射法(抗蛇毒血清，肉毒抗毒素)口服法(PS糖果)无针注射法鼻喷法和喷雾法。 疫苗免疫程序的内容，免疫初期年龄接种是否需要多次针次之间适当的间隔时间免疫加强联合免疫问题。 疫苗常见副作用，一般反应包括局部反应和全身反应。 局部反应：红色、肿胀、疼痛。 全身反应：发烧、头晕、无力。 异常反应：非特异性反应，包括非特异性反应、精神反应和变态反应：化脓。 精神性：晕厥，急性休克。 变态反应：皮疹、过敏性紫癜、血管神经性水肿。 我国微生物毒性等级，传染性强，实验室感染机会多，感染后易发病，发病后症状重，缺乏威胁生命的有效预防措施。 鼠疫菌、霍乱菌、天花病毒、埃博拉病毒等。 两种：实验室感染机会多，症状重，危及生命，难以治疗。 如炭疽菌芽胞菌、肉毒杆菌、狂犬病、出血热病毒、登革热病毒、a型和乙型肝炎病毒。 中国微生物毒性等级三种：只有一般危害，才能控制感染，有效预防。肺炎链球菌、百日咳杆菌、破伤风梭菌、乙型脑炎病毒、麻疹病毒、风疹病毒、狂犬病固定毒等。 4种：低致病性或人工减毒。 如鼠疫、霍乱、麻疹病毒、流行性乙型脑炎、病毒性肝炎。 狂犬病街毒和固定毒、街毒：在自然条件下使人和动物死亡。 固定毒：街毒被实验动物继承，削弱致病性，维持免疫原性。 狂犬病街毒是两种病原微生物，固定毒是三种病原微生物。 生产用狂犬病病毒株是狂犬病病毒固定毒。 疫苗研制的常用程序是制定质量标准，包括研究分离病原体、进行鉴定的生物免疫反应、确定免疫原的病原微生物体外培养、根据需要开发灭活疫苗和减毒疫苗、提取有效抗原成分、制作亚基疫苗的鉴定方法人为狂犬病疫苗流程、细胞复苏、细胞继代、疫苗接种、多次收获病毒液、超滤浓缩、灭活、柱色谱、离心、病毒收获液检定、病毒灭活检查、调制、分注、包装、精制液检定、半成品检定， 中国狂犬病疫苗发展简史1980年以前：羊脑疫苗1980年1995年：第一代小鼠肾细胞疫苗(铝佐剂) 1995年2000年：第一代小鼠肾细胞疫苗(铝佐剂) 2000年2005年：第一代小鼠肾细胞纯化疫苗和v 2005年至今：第一代小鼠肾细胞纯化疫苗和Vero细胞纯化疫苗(无佐剂)是中国狂犬病疫苗的发展、安全性、有效性、组织疫苗、细胞疫苗、纯化疫苗、1.3IU/剂、2.5IU/剂、4.0IU/剂、无防腐剂疫苗、冷冻干燥现代生物技术在狂犬病疫苗生产中的应用，生物反应器细胞培养技术膜过滤技术膜过滤技术冷冻干燥技术，大鼠肾细胞疫苗和Vero细胞疫苗原代细胞和传代细胞，原代细胞培养从体内组织提取细胞模仿体内出现环境，在无菌、适当的温度和碱度和一定的营养条件下繁殖传代细胞是指肿瘤细胞和细胞株传代过程中变异的细胞系。 细胞库通过培养细胞生产连续多批产品的细胞系统，证明这些细胞充分鉴定，没有外来因子。 细胞库包括原始细胞库、主细胞库、工作细胞库三级。 工作细胞库：由有限继承水平的主细胞库制备的均匀的细胞悬浊液，可以在多个容器中分配适当的体积，用于冷冻保存-130以下的生产。 验证了其起源、历史和生物学特性，包括毒的各种子批、原始种子批、主种子批和工作种子批，经临床研究证明安全性和免疫原性的病毒株悬浊液必须是单一批。 工作种子批：按照国务院药品监督管理部门批准的方法，从主种子批继承的所有抗病毒均悬浮，等量分装生产疫苗。三级仓库管理的必要性，避免混淆，保证种子细胞和毒种的稳定性，保证生产的均匀性，减小批次间的差异，Vero细胞培养方式，静止培养(克瓶)瓶培养悬浮培养(载体)，Vero细胞瓶传代消化液：胰蛋白酶和(或) EDTA的传代比率：1:31:6消化时间：细胞情况、消化液浓度、消化液pH值、消化温度培养液：含有810%新生牛血清的MEM、pH7.2培养液量：1500ml/15L瓶培养温度： 37、狂犬病子弹状长180nm、直径75nm的最大特征之一， 嗜神经组织性g蛋白是其主要表面抗原，病毒接种和收获，维持液：0.1%含人血白蛋白的MEM，pH7.6培养温度： 3335病用不同孔径的微孔过滤器澄清的目的是降低生物负荷，去除细胞碎片等影响超滤过程的杂质，部分去除Vero细胞蛋白质和DNA。膜过滤采用100K500K膜过滤的目的是浓缩狂犬病，减少收获液的体积，去除小分子的无效蛋白质，减轻后期处理体积和蛋白质的压力。 膜过滤的原理、膜过滤是在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂通过一定孔径的特制薄膜，不透过大分子溶质，残留在膜的一侧，部分纯化大分子物质的加压膜分离技术。 超滤原理、凝胶过滤色