细胞生物学156-10-3第九章B：内膜系统、蛋白质分选与膜泡运输.ppt

信号序列)，研究过程20世纪60年代，乔治帕雷德用示踪技术研究培养细胞中蛋白质的分泌，莱德曼和萨巴蒂尼用分离的RER囊泡研究核糖体合成的蛋白质的命运，洛克菲勒大学的布洛贝尔等人在1971年提出了信号序列的概念。1972年，米尔斯坦和他的同事发现了：从细胞质中分离的IgG轻链：的20多个氨基酸残基在细胞外释放的IgG轻链：的不到20个氨基酸残基。通过体外实验证实了信号肽的存在。RER对产品的影响？蛋白水解酶实验？多聚体的体外翻译，体外合成实验，多聚体实验，信号肽的特性？序列特征15-35个氨基酸残基，包括4-12个疏水残基？特异性：位置：n端突出肽？信号肽内含物。早期的信号假说(signal假说)，1975年，布洛贝尔等人正式提出了信号假说，关键点是：合成开始于游离核糖体；N端信号序列通过自由碰撞与内质网膜接触，然后插入内质网膜。蛋白质以环的形式穿过内质网膜。蛋白质：的存在方式如果信号序列被信号肽酶：切除并完全进入空腔如果信号：膜蛋白的转移停止，信号识别颗粒和对接蛋白质。SRPSRPISACYPOLIPOLIOPRIOPELOPAREPOIN ARTICLE六个离散多肽A300-核苷酸核糖核酸三个功能域：翻译暂停域(P9/P14)信号肽识别结合位点(P54)SRP受体蛋白结合位点(P68/P72)。信号识别部分，对接蛋白，DP是内质网膜上的SRP受体蛋白，两个亚基：亲水性亚基，疏水性亚基转座子多拷贝性融合蛋白61复合物装配体形成反转录通道5 6Nm高8.5 Nmin直径，具有中心核，大约Nmin直径哺乳动物细胞中有三种类型的sec 61，即，和Sec61具有10个跨膜螺旋，信号假说体外实验已经证明了SRP颗粒和SRP受体、由SRP-DP识别的国内生产总值-GTP交换循环、由游离核糖体合成的内质网转运蛋白、定向单链抗体肽、跨膜信号和膜蛋白定位，单跨膜蛋白？启动转移信号(STARTTRANSFERSIGNAL)、停止转移序列(STOPTTRANSFERSEQUENCE)、可切割信号序列(N-N-末端)、内部信号序列(INTERNALNOCLANERABLE SIGNALSEQUE)、信号肽和启动跨膜序列。停止传输序列，内部信号序列？单个跨膜蛋白的取向裂解的信号当量脱辅基脱辅基的胞质溶胶内部的信号当量氨基末端脱辅基脱辅基的胞质溶胶羧基末端脱辅基脱辅基的胞质溶胶，单个跨膜蛋白的取向，单跨膜蛋白方向二，停止转运信号和多跨膜蛋白的方向产生：个蛋白，这些蛋白的方向为：次级和多重跨膜蛋白质，多重启动和终止跨膜信号，整合的主要拓扑分类，整合的分子转移，信号序列和膜蛋白方向。proteinfoldingandprocessingintheer，蛋白折叠企业 BIP蛋白：BIP是一种分子伴侣，是重链结合蛋白的简称。BiPithOutBoundtotheundfolddpolyptiontechainasitcrosseTheme膜和theassemblyofmultisubunitproteinswithingtheir，BiP蛋白在内质网中的作用，内质网中蛋白的加工和修饰，形成硫化键和连接链之间的半胱氨酸酯酶3360蛋白二硫化物异构酶N-连接糖基化作用附加糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚从heER，导出蛋白质9.3.1高尔基体结构和极性、形态结构连续的全膜结构。扁平囊泡、小囊泡、大囊泡、高尔基体的形态结构、高尔基体的极性、顺式高尔基体网络、CGN (CGN)顺式平面、形成平面、中间囊泡、跨高尔基体网络、TGN)侧面、成熟表面、区域性软高尔基体、数量和化学成分等。蛋白质和脂质高尔基复合体比内质网和质膜：高40%。质膜：中蛋白质和脂质占60%。内质网：蛋白20%，脂质50-60%；高尔基体：蛋白质60%，脂肪40%；高尔基复合体的标志酶是糖基转移酶。9.3.2高尔基体功能，蛋白质转运，内质网向高尔基体侧转运，内质网蛋白反向转运，高尔基体侧向高尔基体侧转运，高尔基体蛋白转运，内质网滞留蛋白滞留机制，内质网滞留信号： Lys-Asp-Glu-Leu-COO-，即KDEL信号序列KDEL信号受体内质网膜高尔基体膜内质网滞留蛋白转运，内质网蛋白转运，与高尔基体内的蛋白质保护作用， O-结合N-连接寡糖的进一步加工，N-连接的多聚半乳糖的加工，高尔基体对蛋白质的糖基化和转运的实验证明：中国仓鼠卵巢突变体：N-乙酰氨基葡萄糖转移酶缺乏水疱性口炎病毒(VSV)，它能编码膜整合糖蛋白(VSV-G)感染实验高尔基体膜泡中蛋白质的分离、检测和分析、糖基化和转运。蛋白质的分类和扩展来源于高尔基体，分类的概念，广义，狭义，内膜系统中的蛋白质分类，高尔基体侧网络中的分类，分类主要由信号序列和受体之间的相互作用决定，蛋白质分类，高尔基体的蛋白质分类，某些类型的信号肽特征，9.4溶酶体，动物细胞中的一种细胞器，是球状的，并被一层单位膜所覆盖。溶酶体含有50多种水解酶，在细胞消化和保护中发挥作用。当细胞受损时，溶酶体可以释放水解