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文档简介

根据观察方法,显微镜的七种观察方法分为七种类型:明场、暗场、荧光、偏振、相位差、弥散性血管内凝血、霍夫曼、显微观察法和7-1,1。明场:照明光通过聚光器直接进入样品,穿过样品,进入物镜,最后被观察到。亮视野、亮视野观察模式、常规观察模式的应用领域:常规显微镜检查、病理和染色标本的优点:视野亮度高且均匀,应用范围广,操作简单,价格低廉。荧光观察物镜的缺点:透明样品对比度低,样品无立体感。根据观察方法,分为7-2,2。暗场:照明光通过物镜的外围入射到样品上,来自样品的干燥和衍射光进入物镜并最终被观察到。粒子反射或衍射斜射光的廷德尔现象增加了人眼的可见度。2特征观察到极微小的物体,分辨率为0.02 0.004um(亮场0.4 m)-超显微。缺点:只能观察到物体的存在,运动和外形都不方便。样品要求很高(灰尘、覆盖层和载玻片)。4、应用:微小颗粒、细菌形态观察、细菌计数、透明标本观察等.根据观察方法,可以分为7-3,3。荧光:使用的观察方法是,一些物质在受到紫外光或短波长光的激发和照射后,可以发出比激发光波更长的荧光。荧光,什么是荧光?被物质中的电子吸收的光的能量从低能量状态变为高能量状态,当它返回到低能量状态时释放的光是非温度辐射光冷光。也就是说,物质吸收短波光并发射长波光。显微荧光使用光源激发光化荧光,荧光自发(内在)荧光二级荧光的类型,荧光的性质和光的吸收要求激发光源的荧光波长激发波长(热能的损失)。荧光强度远远小于激发光的强度。衰减荧光的强度取决于激发光的强度、待检测物体的浓度、荧光效率,荧光显微镜的优点和用途,优点:高检测能力(扩增效应),对细胞的刺激小(活体染色)和多重染色应用:观察物体结构中荧光素的荧光存在或不存在,颜色比较,物质鉴别,荧光量的测定,如抗体的荧光,物质的定性和定量分析,荧光显微镜的类型透射型,荧光显微镜的类型脱落型,荧光显微镜的主要部件, 透射汞灯光源激发滤光器吸收滤光器暗场聚光器、下落汞灯光源激发滤光器分色镜吸收滤光器、下落荧光显微镜结构、吸收滤光器、激发滤光器、下落荧光显微镜结构、荧光显微镜光源、汞灯光源:提供激发光(U、V、B、G)、氙灯光源:峰值更宽、更稳定、荧光显微镜激发透镜组、激发滤色器:激发波长选择、 激发透镜组(激发块):t%、nm、带通、入射光、发射光、激发滤色片、光谱滤色片、吸收滤色片、入射荧光显微镜、吸收滤色器:荧光透射、阻挡杂散光、分色镜:反射激发光、荧光透射、 A透射、A反射、b透射、b阻挡、nm、nm、T%、T%、特征和功能.滤色器的选择、荧光素的特性、滤色器的特性、激发、颜色分离、吸收和.带宽对图像的影响,SWB : BP 420-480,WB : BP 450-480,WIB : BP 460-490,NB : BP 470-490,FITC圆周率,多重染色标本的多色观察,FITC德克萨斯DAPI,三色滤光片的特性曲线,激发,分色,吸收,双色标本的单色和双色观察,WU,WIB,双波段,WIBA,假发,WIB,DAPI FITC,FITC PI,单色滤光片的特性曲线,双色滤光片的特性曲线,当前的显微镜特征和各种过滤器,自由组合激发块、吸收滤色器、激发滤色器、分色镜、油镜应使用荧光油、应用物镜灯条,灯条完全打开,灯条适当调低以减少杂散光干扰,荧光衰减、抗衰减法使用抗衰减剂来选择衰减小的荧光素,以降低激发强度,降低样品中的氧浓度,使样品具有衰减性,使用抗衰减剂的效果,汞灯盒结构、灯室、上下旋钮、左右旋钮、聚光镜旋钮、根据观察方法分为7-4,4。偏振:一些物质可以在具有特定夹角的两个偏振滤光器之间呈现鲜明的对比,或者根据双折射和取向呈现颜色,两极分化,原理1一种显微镜,自然光(多振动表面),根据波动光学原理观察和精确测量样品细节,或通过透明物体改变光束的物理参数,从而判断物质的结构。偏振器1、偏振器2、偏振光(单一振动表面)、各向同性:单一折射器、光性质不会因照射方向而改变、普通气体、液体、非晶固体等的各向异性:双折射、光速、折射率、吸收和振动表面、振幅随照射方向而变化、晶体、纤维等。A根据该观察方法,相位衬度:在穿过分别位于聚光器和物镜的一对互补光环后,利用光产生干涉(强度叠加或衰减),即相位差被转换成光强度差,从而可以清楚地观察到不容易看到的透明样品(即像活细胞这样的相位物体)。相位差(对比度)、相位差(对比度)、相位差(对比度)、相位差(对比度)和相位差(对比度)的原理用于基于被测物体的光程(折射率厚度)差的显微镜检查,即干涉现象用于将相位差改变为人眼可识别的振幅差,共轭表面:吸收光、直射光通过、补偿表面:相位延迟、衍射光通过、物镜相位板、聚光镜环形光阑、 2特征鉴定活细胞最实用、最经济的方法3缺点:高光强度切片不能太厚(5 10um),盖和载玻片必须符合标准。 用单色滤光片操作更麻烦,荧光效果不如明视场物镜好,4应用:无色透明的活标本精细结构,检查,活细胞(培养细胞,分离细胞)的鉴定。根据观察方法,分为7-6种。6.DIC:照明光由差分干涉对比棱镜变为两个衍射光束,样品高度的差异造成光程的微小差异,而光程的差异则通过差分干涉对比棱镜和检偏器变为明暗对比。有时,敏感色板(波长补偿板)也用于增强高度差的颜色变化。DIC,相差,DIC微分干涉相差,1原理是通过一个特殊的棱镜将偏振光分解成相互垂直的、强度相同的光束,光束携带极近的两个点(小于显微镜的分辨率)通过被测物体,从而在相位上略有不同,使图像呈现出立体感。嘿。2个特征可以使待测物体产生更直观的三维立体感知观察效果,无需特殊的物镜,与荧光观察更好的匹配可以调节背景和物体的颜色变化,达到理想的效果。缺点:光强度高,双折射物质不能达到DIC显微镜检查效果,不能应用于塑料容器培养的观察,显微镜检查灵敏度具有方向性,且调整较为复杂,有4种应用:无色透明活体标本、无色荧光标本、染色标本、显微操作等精细结构。根据观察方法,分为7-7种。霍夫曼:光通过聚光器中的狭缝光阑,被“相位物体”(透明体)折射,然后通过特殊物镜中具有暗、灰、亮区域的滤光器,最后根据不同的折射角度使光呈现明暗变化,得到的图像具有类似于弥散成像的浮雕效果。霍夫曼1原理斜光照射样品产生折射和衍射,光线通过物镜光密度梯度调节器产生不同的阴影,使透明样品表面产生明暗差异,增加观察对比度。历史1975年,罗伯特霍夫曼博士于2002年发明,当专利到期时,各种显微镜制造商推出了以他们自己命名的RC技术产品。3.提高未染色样品可见度和对比度的特性;图像显示阴影或几乎三维结构,没有光晕。可检测的双折射物质(岩石切片、晶体、骨头);可以检测培养皿中的细

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