DB51T 1211-2011 桔实雷瘿蚊监测与鉴定技术规程

16 川省 地 方 标 准 1/T 1211 2011 桔实雷瘿蚊监测与鉴定技术规 程 2011 - 01布 2011 - 03施 四川省质量 技术 监督局 发布 1211 2011 I 目 次 前言 . 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语及定义 . 1 4 原理 . 1 5 仪器及用具 . 1 6 试剂及溶液配制 . 2 7 虫情监测 . 2 8 室内检验鉴定 . 2 9 结果判定 . 3 10 样品保存及处理 . 3 附录 A（资料性附录） 桔实雷瘿蚊的形态特征 . 5 附录 B（资料性附录） 桔实雷瘿蚊形态特征图 . 6 附录 C（资料性附录） 桔实雷瘿蚊为害症状描述 . 7 1211 2011 言 本标准分为范围、 规范性引用文件 、 术语及定义、原理、仪器及用具、试剂及溶液配制、虫情监测、室内检验鉴定、结果判定、样品保存及处理等部分。 本标准由四川省农业厅提出并归口。 本标准起草单位：四川省农业厅植物检疫站，成都市植保植检站，蒲江县植保植检站，丹棱县植保植检站。 本标准主要起草人：蒋辉、 郭迪金、刘可、谭家兴、余坚志、汪世元、王黎 明、唐建中。 1211 2011 I 桔实雷瘿蚊监测与鉴定技术规程 1 范围 本标准规定了桔实雷瘿蚊的虫情监测、室内检验鉴定、结果判定、样品处理及标本保存的技术要求。 本标准适用于桔实雷瘿蚊的监测与鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 业植物调运检疫规程 3 术语及定义 下列术语和定义适用于本标准。 监测 实植物检疫状况的官方持续过 程。是一种早期发现某种有害生物入侵定居的有效方法。 桔实雷瘿蚊 双翅目（ 瘿蚊科 (、瘿蚊亚科 (瘿蚊超族(雷瘿蚊属 (虫。主要危害柑橘果实，以幼虫随被害果作远距离传播，其卵也可随果实传播，蛹则可随带土苗木进行远距离传播。 4 原理 桔实雷瘿蚊的形态特征、传播途径、生物学特性及受害果实症状，为制定监测鉴定技术规程提供了依 据。 5 仪器及用具 器 体视显微镜、干燥器。 具 0号画笔、试管、载玻片、盖玻片、解剖针、表面皿、养虫杯、养虫箱、小型喷雾器。 1211 2011 试剂及溶液配制 除非另有说明，在检验中仅使用确认的分析纯试剂和蒸馏水。 剂 试剂包括： 无水乙醇 无水乙酸（冰醋酸） 丁香油 加拿大胶 液配制 溶液配制包括： 二甲苯酚混合液 苯酚晶体二甲苯，（ 1 3）。 10 %氢氧化钾溶液 称取 10 00 75 %乙醇溶液 量取无水乙醇 75 5 90 %乙醇溶液 量取无水乙醇 90 0 保存液 量取无水乙醇 75 5 加入 1 7 虫情监测 测范围 监测范围包括各柑桔生产地、水果市场，重点是柚类和橙类。 测方法 间监测 虫的监测 6月上旬到 10月上旬，在果园的荫蔽、潮湿处，于果实的背阴面仔细查找桔实雷瘿蚊成虫，发现疑似成虫，收集在 75 %乙醇溶液中，带回室内鉴定。 虫和蛹的监测 分别于 7月上、中旬的第一次落果高峰、 9月中、下旬的第二、三次落果高峰和 10月中、下旬第四次落果高峰 ，在柑桔果园中采集未熟先黄果和落地果， 发现符合附录 回室内培养、鉴定。 并取落地果周围 2 5 带回室内检查。 果市场监测 按 业植物调运检疫规程 用肉眼或 手持 放大镜 对样品 果实 逐个进行检查，发现符合附录 回室内检验鉴定。 8 室内检验鉴定 1211 2011 虫和蛹的检查 将取回的土样用清水漂浮法检查，发现疑似幼虫和蛹，收集在 75 %乙醇溶液中，待鉴定。 虫培养 取一养虫杯，加入经用水煮沸 5 采集到的疑似虫果置 于砂土表面，然后置于养虫箱中室温下饲养，并用小型喷雾器喷水 ,进行沙土保湿处理。待成虫羽化后，用 0号画笔蘸取 75 %乙醇溶液将活成虫浸入 75 %乙醇溶液中，待鉴定。 片标本制作 脉标本制作 从 75 %乙醇溶液中的成虫标本上取下一翅，在体视显微镜下放于载玻片上，盖上盖玻片即成翅脉标本。 体标本制作 本软化 将标本（成虫、幼虫或蛹）从 75 %乙醇溶液中取出，用 10 %氢氧化钾溶液浸渍，或短时加热（ 100下处理 2 5 或长时冷处理（在酒精里保持 6个月以上的标本要 12 在处理过程 中观察到标本软化而且部分透明时即停止。将标本转入表面皿中，用解剖针轻轻挤压腹腔内容物，若觉仍然坚硬，应继续浸渍直至软化。 水透明 将标本转入蒸馏水中 5 10 数滴冰醋酸中和多余的氢氧化钾。把标本依次转入 75 %乙醇溶液和 90 %乙醇溶液各 10 轻轻挤压除去残存的蒸馏水后，再转入无水乙醇中浸2 5 后将标本转入二甲苯酚混合液中 12 体即可完全脱水透明。 剖封片 将标本转入无水乙醇中清洗后，移入滴有丁香油的载玻片上，在体视显微镜下把 成虫解剖成头、胸（具胸足）和腹三部分，再进行整姿。整姿时，使头正面朝上，触角披向两边；使腹部背面朝上，雄性外生殖器和雌虫产卵管对称地展示出来；使胸部侧面向上，足和剩下的另一翅展示出来。整姿完成后，用三块小圆盖片（ 7 10 别盖住三部分，滴上加拿大胶封片。贴上标签，置于 35的烘干器上干燥数日。 制作幼虫玻片时，使腹面朝上而且应放置对称。 定 将制作的带有翅脉、头、胸和腹的成虫玻片标本或幼虫玻片标本置于显微镜下，观察其形态特征，按附录 进行鉴定。 9 结果判定 成虫符合附录 ，可判定为桔实雷瘿蚊。 老熟幼虫和蛹的鉴别作为辅助鉴定手段。 1211 2011 0 样品保存及处理 本保存 片标本的保存 将制好的玻片标本移入标本柜中保存。 虫、蛹标本的保存 将采集到的幼虫或蛹用水清洗后，投入 60 （ 5 ）热水中浸泡杀死，在室温下冷却后，置于保存液中保存。 品处理 样品检验完成后，除用作标本保存的样品外，其它样品连同寄主果实及其培养介质进行灭活处理。 1211 2011 V A A 附 录 A （资料性附录） 桔实雷瘿蚊的形态特征 虫的形态特征 成虫 雄虫体长 1.6 2.3 红色 至褐红色 ， 下颚须 4节，稀被刚毛，基 节长稍大于宽， 4节长度比为 2： 2。触角 14节，鞭节二结型；第 1、 2节愈合；基肿节色较深，环丝 1轮，长达中茎中部，基部具 1轮刚毛；端肿节具 2轮环丝和 1轮刚毛，环丝较短，端轮环丝伸达下节基部。 翅展 1.8 .9 翅面有不规则毛斑， 仅具纵脉 3条 ， 翅顶与 足长，密被针形鳞片，前中足跗爪分齿，后足跗爪简单无齿，爪间突短于爪。腹部被针形鳞片，第 2至 6腹板尾毛 1排，中部两侧各具 1组刚毛，第 1至 6背板尾毛 1排。雄外生殖器基抱节较短，均匀被毛，端抱节较长，基 1/3光滑，其余被毛，端齿强；上板 微毛，下板较长，端缘微凹，端 1/4被微毛；阳茎略长于下板。 雌 虫 体形比雄 虫 大 ，体长 2.1 2.5 角鞭节圆柱形，端颈短；环丝紧贴。翅长 1.8 .3 卵管极长，可翻缩，尾叶分离，长椭圆形，稀被刚毛，其余同雄虫。 虫的形态特征 初孵时白色透明，肉眼难以察觉。成熟幼虫体长 3 4 色， 13节，纺锤形或圆锥形。头壳较短。胸部有三角形红色斑点，末端有 4个突起，中胸腹板有“ Y” 形 剑 骨片 。腹部有浅黄斑，第 8腹节尾瘤 4对，其中 1对无毛 ，大型，圆锥形。 的形态特征 卵 长椭圆形 ， 微小 ，初呈白色透明，孵化前卵内出现红色点状。 的形态特征 被蛹，长 2.7 3.2 外被褐黄色丝茧，体红褐色，近羽化时呈黑褐色，头顶具分叉的额刺 1对；雌蛹足达腹部第 5节。雄蛹足较长，达腹部第 6节。 1211 2011 B 附 录 B （资料性附录） 桔实雷瘿蚊形态特征图 桔实雷瘿蚊各虫态形态特征图 1、雌成虫 2、雄成虫 3、蛹 4、雌翅 5、雌平衡棒 6、卵 7、幼虫 8、雌触角 9、雄触 角 （选自倪朝选等桔实雷瘿蚊发生及防治研究初报） 1211 2011 C 附 录 C （资料性附录） 桔实雷瘿蚊为害症状描述 桔实雷瘿蚊成虫多 产卵于 果实背阴处的蒂部、脐部缝隙处、果间交接处的 幼果皮层，卵散产或聚生，产卵处常为极细小的愈合硬结点，用手持放大镜很难观察到，体视显微镜下观察受 害果实，在产