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文档简介

酿酒酵母是一种重要的工业微生物，也是葡萄酒品质的灵魂。自古以来，葡萄酒都是把成熟葡萄破碎，利用果皮表面的酵母菌进行自然发酵，这种方法既省事又有效。随着酿酒技术的进步，人们开始用纯净的酿酒酵母进行发酵，具有杂菌不易繁殖、发酵迅速彻底、酒精得率高、残糖低、酒容易澄清、酒质好等优点。,怎样获得纯净的酿酒酵母呢？,微生物的实验室培养自酿葡萄酒中酵母菌的分离与纯化,一、培养基,概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。,微生物需要的营养物质,（2）还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。,（1）一般都含有碳源、氮源、无机盐和水等营养物质；,绝大多数微生物并不能利用琼脂作碳源，琼脂一般只起到凝固的作用。,按照培养基外观的物理状态分类,固体培养基（1.5%2%琼脂）,菌落（一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体）,液体培养基（不添加琼脂）,微生物生长后培养基变浑浊,半固体培养基（0.2%0.5%琼脂）,如果要获得大量的酵母菌菌体，应该用固体培养基还是液体培养基？,二、无菌技术,在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。,手上的微生物,培养皿灭菌培养基未灭菌,无菌技术主要包括：,对操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；对器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；操作过程在酒精灯火焰附近进行；避免已灭菌的材料用具与周围物品接触。,制备培养基,三、分离纯化酵母菌,倒平板,分离纯化酵母菌,平板划线法,稀释涂布平板法,28恒温倒置培养,观察结果，菌落鉴定,计算,溶化,称量,灭菌,微生物的接种技术,平板划线法,为什么要进行稀释？,稀释涂布平板法,1.怎样确定菌落是否是酵母菌？2.怎样进行进一步的纯化？3.怎样进行大规模的培养？4.怎样进行菌种保藏？,课题延伸菌种保藏,1.斜面低温保藏法：将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至4的冰箱中保藏。缺点：保存时间不长，每3-6个月需要转移到新鲜的培养基。,2.甘油管冷冻保藏法将菌液与灭菌后的甘油等体积混合后，
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