内毒素的检测及意义.ppt

内毒素训练，-五弦风，内毒素的基础，仪器试剂的简要介绍和实验原理，临床试验的兴趣问题，三大知识点，1892年，科学家理查德研究弧菌霍乱时发现革兰氏阴性杆菌细胞壁外膜含有不溶性成分。这种成分会引起人体热、休克、器官损伤等病理表现，其毒性效果、性质和外毒素有相当大的差异，因此用内毒素一词来说明这种物质。此后多年，革兰氏阴性细菌细胞壁外膜的微结构技术及生物分析技术证实了内毒素是磷脂双分子层结构。内毒素的发现历史，内毒素的构成，o-特定抗原，脂质a，核心多糖，内毒素的定义和危险，内毒素(Endotoxin)是革兰阴性细菌细胞壁外膜的脂多糖(lipopolysaccharide内毒素直接作用于人体，激活组织内炎性细胞和炎症因子，使身体发热，引起全身炎症反应，导致播种血管内凝血、休克、多器官衰竭等严重的病理生理症状，从而威胁生命。定义，危害，内毒素的物理、化学性质，可过滤性：可通过滤膜，水溶性：LPS的O-特定Ag是亲水性，可吸附性：可被活性炭吸附，易被强酸性，强碱和强氧化剂破坏，耐热性：完全消失时为250 人体液体检查用Kim-kit湛江博康海洋生物产品有限公司生产，20世纪60年代，发现了血液接触内毒素时发生特定聚集反应的古老海洋生物。试剂的发明，1968年1月JackLevin和FrederikB。Bang教授在美国马萨诸塞州的WoolsHole海洋生物研究所成功分离血细胞，检测细菌内毒素研制试剂成功，开启了人类认识和检测内毒素的新时代！套件特性，试剂是唯一能检测内毒素水平的生物试剂，用更精确的动态浊度法检测。由试剂、I # II检查前处理液、除菌引起的热原化验管和采集血管、吸头和检查用水组成，仔细设定血液前处理过程，有效排除血细胞和蛋白质的干扰，准确评估测试样本中内毒素水平，使用内毒素国家工作标准剂进行质量控制评价，测试结果准确， 使用国际通用的内毒素活性单位(EU/ml)测试的样品中内毒素的致病性，内毒素的单位-eu/ml，实验原理，通过试剂与内毒素溶液混合后，絮凝反应会产生浊度变化，通过浓度-时间反应曲线准确测定测试中样品的内毒素浓度。实验原理，实验原理，试剂和内毒素反应是特定的“s”曲线，以光的密度值为0.02点，内毒素的浓度与反应时间成反比，BET试验样本范围，腹腔积液，内毒素检测方法，定性检测，凝胶法，凝胶法作为判断试管内反应物凝胶坚固程度的标准，容易受到影响。限量测试的最低检测限制为0.035EU/ml，由于试验稀释倍数，容易被试验产品干扰，误差大。因此，凝胶法不适合对体液进行临床细菌内毒素检查。用显色法检测的特征显色矩阵法利用试剂和内毒素反应过程中产生的凝血酶，测定特定基质显色的着色块数量，并通过测定内毒素含量的方法，根据产品颜色判定内毒素浓度。该方法试剂比较贵，操作复杂，在一定范围内灵敏度高，特异性高，但检测范围小。动态浊度法检测特性，动态浊度法检测特性，使用细菌内毒素在形成试剂和凝胶的过程中，可以定量测定浊度动态变化引起的细菌内毒素水平，动态浊度法检测范围宽度，检测范围0.005EU/ml100EU/ml，范围广泛，样品中内毒素含量，标准化水平高，适合临床体液细菌内毒素引起的发热和重症早期诊断检查， 早期判断革兰氏阴性细菌的感染情况，(由革氏菌引起)对重症疾病的早期诊断，临床医生快速合理地筛选适当的抗生素，适合抗感染治疗效果和预后，肠内毒素血症的初步判断和评价等，恶性肿瘤，感染，结缔组织，g 7g，发热内毒素和血液培养结果的比较，内毒素超标，血液培养阳性，内毒素和痰培养结果的比较，BET PCT(降钙素原)和PCT(降钙素原)的差异，但LPS能直接引起人体发热和炎症反应，PCT 对于新生儿和接受移植手术的患者，感染对检测PCT有限制，但BET对此没有限制，分段区间说明，0 0.035 eu/ml没有明显的内毒素血症，0.035 0.1 eu/ml临床观察期，0.1 1.0EU/ml内毒素血症，1