M食品安全突发事件实验室检验及样品采集.ppt

本溪市疾控中心郭振坤食品安全突发事件样本采集和实验室检测(微生物部分)及疾控中心微生物实验室面临的形势。随着突发公共卫生事件处理条例的实施，各级各部门高度重视突发公共卫生事件，特别是发生在机关、学校、大型活动中的涉及人数多、社会影响大的突发公共卫生事件，引起了各级领导和社会各界的高度重视。这就对疾控中心的检测能力提出了更高的要求，也给微生物实验室带来了更大的压力。提高食物中毒检测的专业技术水平刻不容缓。食物中毒是指人们摄入生物、化学有毒有害物质或以有毒有害物质为食物后发生的急性或亚急性非传染性疾病。它属于食源性疾病的范畴。食物中毒不包括因暴饮暴食引起的急性胃肠炎、食源性肠道传染病(如伤寒)和寄生虫病(如囊虫病)，也不包括因大量或长期摄入某些有毒有害物质引起的慢性毒性。细菌性食物中毒实验室检测的意义。细菌性食物中毒具有易感性和流行性的特点。它可以全年发生，对人体健康造成危害。细菌性食物中毒的实验室诊断数据是确定其是否为细菌性食物中毒的重要依据。实验室诊断是确定中毒原因，找出中毒原因，控制中毒事件的蔓延。为食物中毒事故责任人的认定和处罚提供证据。(一)细菌性食物中毒，是指由被致病菌或其毒素污染的食物引起的急性或亚急性疾病。这是最常见的食物中毒类型。(2)特点：发病率高，死亡率低，季节性明显，无传染性。关于食物，如果你停止进食，就不会有更多的情况。血清学：微生物食物中毒可能有双相血清抗体凝集价格上涨；非微生物食物中毒血清抗体的凝集值没有增加。国内外数据显示，食品微生物污染是最重要的食品卫生问题，无论病例数量多少，细菌性食物中毒都居首位。我国每年细菌性食物中毒的发生率占所有食物中毒事件的30-40%，人数占中毒案件总数的60-90%。在各类食物中毒中，细菌性食物中毒最为常见，约占食物中毒总数的一半。细菌性食物中毒具有明显的季节性，大多发生在炎热的天气季节。细菌性食物中毒发病率高，死亡率低。它的大多数有毒食物是动物性食物。2001年，卫生部收到185起重大食物中毒事件的报告，15，715人中毒，146人死亡，其中第三季度报告的重大食物中毒事件、中毒案件和死亡人数最多。在报告的重大食物中毒中，细菌性食物中毒数量最多，化学性食物中毒发生次数最多，死亡人数最多。根据就餐形式的分类，集体食堂中毒人数最多，家庭食物中毒死亡人数最多。细菌性食物中毒在餐馆或家庭厨房很常见。细菌性食物中毒的发生是因为食物被细菌污染了。其次，在适当的条件下，细菌会在受污染的食物中繁殖或产生毒素。最后，食物没有被加热或不完全处理，细菌没有被杀死或细菌毒素被破坏。细菌性食物中毒分类，1)传染性类型：指因食用含有大量活菌的食物而引起的食物中毒。前提是食品被致病菌污染，并且在一定的时间和条件下，细菌在食品中大量繁殖，达到能引起疾病的数量，如沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌等。(2)中毒类型：由食物细菌污染、食物繁殖和在适当条件下产生大量外毒素引起的中毒。常见食物中毒是由葡萄球菌肠毒素和肉毒杆菌毒素引起的。，世界公认的8种细菌性食物中毒病原体，沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、溶血性孤菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、致病性大肠杆菌等。椰子假单胞菌。除上述8种常见的中国食物中毒病原体外，还有变形杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、空肠弯曲杆菌、溶血性链球菌、粪链球菌、志贺氏菌、气单胞菌、类志贺氏菌、溶藻弧菌、南方弧菌和非凝集弧菌。近年来，该市已造成食物中毒的细菌，变形杆菌，蜡样芽孢杆菌，沙门氏菌，腹泻大肠杆菌，副溶血性弧，志贺氏菌，弗尼斯杆菌。我市2002年至2010年共发生食物中毒26起，实验室诊断和检测食物中毒454人。食物中毒的常见原因是食物的细菌污染，共有18例细菌性食物中毒，299人中毒。食物中毒病原体检测，2009年西湖区汇海幼儿园20个蜡样芽孢杆菌，标本采集，标本质量在微生物检测中起着非常重要的作用，标本采集应在调查分析的基础上确定，这样才能采集到典型标本。同时，在调查和分析过程中，检查员和流量调节人员之间的密切合作可以确定更合理的检查样本和方法。样品采集的关键因素(1)，样品采集的数量和质量直接关系到治疗物质的测定。为了找到食物中毒的治疗药物，必须根据患者的临床症状和流行病学调查数据，有针对性地收集和收集所有与中毒有关的样本。这些样本包括剩余食物、患者粪便样本、员工粪便样本、血液、呕吐物、工具容器涂片。尤其是剩余食物、粪便样本、血液(初始阶段、恢复阶段)、样本采集的关键因素(2)，及时准确采样是查明食物中毒致病物质的重要环节。不同的采样时间与食物中毒的确证率有很大关系。由于取样不及时，可疑食品被处理，中毒现场被清理。即使收集了残留食物并检测到致病菌，也可能与患者的样本不符。因此，及时准确的采样至关重要。一、食物中毒现场采样用品注射器止血带消毒棉签75%酒精棉球碘棉球消毒空试管酒精灯配消毒纱布勺夹镊子剪刀记号笔无菌罐消毒玻璃试管消毒凳盒无菌塑料袋肛拭棉签工作服口罩手套消毒生理盐水无菌平板胶带无菌干棉球其他所需介质。一、细菌性食物中毒病原体检验方法的选择，食物中毒是一个紧急情况，在食物中毒过程中要求检验时间，所以实验室为了尽快出具报告，根据具体情况，选择正确的检验方法。引起食物中毒的细菌种类很多，它们的临床症状和潜伏期也不同。检查员应了解各种食物中毒的机理，了解食物中毒的治疗环节，并分析找出食物中毒的污染源和可能的传染途径。为了确定食物的原因，确定检查方向，当临床症状不明显，食物的原因不明确时，有针对性的选择会顾此失彼，而目前发生的食物中毒，已经从单一的细菌转变为两个或两个以上的常见原因，在测试开始时，你必须选择一个以上的项目。几种常用方法，经典方法：常规标准检验方法，包括形态学观察、培养特性、生化特性、血清学试验、噬菌体应用、抗体测定、毒性试验。新的快速检测方法：自动识别仪器、人工原料药法、一些特殊的显色介质、纸法。经典方法精度高，稳定性好，但耗时长：快速方法时间短，但精度差。在食物中毒检查中，应采用多种方法。该方法灵敏度高，可用于初步筛选。其他方法可用于同时验证和确认。(1)合成(5)根据情况储备一些新的快速检验材料。1、食品中常见中毒菌的分布、食物中毒诊断标准、食物中毒诊断标准和技术处理中华人民共和国卫生部通则。沙门氏菌食物中毒诊断标准和治疗原则ws/T13-19962。Proteus食物中毒诊断标准和治疗原则ws/T9-19963。蜡样芽孢杆菌食物中毒诊断标准和治疗原则ws/T82-19964。副溶血性弧菌食物中毒诊断标准和治疗原则ws/T81-19965。葡萄球菌食物中毒的诊断标准和治疗原则ws/T80-19966致病性大肠杆菌食物中毒的诊断标准和治疗原则ws/T8-19967肉毒梭菌食物中毒的诊断标准和治疗原则ws/T83-19968产气荚膜梭状芽孢杆菌食物中毒的诊断标准和治疗原则ws/T7-19969椰子假单胞菌亚种食物中毒的诊断标准和治疗原则ws/T12-1996， 中华人民共和国国家标准食物中毒诊断标准和技术处理总则(GB14938-94)，4.2细菌性和真菌性食物中毒诊断标准总则，食用细菌性或真菌性食物中毒引起的食物中毒，即细菌性食物中毒或真菌性食物中毒，诊断标准总则主要依据：4.2.1流行病学调查数据； 4.2.2潜伏期和患者的具体中毒表现；4.2.3实验室诊断数据、中毒食品或与中毒食品相关的物品或患者标本的检验数据。诊断标准一般原则4.1食物中毒诊断标准一般原则食物中毒诊断标准主要基于流行病学调查数据、患者潜伏期和中毒的具体表现。进行实验室诊断以确定中毒原因。4 .1.1中毒患者在相似的时间内都吃过一些常见的中毒食物，没有吃过的人不会中毒。停止吃有毒食物后，疾病很快就停止了。4.1.2潜伏期短，发病急，病程短。4.1.3所有中毒患者的临床表现基本相似。4.1.4一般来说，人与人之间没有直接感染。4.1.5食物中毒的确定应尽可能包括实验室诊断数据。如果由于取样不及时或由于药物治疗或其他技术和学术原因而无法获得实验室诊断数据，则可确定原因不明的食物中毒。如有必要，可由三名副主任医师以上的食品卫生专家进行评估，4.2细菌性和真菌性食物中毒的诊断标准一般原则因摄入带有细菌性或真菌性中毒的食物而导致的食物中毒为细菌性食物中毒或真菌性食物中毒。诊断标准的一般原则包括：4.2。1 .流行病学调查数据；4.2.2患者潜伏期和具体中毒表现：4.2.3实验室诊断数据、中毒食品或与中毒食品有关的物品或患者标本的检查数据。几种常见食物中毒的检验程序，副溶血性弧菌食物中毒的诊断标准和治疗原则ws/t81-1996，1主题和适用范围本标准规定了副溶血性弧菌食物中毒的诊断标准、测定原则和治疗原则。本标准适用于由副溶血性弧菌引起的食物中毒。2参考标准GB 4789.7-94食品卫生微生物检验副溶血性弧菌检验GB 14938-94食物中毒诊断标准和技术处理的一般原则3诊断标准3.1流行病学特征3.1.1引起中毒的主要食物是海鲜(鱼、虾、蟹、贝类等)。和它们的产品)以及其他被细菌直接或间接污染的食物。3.1.2由该细菌引起的食物中毒大多发生在夏季和秋季(6月至9月)。3.2.1急性发作和短潜伏期的临床表现。3.2.2主要症状是腹痛、腹泻(主要是水样便，严重时伴有粘液便和血便)、恶心、呕吐和发热，其次是头痛、出汗、口渴和其他症状。3.3实验室诊断3.3.1从中毒食品、食品工具、腹泻或呕吐中检测到具有相同生物学特征(见GB4789.7)或血清型的副溶血性弧菌本标准规定了沙门氏菌食物中毒的诊断标准、测定原则和治疗原则。本标准适用于沙门氏菌引起的食物中毒。2参考标准GB4789.4食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂GB14938食物中毒诊断标准和技术处理一般原则3诊断标准3.1流行病学特征3.1.1中毒食品主要是动物性食品。3.1.2中毒患者都吃了某些可疑原因的食物。临床症状基本相同，潜伏期为4 48h。3.2临床表现的主要症状包括恶心、头晕、头痛、发冷、冷汗、全身无力、饮食不佳、呕吐、腹泻、腹胀、腹痛、发热，严重时还包括痉挛、脱水、休克等。急性腹泻主要是黄色或黄绿色水样便，有恶臭。上述症状可能因疾病的严重程度而异。3.3实验室诊断，3.3.1从疑似食物、患者呕吐或腹泻粪便中检测到相同血清学类型的沙门氏菌。如果没有可疑的食物，也可以从几个病人的呕吐物或腹泻粪便中检测到相同血清学类型的沙门氏菌。3.3.2必要时，可观察到分离的沙门氏菌和患者血清之间的凝集效价，恢复期应略高于初始期(一般约高4倍)。3.3.3沙门氏菌检测方法应按照GB4789.4. 4测定原则4.1进行，符合该菌的流行病学特征和临床表现。4.2实验室检测结果应符合3.3.1或3.3.2的要求(如果未检测到相同的细菌，则可通过凝集试验进一步确认食品和患者血清中检测到的沙门氏菌)。4.3符合4.1和不符合4.2应遵守英国标准14938。1、蜡样芽胞杆菌食物中毒诊断标准和治疗原则、主体内容和适用范围本标准规定了蜡样芽胞杆菌食物中毒诊断标准、判定原则和治疗原则。本标准适用于蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒。2参考标准GB 4789.14-94食品卫生微生物检验蜡样芽孢杆菌检验GB 14938-94食物中毒诊断标准和技术处理的一般原则。诊断标准3.1流行病学特征3.1.1大多数导致中毒的食物是剩饭、米粉、甜酒、剩菜、甜点、牛奶和肉。3.1.2食物中毒通常是由于食物保存温度高(20以上)和食用前存放时间长造成的，这使得食物中的蜡样芽孢杆菌繁殖。3.2临床表现3.2.1呕吐类型：主要症状为恶心、呕吐，头晕、四肢无力、潜伏期短(一般为0.5 5小时)。3.2.2腹泻型：腹痛和腹泻为主要类型，潜伏期较长(通常为8 16小时)。3.3实验室诊断3.3.1中毒食品中蜡样芽孢杆菌的测定(根据GB4789.14)i一般每克食品中的蜡样芽孢杆菌。3.3.2中毒患者呕吐物或粪便中检出的蜡样芽孢杆菌与中毒食品中检出的菌株应具有相同的生化或血清型。4判定原则4.1符合本标准的流行病学特征和临床表现。4.2在做出判断之前，实验室诊断必须符合3.3.1或3.3.8。5处理原则按GB14938执行。本标准规定了变形杆菌食物中毒的诊断标准、判定原则和治疗原则。本标准适用于由变形杆菌引起的食物中毒。2参考标准GB4789.28食品卫生微生物检验染色法、培养基和试剂GB14938食物中毒诊断标准和技术处理总则3诊断标准3.1流行病学特征：3.1.1变形杆菌食物中毒是一种常见的细菌性食物中毒，发病季节多在夏季和秋季。3.1.2食物中毒主要由动物性食物引起，其次是豆制品和凉菜等。食物中毒是由生产过程中的污染引起的。3.1.3